Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:19 min. • July 8th, 2025
Comece com um camundongo anestesiado sob um estereomicroscópio, com a parte inferior de uma das orelhas do camundongo fixada no palco por meio de fita adesiva.
Os olhos são revestidos com uma pomada para evitar que sequem.
Traga uma seringa carregada com o estágio de esporozoíto do Plasmodium, um parasita da malária. Os esporozoítos vivos são atenuados por radiação para torná-los não infecciosos.
Usando o estereomicroscópio, injete na parte superior da orelha, penetrando na camada mais externa da epiderme e liberando os esporozoítos na derme.
Mantenha a agulha no lugar brevemente para evitar o refluxo da suspensão injetada antes de removê-la.
Um inchaço visível no local da injeção, denominado pápula, confirma uma injeção bem-sucedida.
Realize várias injeções no mesmo ouvido.
Solte o ouvido injetado e repita as injeções no outro ouvido.
Após a injeção, permita que o mouse se recupere.
Os esporozoítos injetados desencadeiam uma resposta imune, preparando o sistema imunológico contra o parasita.
Antes de injetar os esporozoítos, confirme o nível adequado de sedação do animal experimental com a pinça do dedo do pé e aplique pomada para os olhos para evitar o ressecamento da córnea. Em seguida, trabalhando rapidamente, use fita adesiva transparente para fixar suavemente o lado ventral do pavilhão auricular sob um estereomicroscópio e carregue uma seringa de 10 microlitros equipada com uma agulha de calibre 35 com 0,6 microlitros de parasitas ressuspensos.
Em seguida, insira cuidadosamente a agulha, com o lado chanfrado para cima, abaixo da epiderme no lado dorsal da orelha e injete 0,15 microlitros de esporozoítos no local. Uma pápula característica será observada no local da injeção. Depois de injetar a derme mais três vezes, conforme demonstrado, remova cuidadosamente a fita e monitore o mouse até que esteja totalmente recuperado.