Um método in vitro para gerar organoides cerebrais humanos

Comece com uma cultura de neuroesferas, aglomerados flutuantes de células progenitoras neuroepiteliais.

Transfira essas neuroesferas para uma folha de incorporação.

Remova a mídia. Adicione uma gota de matriz de membrana extracelular contendo proteínas e fatores de crescimento a cada neuroesfera.

Incubar para que a matriz se solidifique, incorporando as neuroesferas dentro dela.

Agora, transfira as neuroesferas incorporadas à matriz usando meios de neuroesferas para uma placa de cultura contendo meios de neuroesferas.

incubar. A matriz da membrana extracelular e seus constituintes facilitam a diferenciação das células progenitoras neuroepiteliais em células neuroepiteliais que proliferam e formam lúmens cheios de líquido.

Após a incubação, transfira as neuroesferas para um frasco giratório contendo meios organoides cerebrais pré-aquecidos. Incube com agitação para aumentar a difusão de oxigênio e nutrientes, promovendo o crescimento celular.

Fatores de crescimento e inibidores de pequenas moléculas em meios promovem a diferenciação neural e se desenvolvem em células de regiões cerebrais específicas, formando organoides cerebrais maduros.

Para iniciar este procedimento, colete as ne