Um método de dissecção para colher linfonodos de drenagem poplítea murina para imagens ex vivo

Um linfonodo é um órgão linfóide secundário em forma ovóide presente em todo o corpo que funciona na ponte entre as respostas imunes inatas e adaptativas, permitindo interações entre as células imunes.

Para isolar um linfonodo murino poplíteo drenante - um nódulo que recebe linfa das patas traseiras - comece pegando um camundongo eutanasiado fixado em um palco em decúbito ventral.

Prepare o mouse aplicando óleo mineral na região da panturrilha das patas traseiras. O óleo evita a deposição de pêlo ao redor do local da incisão cirúrgica durante a remoção da pele.

Faça uma incisão na linha média do calcanhar ao joelho na região da panturrilha. Dissocie a pele da musculatura subjacente e exponha a fossa poplítea - uma depressão rasa atrás da articulação do joelho.

O linfonodo de drenagem poplítea aparece como uma esfera translúcida dentro da fossa - embutida no tecido adiposo da fossa. Remova o linfonodo e coloque-o em uma placa de cultura.

Em seguida, remova cuidadosamente o tecido adiposo ao redor do nódulo para auxiliar na imagem do microscópio. Cubra o órgão com um lençol absorvente embebido em um tampão apropriado. O tampão ajuda a manter o nível de hidratação para preservar a via