Resposta Imune

Este vídeo demonstra imagens in vivo para estudar a dinâmica de recrutamento de neutrófilos em um local de infecção em um camundongo transgênico imunocomprometido com neutrófilos que expressam GFP. Envolve a injeção de bactérias luminescentes para causar uma infecção. Isso leva ao recrutamento de neutrófilos para o local da infecção, cujo rastreamento é feito por imagem.

Neste vídeo, demonstramos a ativação de macrófagos derivados da medula óssea em resposta ao lipopolissacarídeo bacteriano e imunoglobulina intravenosa.

Este vídeo demonstra a ativação dos macrófagos peritoneais de um camundongo usando imunoglobulina intravenosa e lipopolissacarídeo bacteriano. A co-estimulação ativa os macrófagos peritoneais em macrófagos anti-inflamatórios que possuem atividade imunorreguladora.

Este vídeo demonstra uma técnica ex vivo para induzir a morte de células cerebrais mediada por células T CD8+ citotóxicas. Após a obtenção de fatias de cérebro, as células T CD8+ direcionadas a oligodendrócitos ativados são transferidas para as fatias para atingir a bainha de mielina e os oligodendrócitos. Após a incubação, o dano à mielina e a morte neuronal podem ser avaliados histologicamente nas regiões de interesse.

Neste vídeo, descrevemos um protocolo para testar a eficácia de uma vacina acelular contra coqueluche acelular contra a infecção por Bordetella pertussis em camundongos. Após a vacinação, os camundongos foram submetidos à infecção e seu homogeneizado tecidual foi cultivado para analisar as colônias bacterianas como uma leitura da imunidade protetora induzida pela vacina.

Neste vídeo, descrevemos um método para estudar a dinâmica das organelas em linfócitos B após sua ativação com microesferas revestidas de antígeno.

Este vídeo demonstra a ativação de células B in vitro. O processo envolve a interação do antígeno com os receptores de células B, levando à remodelação do citoesqueleto, formação de sinapses imunes, movimento de lisossomos, internalização de antígenos, processamento e subsequente apresentação em moléculas de MHC para ativação de células B.

Este vídeo demonstra uma técnica para gerar um modelo murino de colite induzido por produtos químicos - uma doença inflamatória intestinal. O camundongo pode consumir uma solução de sulfato de sódio dextrano (DSS) por um período adequado. Após o consumo, o DSS danifica o muco e a barreira da camada epitelial no cólon, permitindo que os micróbios intestinais entrem no tecido subjacente - onde são detectados pelas células imunes residentes para mediar uma resposta imune exagerada, resultando em...

Neste vídeo, demonstramos o efeito de diferentes concentrações de anticorpos anti-c-fms na osteoclastogênese, que é o processo de formação de osteoclastos a partir de progenitores de osteoclastos.

Este vídeo demonstra a quantificação de mediadores inflamatórios durante a infecção, incubando células imunes derivadas do tecido pulmonar humano com Haemophilus influenzae. A citometria de fluxo é usada para medir a fluorescência de citocinas em linfócitos marcados, correlacionando-se com a produção de citocinas pró-inflamatórias em resposta à infecção bacteriana.

Neste vídeo, demonstramos um ensaio de quimioluminescência in vitro para detectar a geração de espécies reativas de oxigênio por neutrófilos após a exposição a um biofilme bacteriano opsonizado.

Este vídeo demonstra um ensaio in vitro para estudar a interação neutrófilo-biofilme. As bactérias patogênicas embutidas no biofilme e neutrófilos isolados foram marcadas usando marcadores fluorescentes, e a resposta imune pelos neutrófilos e a evasão da resposta imune pelas bactérias foram avaliadas usando um microscópio de fluorescência.

Este vídeo demonstra um método para detectar a ativação do inflamassoma NLRP3 em macrófagos usando sondas repórteres fluorescentes. As células são tratadas com ionóforos de potássio e glicina para induzir a montagem do inflamassoma e a ativação da caspase-1. As sondas repórteres fluorescentes visualizam a caspase-1 ativada e as células são coradas com um corante fluorescente para visualização dos núcleos.

Este vídeo demonstra uma técnica para estudar a formação de inflamassoma contendo 3 (NLRP3) contendo domínio de pirina da família de receptores semelhantes a NOD em macrófagos primários por meio de imunofluorescência. Os macrófagos são primeiro preparados com lipopolissacarídeo bacteriano (LPS) para regular positivamente a expressão da proteína NLRP3. A exposição dos macrófagos à nigericina - um ionóforo de potássio - leva à ativação do NLRP3 e à formação de inflamassomas, que são visualizados...

Este vídeo demonstra o ensaio de lactato desidrogenase para detectar a morte de macrófagos mediada por inflamassoma. Os macrófagos são expostos ao lipopolissacarídeo para priming, seguido pela exposição à nigericina para causar a morte celular induzida pelo inflamassoma, que é determinada pelo ensaio de lactato desidrogenase.

Este vídeo demonstra a indução e visualização de armadilhas extracelulares de neutrófilos ou TNEs em neutrófilos pré-marcados usando soro de paciente contendo anticorpos anticitoplasma de neutrófilos. Além disso, o uso de um corante de DNA impermeável e microscopia de fluorescência permite a visualização de NETs.

Este vídeo demonstra o isolamento lipídico de neutrófilos humanos por um sistema de solvente bifásico usando metanol e clorofórmio.

Neste vídeo, demonstramos um ensaio de citotoxicidade para avaliar a infecção por Cryptococcus neoformans, um fungo patogênico, em macrófagos. A citotoxicidade é determinada pela liberação da enzima lactato desidrogenase citoplasmática devido à lise de macrófagos causada pela infecção por Cryptococcus neoformans.

Este vídeo demonstra um sistema de infecção baseado em inserção de membrana permeável para avaliar o impacto das toxinas bacterianas secretadas. Ao eliminar o contato direto entre o patógeno bacteriano e as células hospedeiras usando uma membrana permeável, essa técnica permite estudar o efeito das toxinas secretadas por bactérias patogênicas nas células hospedeiras de mamíferos.

Este vídeo demonstra um sistema de inserção de membrana permeável para investigar o impacto de toxinas bacterianas nas células hospedeiras de maneira controlada e isolada. Essa abordagem permite a exposição seletiva das células às toxinas, mantendo uma separação física que imita a interação hospedeiro-patógeno natural.

Este vídeo demonstra o ensaio de aderência bacteriana para avaliar a adesão bacteriana marcada com GFP à cultura de células epiteliais para estudar a dinâmica das interações patógeno-hospedeiro usando imagens baseadas em microscopia de fluorescência.

Este vídeo demonstra uma técnica para detectar a resposta local e global do íon cálcio após a infecção por Shigella de células epiteliais humanas. A Shigella invade as células hospedeiras e libera efetores de invasão, impactando os níveis de cálcio intracelular. A amplitude e a frequência do cálcio citosólico local e global são estudadas usando um indicador fluorescente.

Este vídeo analisa a formação de sinapses imunes entre células T em preparações panleucocitárias não purificadas e Staphylococcus aureus enterotoxina B, células Raji carregadas com SEB. O enriquecimento de CD3 e F-actina é observado na sinapse imune usando citometria de fluxo de imagem.

Este vídeo demonstra um ensaio para estudar a regulação de células-tronco mesenquimais (MSC) da fagocitose de macrófagos em uma cocultura. Após a co-cultura de MSC com macrófagos, partículas de zimosana não opsonizadas conjugadas a um fluoróforo sensível ao pH são adicionadas para serem fagocitadas pelos macrófagos. Com o aumento da fagocitose, a intensidade da fluorescência aumenta, permitindo a determinação da regulação da atividade fagocítica mediada por CTM.

Neste vídeo, demonstramos a entrega intracisternal de Neisseria meningitidis em um modelo de camundongo para gerar infecção por meningite.

Neste vídeo, descrevemos um método para identificar os inibidores de quinase de pequenas moléculas que modulam a apoptose de timócitos imaturos CD4+CD8+ duplo-positivos auto-reativos. A apoptose é induzida nos timócitos duplo-positivos, ativando-os com esferas magnéticas revestidas com anti-CD3 e anti-CD28; Isso é seguido por um tratamento com inibidores de moléculas pequenas e análise de citometria de fluxo para detectar se os inibidores modulam a expressão do marcador apoptótico.

Neste vídeo, descrevemos um procedimento para realizar uma nanoinjeção de um vírus de RNA de fita simples de sentido positivo em moscas Drosophila machos adultos e, posteriormente, estudamos as respostas antivirais iniciadas devido à infecção. A análise da reação em cadeia da polimerase identifica a regulação positiva de genes específicos nas moscas infectadas que indicam a ativação das vias de resposta imune, incluindo interferência de RNA e sinalização JAK / STAT.

Este vídeo demonstra o método de coloração de hematoxilina e eosina (H&E) para avaliar o dano ao cólon em um modelo murino de colite induzida por DSS - uma doença inflamatória intestinal. Ao isolar o cólon de um camundongo tratado com DSS e obter seções do tecido, a coloração H & E das seções ajuda a identificar o dano tecidual mediado pela inflamação.

Neste vídeo, descrevemos a metodologia para configurar um sistema de cultura de órgãos intestinais ex vivo para estudar as interações entre fragmentos de tecido intestinal de camundongos e bactérias intestinais específicas. O dispositivo consiste em dois pares de portas de entrada e saída, a primeira conectando o lúmen do tecido intestinal e fornecendo a suspensão bacteriana específica a ele, e a segunda fornecendo continuamente meios aos poços do dispositivo para manter a viabilidade do tecido...

Este vídeo demonstra uma técnica in vitro para estudar o impacto do tratamento antimicrobiano em agregados de Pseudomonas aeruginosa (Pa). As células Pa marcadas com fluorescência são cultivadas como agregados, imitando o padrão de crescimento durante a infecção. Ao desafiar os agregados com uma concentração subletal do antibiótico colistina, a avaliação em tempo real da interação bactéria-antibiótico é realizada por meio de microscopia de fluorescência.

Este vídeo demonstra uma técnica de quantificação in vitro para determinar a infecção de macrófagos por Listeria monocytogenes pelo ensaio de unidade formadora de colônias. As colônias bacterianas na placa de ágar representam a população bacteriana intracelular que escapa do mecanismo de defesa do hospedeiro e sobrevive dentro dos macrófagos.

Neste vídeo, quantificamos Listeria monocytogenes intracelulares e extracelulares, uma bactéria patogênica intracelular, após a infecção de macrófagos cultivados in vitro usando citometria de fluxo.

Este vídeo demonstra a nanoinjeção de suspensão bacteriana na cavidade do corpo da mosca, resultando em multiplicação bacteriana e infecção. A resposta imune da mosca elimina algumas bactérias, enquanto outras escapam da depuração imunológica e sobrevivem dentro do hospedeiro, causando uma infecção.

Este vídeo demonstra uma técnica para infectar Drosophila introduzindo uma bactéria patogênica diretamente em sua cavidade corporal. Este método contorna as barreiras epiteliais e outros mecanismos de defesa passiva, permitindo a indução de infecção sistêmica. Após a infecção, a resposta imune resultante é avaliada monitorando a mortalidade por moscas e realizando ensaios a jusante.

Neste vídeo, demonstramos uma técnica para medir a carga bacteriana de E. coli após a injeção de E. coli no tórax de Drosophila melanogaster.

Neste vídeo, demonstramos o ensaio de efeito citopático para determinar a dose viral infecciosa de cultura de tecidos do vírus Drosophila C em células Drosophila S2*. Uma variedade de concentrações virais é usada para infectar as células cultivadas. A proporção de células que exibem alterações estruturais é determinada e esses dados são usados para calcular a dose infectante da cultura de tecidos.

Este vídeo demonstra um método para induzir inflamação da superfície ocular e disfunção da glândula meibomiana em um modelo murino. A estimulação do sistema imunológico do camundongo usando um imunógeno e a reestimulação posterior com o mesmo imunógeno promovem a inflamação da superfície ocular, o que causa o entupimento da secreção da glândula meibomiana por meio de aggNETs produzidos por neutrófilos e leva à doença do olho seco.

Este vídeo demonstra a ativação de proteínas caspase em macrófagos humanos usando proteínas repórter de complementação de fluorescência bimolecular. Os pró-domínios da caspase-1 são fundidos com fragmentos não fluorescentes de proteínas de Vênus, que são recrutados para complexos inflamassomas. A proximidade dos inflamassomas induz o redobramento e fluorescência dos fragmentos de Vênus, confirmando a ativação da caspase nos macrófagos.

Este vídeo demonstra o efeito das preparações de produtos de tabaco, TPPs, na produção de citocinas a partir de células mononucleares do sangue periférico humano usando citometria de fluxo. O tratamento das células com TPP regula negativamente a produção de citocinas pró-inflamatórias, que é estimada após a estimulação com lipopolissacarídeos, seguida de imunocoloração e análise por citometria de fluxo.

Neste vídeo, demonstramos a preparação de biofilme in vitro por S. aureus em uma placa multipoços revestida com poli-L-lisina. A placa formada por biofilme pode ser usada para experimentos a jusante.

Este vídeo demonstra uma técnica in vitro para estimular linfócitos via Haemophilus influenzae não tipável (NTHi) e avaliar a resposta imune. A incubação de células mononucleares isoladas do sangue periférico (PBMCs) com NTHi faz com que as células bacterianas estimulem os linfócitos T, levando à produção de citocinas. Ao inibir a secreção de citocinas, a coloração por imunofluorescência é realizada para detectar as citocinas intracelulares acumuladas em linfócitos T estimulados.

Este vídeo demonstra a avaliação da colite induzida por produtos químicos por meio de coloração imuno-histoquímica do tecido do cólon de camundongos. Em uma seção de tecido corado, a presença de um grande número de células imunorresponsivas no tecido danificado representa a infiltração de células imunes durante a colite.

Neste vídeo, estudamos o efeito de um meio totalmente condicionado à fumaça, uma preparação de produto de tabaco combustível, na morte de células K562 por células mononucleares efetoras do sangue periférico.

Este vídeo demonstra uma técnica in vivo para avaliar um antígeno de teste induzindo inflamação da pele em um modelo murino. O antígeno de teste - um hapteno em uma solução de óleo / acetona - é aplicado topicamente na pele da orelha do camundongo e a inflamação da pele é avaliada após um período adequado.

Este vídeo demonstra um procedimento de biópsia por punção para criar uma ferida precisa em um modelo de camundongo. A excisão expõe a camada subcutânea da pele, fornecendo um local adequado para estudar as respostas imunes à infecção localizada por patógenos.