Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:16 min. • July 8th, 2025
Um linfonodo é um órgão linfóide secundário em forma ovóide presente em todo o corpo que funciona na ponte entre as respostas imunes inatas e adaptativas, permitindo interações entre as células imunes.
Para isolar um linfonodo murino poplíteo drenante - um nódulo que recebe linfa das patas traseiras - comece pegando um camundongo eutanasiado fixado em um palco em decúbito ventral.
Prepare o mouse aplicando óleo mineral na região da panturrilha das patas traseiras. O óleo evita a deposição de pêlo ao redor do local da incisão cirúrgica durante a remoção da pele.
Faça uma incisão na linha média do calcanhar ao joelho na região da panturrilha. Dissocie a pele da musculatura subjacente e exponha a fossa poplítea - uma depressão rasa atrás da articulação do joelho.
O linfonodo de drenagem poplítea aparece como uma esfera translúcida dentro da fossa - embutida no tecido adiposo da fossa. Remova o linfonodo e coloque-o em uma placa de cultura.
Em seguida, remova cuidadosamente o tecido adiposo ao redor do nódulo para auxiliar na imagem do microscópio. Cubra o órgão com um lençol absorvente embebido em um tampão apropriado. O tampão ajuda a manter o nível de hidratação para preservar a viabilidade do tecido.
O linfonodo de drenagem poplítea está pronto para ensaios de imagem ex vivo a jusante.
Para a colheita de linfonodos de drenagem poplítea, aplique óleo mineral na panturrilha e no joelho no lado injetado do animal. Em seguida, faça uma incisão na linha média da panturrilha, do calcanhar ao joelho, e dissocie a musculatura da panturrilha da pele.
Exponha a fossa poplítea. O linfonodo poplíteo aparecerá como uma esfera translúcida dentro da fossa. Em seguida, remova o linfonodo com a pinça curva de microcirurgia.