Matando células K562 por células mononucleares do sangue periférico expostas a preparações de produtos de tabaco

As células tumorais ativam as células imunes efetoras para liberar citocinas e grânulos citolíticos contendo perforina e granzimas. A perforina forma poros na membrana da célula tumoral, facilitando a entrada da granzima na célula e iniciando a apoptose, causando a morte celular.

Para analisar a função citolítica das células mononucleares do sangue periférico humano, PBMCs, após a preparação do produto de tabaco, TPP, exposição, pegue uma placa de vários poços com concentrações crescentes de TPP. Um poço contendo meio atua como controle.

Adicione a suspensão PBMC. O principal agente imunossupressor das TPPs, a nicotina, liga-se aos receptores nicotínicos de acetilcolina dos PBMCs, regulando negativamente a produção de citocinas pró-inflamatórias.

centrifuga. Remova o sobrenadante contendo TPP. Ressuspenda os PBMCs na mídia. Adicione células K562 marcadas com fluorescência, células leucêmicas humanas com maior suscetibilidade à citotoxicidade das células efetoras de PBMC, aos poços.

As

células efetoras tratadas com TPP com respostas imunes suprimidas exibem expressão reduzida de perforina e liberação de citocinas, diminuindo a capacidade citolítica do PBMC.

centrifuga. Ressuspenda a