Name: Técnica modificada para ligação da artéria coronária em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: Aprenda a técnica de ligadura da artéria coronária esquerda em camundongos para induzir infarto do miocárdio. Este método permite estudar função cardíaca e avaliar intervenções terapêuticas em modelo animal.

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1. Texto protocolo <ol><li> Antes de prosseguir para a cirurgia, anestesiar um rato macho (C57BL / 6), que é de 6 semanas de idade ou mais velhos por inalação de 2-5% de isoflurano. Realizar uma pitada de igual para confirmar que o animal é suficientemente anestesiados. </li><li> O rato inconsciente é colocado de costas sobre uma almofada quente para manter uma temperatura constante de 37 ° C. O peito precordial no lado esquerdo é raspada. </li><li> Fixe o mouse para um dispositivo de intubação com uma câmara de isoflurano-cheia. Insira uma sonda de 0,2 de diâmetro interno para dentro da traqueia do rato através da boca, em seguida, colocar o rato intubado numa área asséptica cirúrgica (37 ° C por um controlador de temperatura) e ligar o tubo endotraqueal a um ventilador (taxa de 120 por minuto, a pressão de 4-6 mmH 2 O); desinfectar a área com betadine e etanol a 75%. </li><li> Aplicar pomada oftálmica para os olhos do rato. Coloque eletrodos padrão ECG nas patas e conecte o mouse para o gravador de ECG. </li&gt; <li> Use tesoura estéril para fazer uma incisão de 1,5 cm ao longo da linha axilar média. Tesoura são usados ​​em vez de um bisturi para evitar lesões no tecido subjacente, em ratos. Em seguida, use uma tesoura sem corte-ponta dos vasos de dissecar e retirar o músculo precordial da parede torácica. </li><li> Realizar uma toracotomia esquerda entre a terceira ea quarta costelas para visualizar a superfície anterior do coração e do pulmão esquerdo </li><li> Além disso retrair a parede torácica, utilizando um retractor adequado, a fim de melhorar a visualização e a acessibilidade. Retire o pericárdio, usando uma pinça dentada e atraumáticas tesouras. </li><li> Ligar a artéria coronária esquerda, colocando a agulha (ligada com fio de sutura 7-0 Ethilon) sob a artéria com uma banda de miocárdio entre a ligadura e a artéria. A oclusão da artéria coronária bem sucedida é verificada por hipocinesia / acinesia da parede ventricular anterior esquerda e pelas alterações de gravação de ECG (por exemplo, a elevação do segmento ST, QRS broadening) </li><li> Feche o peito, colocando dois pontos (6-0 Ethilon) nas costelas terceiro e quarto lugares. </li><li> Use 5-0 Ethilon para fechar a pele. </li><li> Para analgesia pós-operatória, administrar uma única injecção intraperitoneal de buprenorfina (0,05 mg / kg). Os animais se recupera espontaneamente dentro de 2-5 minutos depois de parar anestesia isoflurano. Por fim, colocar o rato em uma gaiola quente e proporcionar 0,6 mg / ml de buprenorfina na água de beber (sobreposição de texto: 0,6 mg / ml em água de beber), para evitar desconforto pós-operatório. Acompanhar de perto o mouse para as primeiras 24 horas após a cirurgia. </li><li> Ecocardiografia é realizada para avaliar a função cardíaca de 3 dias após infarto do miocárdio. Sucesso do procedimento é verificado por acinesia na parede ventricular anterior esquerda (veja o vídeo em anexo nos Resultados). No final da experiência, o coração irá ser recolhido e armazenado em-80oC para posteriores investigações. Expressão de genes ie. </li></ol>

<ol><li>Tabrizchi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-blocker+therapy+after+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev.+Cardiovasc.+Ther%22%5BJournal%5D)">Beta-blocker therapy after acute myocardial infarction.</a> Expert Rev. Cardiovasc. Ther. 11, 293-296 (2013).</li>
<li>Pell, S., Fayerweather, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+in+the+incidence+of+myocardial+infarction+and+in+associated+mortality+and+morbidity+in+a+large+employed+population%2C+1957-1983%5BTitle%5D)+AND+%22N.+Engl.+J.+Med%22%5BJournal%5D)">Trends in the incidence of myocardial infarction and in associated mortality and morbidity in a large employed population, 1957-1983.</a> N. Engl. J. Med. 312, 1005-1011 (1985).</li>
<li>Ramunddal, T., Gizurarson, S., Lorentzon, M., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antiarrhythmic+effects+of+growth+hormone--in+vivo+evidence+from+small-animal+models+of+acute+myocardial+infarction+and+invasive+electrophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Electrocardiol%22%5BJournal%5D)">Antiarrhythmic effects of growth hormone--in vivo evidence from small-animal models of acute myocardial infarction and invasive electrophysiology.</a> J. Electrocardiol. 41, 144-151 (2008).</li>
<li>Thom, T., Haase, N., Rosamond, W., Howard, V. J., Rumsfeld, J., Manolio, T., Zheng, Z. J., Flegal, K., O'Donnell, C., Kittner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2006+update%3A+A+report+from+the+american+heart+association+statistics+committee+and+stroke+statistics+subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2006 update: A report from the american heart association statistics committee and stroke statistics subcommittee.</a> Circulation. 113, 85-151 (2006).</li>
<li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse%3A+A+comparison+with+coronary+artery+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 289, 1291-1300 (2005).</li>
<li>Omerovic, E., Ramunddal, T., Lorentzon, M., Nordlander, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neuropeptide+y2+receptor+blockade+on+ventricular+arrhythmias+in+rats+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Effects of neuropeptide y2 receptor blockade on ventricular arrhythmias in rats with acute myocardial infarction.</a> Eur. J. Pharmacol. 565, 138-143 (2007).</li>
<li>Ahn, D., Cheng, L., Moon, C., Spurgeon, H., Lakatta, E. G., Talan, M. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+myocardial+infarcts+of+a+predictable+size+and+location+by+branch+pattern+probability-assisted+coronary+ligation+in+c57bl%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Induction of myocardial infarcts of a predictable size and location by branch pattern probability-assisted coronary ligation in c57bl/6 mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 286, 1201-1207 (2004).</li>
<li>Lindbom, M., Ramunddal, T., Camejo, G., Waagstein, F., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+effects+of+myocardial+creatine+depletion+on+left+ventricular+function+morphology+and+lipid+metabolism%3A+Study+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Card+Fail%22%5BJournal%5D)">In vivo effects of myocardial creatine depletion on left ventricular function morphology and lipid metabolism: Study in a mouse model.</a> J. Card Fail. 14, 161-166 (2008).</li>
<li>Omerovic, E., Bollano, E., Basetti, M., Kujacic, V., Waagstein, L., Hjalmarson, A., Waagstein, F., Soussi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetic%2C+functional+and+morphological+consequences+of+postinfarct+cardiac+remodeling+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mol.+Cell.+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Bioenergetic, functional and morphological consequences of postinfarct cardiac remodeling in the rat.</a> J. Mol. Cell. Cardiol. 31, 1685-1695 (1999).</li>
<li>Gao, E., Lei, Y. H., Shang, X., Huang, Z. M., Zuo, L., Boucher, M., Fan, Q., Chuprun, J. K., Ma, X. L., Koch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circ. Res. 107, 1445-1453 (2010).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

O procedimento cirúrgico de laqueadura LCA, como demonstrado neste relatório é um método confiável e reprodutível para a indução de infarto do miocárdio experimental em ratos 3, 6. A ligadura da ACE de acordo com este protocolo induz isquemia miocárdica envolvendo tipicamente ~ 40% do ventrículo esquerdo 3. Isso induz alterações significativas de ECG do segmento ST 7 e palidez visível na superfície anterior do coração. Devido ao enfarte do miocárdio grande, a mortalidade pode ser de até ...

técnica modificada para ligação da artéria coronária em ratos

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Enfarte do miocárdio (MI) é uma das mais importantes causas de mortalidade em humanos 1-3. A fim de melhorar a morbidade e mortalidade em pacientes com MI precisamos de melhor conhecimento sobre a fisiopatologia da isquemia miocárdica. Esse conhecimento pode ser útil para definir novos alvos terapêuticos para inovadoras terapias cardiovasculares 4. Modelo MI experimental em camundongos é um modelo cada vez mais popular de pequenos animais em pesquisa pré-clínica em que MI é induzida por meio de ligadura permanente ou temporária da artéria coronária esquerda (ACE) 5. Neste vídeo, descrevemos o método passo-a-passo de como induzir MI experimental em ratos. O animal é primeiro anestesiadas com isoflurano a 2%. O rato inconsciente é então intubados e conectados a um ventilador para a ventilação artificial. O lado esquerdo do peito é raspada e de 1,5 cm ao longo da incisão média axilar linha é feita na pele. O músculo peitoral maior esquerdo é sem rodeios dissociated até que as nervuras se encontram expostos. As camadas musculares são puxados para o lado e fixadas com um retractor de pálpebras. Após estas preparações, toracotomia esquerda é realizada entre as costelas, terceiro e quarto, a fim de visualizar a superfície anterior do coração e do pulmão esquerdo. O segmento proximal da artéria LCA é então ligado com um fio de sutura 7-0 Ethilon que normalmente induz uma dimensão do enfarte ~ 40% do ventrículo esquerdo. No final, a caixa é fechada e os animais recebem analgesia pós-operatória (Temgesic, 0,3 mg/50 ml, ip). Os animais são mantidos numa gaiola quente até recuperação espontânea.

<table border="1"><tbody><tr><td> Instrumento </td><td> Descrição da função </td></tr><tr><td> Blunt-ponta tesoura </td><td> Usado para cortar a pele, músculo peitoral intercostal, e suturas </td></tr><tr><td> Retrator olho </td><td> Usado para expor vista cirúrgico </td></tr><tr><td> Blunt-ponta fórceps </td><td> Usados ​​para agarrar a pele eo músculo </td></tr><tr><td> Suporte da agulha </td><td> Para segurar uma agulha </td></tr><tr><td> 5-0 </td><td> Utilizados para a sutura da pele </td></tr><tr><td> 6-0 ...

O procedimento cirúrgico utilizado para induzir o enfarte do miocárdio experimental em ratos começa com toracotomia esquerda entre a terceira e quarta das nervuras, a fim de visualizar a superfície anterior do coração e do pulmão esquerdo. A artéria coronária esquerda é ligada, a caixa é fechada e o rato é deixado a recuperar-se espontaneamente.

Técnica modificada para ligação da artéria coronária em ratos

O infarto do miocárdio (IM) é uma das causas mais importantes de mortalidade em seres humanos1-3. A fim de melhorar a morbidade e a mortalidade em pacientes com IM...

O objetivo geral deste procedimento é induzir infarto do miocárdio em camundongos. Isso é realizado inicialmente mediante uma incisão cutânea ao longo da linha axilar média. Em seguida, o coração é exposto por meio de uma toracotomia à esquerda, entre a terceira e a quarta costelas.Então, é feita uma ligadura no segmento proximal da artéria descendente anterior esquerda. Por fim, o tórax é fechado e o camundongo é devolvido à gaiola para recuperação espontânea. Em última análise, o infarto do miocárdio pode ser avaliado por eletrocardiografia ou ecocardiografia.A demonstração visual deste método é essencial, pois a ligadura da artéria coronária próxima ao lado esquerdo é difícil de aprender. Uma infecção miocárdica adequada é garantida ao posicionar a ligadura logo abaixo do orifício esquerdo. No entanto, é importante não perfurar o VAE esquerdo, pois isso pode causar hemorragia letal.Para iniciar a cirurgia, anestesie um camundongo com seis semanas de idade ou mais por inalação com 2 a 5% de fluoreto. Realize um aperto no dedo do pé para confirmar que o animal está suficientemente anestesiado. Uma vez que o camundongo esteja completamente sedado, transfira-o para a área cirúrgica

modified-technique-for-coronary-artery-ligation-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Numerosas manipulações genéticas e / ou injeções intramiocárdica de genes, proteínas, células e / ou biomateriais são sobrepostos sobre a dimensão do tempo em estudos de lesão de isquemia / reperfusão aguda e crônica em camundongos remodelação. Este vídeo ilustra os procedimentos de microcirurgia para isquemia / reperfusão, ligadura da artéria coronária permanente, e estudos de injeção intramiocárdica.

Ligadura da artéria coronária e injeção intramiocárdica em um modelo murino de infarto

Neste vídeo, descrevemos um procedimento cirúrgico para gerar um modelo de infarto do miocárdio em camundongos ligando permanentemente a artéria coronária descendente anterior.

Gerando Modelo Murino de Infarto do Miocárdio: Um Procedimento Cirúrgico para Ligadura Permanente da Artéria Coronária Descendente Anterior em Modelo de Camundongo

Nós introduzimos um método cirúrgico para induzir experimental de isquemia / reperfusão (I / R) prejuízo para simular o infarto do miocárdio (MI) em modelos de mouse que permite uma maior clareza no posicionamento da ligadura na artéria descendente anterior esquerda (LAD) para aumentar a reprodutibilidade de experimentos MI em camundongos.

Um modelo murino de isquemia-reperfusão, através da ligadura da artéria Descendente Anterior Esquerda

Um modelo altamente reprodutível para infarto do miocárdio em camundongos com manipulações minimamente invasivas é descrito. O modelo pode ser facilmente executado, resultando em alta reprodutibilidade e taxa de sobrevida. Assim, o modelo descrito reduzirá o número de animais necessários conforme solicitado pelo princípio 3R (Substituição, Refinamento e Redução).

Minimal procedimento cirúrgico invasivo de induzir Infarto do Miocárdio em Ratos

A insuficiência cardíaca é a principal causa de hospitalização e uma das principais causas de mortalidade. Um modelo de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior em camundongos é aplicado para investigar o remodelamento ventricular e a disfunção cardíaca pós-infarto do miocárdio. A técnica de medidas hemodinâmicas invasivas em camundongos é apresentada.

A ligação permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda em Ratos: Um Modelo de Remodelação pós-infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca

Fornecemos um método confiável para ligadura da artéria descendente anterior (DA) em um modelo de camundongo. Este método é comparativamente menos invasivo do que outros métodos, envolvendo intubação endotraqueal, abordagem de toracotomia do lado esquerdo e toracocentese. Este método pode ser usado como modelo para infarto agudo do miocárdio (IM) agudo e crônico.

Murino Descendente Anterior Esquerda (LAD) ligação da artéria coronária: um modelo melhorado e simplificado para Infarto do Miocárdio

Nisto nós descrevemos um procedimento cirúrgico que mostra como conseguir a ligadura permanente da artéria coronária descendente esquerdo-anterior nos ratos. Este modelo é de grande relevância para investigar a fisiopatologia do infarto do miocárdio e os processos biológicos concomitantes.

Modelo de infarto do miocárdio murino usando ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda

Sob anestesia adequada, o coração de camundongo foi exteriorizado através do espaço intercostal, e o infarto do miocárdio foi induzido com sucesso pela ligadura da artéria descendente anterior (DA) usando materiais prontamente disponíveis na maioria dos laboratórios.

Um Método Simples Modificado para Indução de Infarto do Miocárdio em Camundongos

Descrevemos um método simples e reprodutível que pode induzir infarto do miocárdio ou lesão de isquemia-reperfusão miocárdica em camundongos por ligadura precisa da artéria coronária descendente anterior esquerda através de micromanipulação.

Indução de Infarto do Miocárdio e Lesão de Isquemia-Reperfusão Miocárdica em Camundongos

Apresenta-se aqui um procedimento cirúrgico para ligadura permanente da artéria coronária esquerda em camundongos. Este modelo pode ser utilizado para investigar a fisiopatologia e a resposta inflamatória associada após o infarto do miocárdio.

Laqueadura da Artéria Coronária Esquerda: Um Modelo Murino Cirúrgico de Infarto do Miocárdio

Aprenda a técnica de ligadura da artéria coronária esquerda em camundongos para induzir infarto do miocárdio. Este método permite estudar função cardíaca e avaliar intervenções terapêuticas em modelo animal.

Técnica modificada para ligação da artéria coronária em ratos

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