Aumentando a transdução viral em células assassinas naturais usando um polímero catiônico

Pegue as células natural killer, ou NK. Adicione vetores de lentivírus compreendendo enzimas virais e moléculas de RNA projetadas que codificam uma proteína fluorescente.

Adicione polímeros catiônicos e sedimente as células e vírus.

Os polímeros neutralizam as cargas negativas tanto no vírus quanto na célula, facilitando a fusão da membrana.

O RNA é transcrito reversamente em DNA e integrado ao genoma do hospedeiro, permitindo a expressão de proteínas fluorescentes.

Adicione meios suplementados com a citocina interleucina-2 ou IL-2.

A IL-2 desencadeia a sinalização intracelular que promove a sobrevivência e proliferação de células NK, preservando a expressão do transgene.

Transfira a mistura para um poço revestido com anticorpos que se ligam a imunorreceptores específicos nas células NK, fazendo com que elas liberem citocinas antivirais.

Quantifique as citocinas liberadas para avaliar o impacto do polímero na produção de citocinas.

Adicione corantes fluorescentes para marcar o DNA das células necróticas.

Usando citometria de fluxo, identifique células vivas e quantifique o sinal da proteína fluorescente para medir a eficiência da transdução induzida por polímero.

Suspenda células N