Uma coloração imuno-histoquímica para a detecção de antígenos do vírus da raiva

Comece com um slide carregando uma seção de tecido cerebral de camundongo infectado com vírus da raiva fixado em formalina e embebido em parafina. A seção fixa retém antígenos virais por meio de reticulação de proteínas.

Trate a lâmina com uma solução de xileno para remover a parafina.

Mergulhe a lâmina em concentrações decrescentes de etanol para reidratar o tecido, tornando-o compatível com soluções aquosas.

Introduza um tampão contendo protease para interromper as ligações cruzadas de proteínas, melhorando a acessibilidade do antígeno.

Mergulhe em peróxido de hidrogênio para bloquear as peroxidases endógenas e aplique uma solução de bloqueio para evitar interações inespecíficas.

Introduzir anticorpos primários específicos para o antígeno da raiva, formando complexos antígeno-anticorpo.

Adicione anticorpos secundários biotinilados, que se ligam aos anticorpos primários. Incubar com enzimas peroxidase conjugadas com estreptavidina, que interagem com a biotina.

Introduzir um substrato de peroxidase, produzindo um precipitado vermelho-magenta.

Contra-core o tecido com uma coloração nuclear, seguida por um agente azulado, corando os núcleos de azul.

A imagem imuno-histoquímica revela