Técnicas de Cultura Neuronal

O vídeo demonstra um método para cultivar neurônios de hipocampos murinos. Inicialmente, os hipocampos passam por digestão enzimática para quebrar a matriz do tecido extracelular. Posteriormente, o tecido digerido é mecanicamente interrompido para isolar neurônios individuais. Finalmente, esses neurônios são cultivados em células alimentadoras da glia.

Este vídeo demonstra o método de cultura de neurônios embrionários criopreservados, envolvendo descongelamento controlado, diluição com meio neurobasal e semeadura em uma placa revestida de poli-L-lisina. A incubação subsequente suporta o crescimento e a manutenção das conexões neuronais.

O vídeo ilustra uma técnica para cultivar neurônios GABAérgicos e glutamatérgicos fluorescentes do córtex e tecidos do hipocampo de filhotes de camundongos transgênicos. O processo inclui a obtenção de suspensões purificadas de neurônios unicelulares, classificando os neurônios GABAérgicos com base em sua expressão de proteína de fluorescência e semeando-os em placas revestidas de poli-L-lisina para facilitar a fixação e a proliferação celular.

O vídeo demonstra uma técnica para cultivar astrócitos primários do córtex de ratos. O córtex é mecanicamente dissociado para obter uma suspensão homogênea de células gliais, que é então plaqueada em placas revestidas com polipeptídeos para promover a proliferação seletiva de astrócitos. Posteriormente, os astrócitos são dissociados enzimaticamente das placas e transferidos para meios frescos, permitindo a cultura de astrócitos puros.

O vídeo demonstra uma técnica para isolar a microglia do córtex de um cérebro de camundongo adulto. Primeiro, o córtex sofre segmentação e homogeneização para remover neurônios e outras células gliais, preservando a microglia. Em seguida, a suspensão celular é exposta a microesferas magnéticas anti-mielina e a um campo magnético, separando efetivamente as células da micróglia e mielóides dos detritos de mielina e células contendo mielina.

O vídeo demonstra um método simples para cultivar astrócitos murinos isoladamente de outras células cerebrais. Durante a cultura, usando meios específicos de astrócitos e inibindo a adesão de células não astrocíticas, o método cultiva seletivamente astrócitos. Esses astrócitos cultivados exibem morfologia estrelada com processos finos.

O vídeo demonstra um método para gerar neurônios corticais excitatórios a partir de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos (hiPSCs). Após a indução da doxiciclina, as hiPSCs superexpressam a neurogenina-2, um fator de transcrição neural-específico. Ao usar meios específicos e co-cultura com astrócitos, esse processo facilita a diferenciação dos hiPSCs em neurônios com conexões sinápticas.

Este vídeo demonstra uma técnica para gerar uma cultura primária de neurônios e glia da bexiga urinária de um rato. Ele descreve as etapas envolvidas na preparação do tecido, digestão enzimática para obter células únicas e cultura das células em um meio específico de neurônio para estabelecer uma cultura neuronal e glial primária.

Este vídeo demonstra a utilização de um chip microfluídico de plástico pré-montado para a cultura compartimentada de neurônios primários do hipocampo de ratos. Os neurônios são colocados em um dos compartimentos microfluídicos, onde se ligam e crescem, estendendo seus axônios através dos microsulcos do chip para o compartimento adjacente. Os microsulcos estreitos impedem a entrada dos corpos celulares neuronais, permitindo assim a separação física entre os compartimentos somático e axonal.

Este vídeo demonstra a técnica para isolar e cultivar neurônios granulares cerebelares primários de camundongos. As células são tratadas com um antimetabólito para eliminar as células gliais em proliferação e produzir uma cultura pura de neurônios granulares cerebelares.

Este vídeo demonstra o processo de isolamento de explantes de gânglios espirais do ouvido interno e co-cultura com o órgão de Corti em uma matriz de multieletrodos. Os gânglios espirais são cuidadosamente extraídos e seccionados em seções de tecido menores ou explantes. Esses explantes são cultivados na área ativa da matriz de multieletrodos para promover o crescimento do processo neuronal.

O vídeo demonstra um método para cultivar células ganglionares primárias da retina a partir de embriões de peixe-zebra. Os embriões em estágio inicial são submetidos à dissecção para isolar os olhos, que são posteriormente dissociados mecanicamente em uma suspensão de células ganglionares da retina. Esta suspensão celular é cultivada em lamínulas revestidas com proteínas adesivas para facilitar o desenvolvimento do axônio.

Este vídeo demonstra uma técnica para gerar células neuronais a partir de células-tronco pluripotentes derivadas do sangue (BD-PSCs). As BD-PSCs são obtidas por meio da reprogramação de células progenitoras do sangue. As BD-PSCs indiferenciadas são cultivadas em lamínulas revestidas com substrato de cultura de células usando um meio de indução neural e um meio de diferenciação neural, desencadeando a diferenciação em células com fenótipo neuronal.

Este vídeo demonstra um método para isolar e cultivar microglia de cérebros de ratos. Envolve a separação da microglia de outras células neuronais e não neuronais usando placas revestidas com um anticorpo monoclonal específico para a microglia.

O vídeo demonstra o processo de isolamento e cultura de células-tronco neurais da zona subcalosa do cérebro do camundongo. Envolve dissecar tecidos, dissociação enzimática e cultivá-los com fatores de diferenciação para se desenvolverem em células neurais maduras.

O vídeo demonstra a diferenciação de células-tronco embrionárias de camundongos (mESCs) em corpos embrióides (EBs) pelo método de gota suspensa. Ao suspender as mESCs em gotas suspensas e incubadas, as células se agregam para formar EBs, que são posteriormente diferenciadas em células progenitoras neuronais (NPCs) usando um meio de diferenciação suplementado com ácido retinóico (RA).

Este vídeo demonstra um protocolo detalhado para isolar as paredes laterais do ventrículo do cérebro de camundongo adulto e realizar a dissociação enzimática do tecido para obter células únicas. Essas células são então submetidas a condições específicas de cultura que aumentam seletivamente a proliferação de células-tronco neurais e promovem sua diferenciação em co-culturas de oligodendrócitos e astrócitos.

Este vídeo demonstra uma técnica para isolar células progenitoras neurais induzidas (iNPCs) derivadas de fibroblastos humanos adultos. Ele descreve as etapas envolvidas no isolamento das colônias de iNPC e na cultura delas em poços de placas de vários poços revestidos com laminina na presença de meios de cultura adequados que facilitam a proliferação e expansão contínuas da população de iNPC.

Este vídeo demonstra o método para cultivar neurônios de densidade ultrabaixa na presença de uma camada alimentadora neuronal de alta densidade. Ele estabelece uma co-cultura de neurônios de densidade variável, garantindo proximidade física. Os fatores de crescimento secretados pelos neurônios de alta densidade ajudam na sobrevivência e no crescimento neuronal, mantendo os neurônios de densidade ultrabaixa por um período de tempo mais longo.

Este vídeo demonstra uma técnica para transformar células indiferenciadas de neuroblastoma SH-SY5Y em neurônios maduros totalmente diferenciados usando uma técnica de passagem sistemática. Isso envolve a cultura das células em uma série de meios com níveis séricos gradualmente decrescentes para inibir a proliferação de células epiteliais enquanto promove a diferenciação e proliferação de células semelhantes a neurônios. Além disso, o meio é suplementado com ácido retinóico e fatores de...

Este vídeo demonstra o isolamento de células dos gânglios sensoriais de camundongos. Os gânglios são submetidos à digestão enzimática para dissolver a matriz extracelular. As células individuais são então coletadas por meio de filtragem através de um filtro de células, seguido de centrifugação com gradiente de densidade para remoção de detritos. Por fim, são feitas lavagens e centrifugações para coletar as células isoladas para análise futura.

Este vídeo demonstra a dissociação e cultura de neurônios do hipocampo a partir de amostras de tecido do hipocampo usando dissociações enzimáticas e mecânicas. O tratamento com Ara-C inibe o crescimento de células não neuronais, facilitando o crescimento seletivo dos neurônios do hipocampo.

Este vídeo descreve um método para cultivar neurônios dopaminérgicos a partir de tecido cerebral embrionário de camundongo. O processo inclui o tratamento do mesencéfalo com uma enzima proteolítica, destacando as células e cultivando-as em lamínulas revestidas de polímero em um meio rico em nutrientes com antibióticos para seu crescimento e viabilidade a longo prazo.

Este vídeo demonstra o isolamento e o cultivo de células progenitoras neurais cerebelares do cerebelo de um filhote de camundongo. Os progenitores dos neurônios do grânulo cerebelar são isolados e purificados por meio de adesão diferencial, removendo efetivamente os astrócitos. Esses progenitores cultivados subsequentemente se diferenciam em neurônios granulares cerebelares.

Este vídeo demonstra um método para isolar neurônios marcados com fluorescência do cérebro de um camundongo.

Este vídeo demonstra a construção de um sistema de cultura de células de três compartimentos usando colágeno e graxa não reativa. Este sistema é usado para observar as interações entre células de glioma e axônios em tempo real.

Este vídeo mostra um método para isolar neurônios vestibulares do ouvido interno de um filhote de camundongo. Ele descreve meticulosamente as etapas envolvidas na dissecação do ouvido interno, na colheita do gânglio vestibular e, posteriormente, na dissociação do gânglio em células únicas. Essas células são então cultivadas em placas com fundo de vidro para estabelecer uma cultura de neurônios vestibulares.

Este vídeo demonstra uma técnica para isolar e cultivar células precursoras de oligodendrócitos (OPCs) do córtex cerebral de filhotes de camundongos.

Este vídeo demonstra um método para desenvolver gânglios da raiz dorsal ou cultura de explante DRG e modelos de células dissociadas em DRG usando tecidos isolados de DRG de camundongo. Esses modelos ajudam a estudar vários mecanismos com interações neurônio-glial em um ambiente controlado.

O vídeo demonstra a preparação de fatias de cérebro colículo-tálamo-cortical de cérebros de filhotes de camundongos. Um cérebro isolado é alinhado em uma lâmina marcada e cortado em um ângulo para alinhar o mesencéfalo auditivo e o prosencéfalo no mesmo plano. O cérebro é então cortado usando um vibratome, e as fatias contendo as principais estruturas auditivas do mesencéfalo e do prosencéfalo são transferidas para uma câmara de retenção para preservação.

Este vídeo demonstra um método para coletar neurônios dos gânglios da raiz dorsal (DRG). O DRG da coluna vertebral de um rato é isolado, tratado com enzimas e, em seguida, dissociado mecanicamente para obter uma suspensão unicelular. Os neurônios são separados das células gliais usando centrifugação com gradiente de densidade e cultivados em um meio de crescimento.

Este vídeo apresenta um método para isolar células-tronco neurais/progenitoras do tecido periventricular da medula espinhal em ratos adultos. A técnica inclui incubar os fragmentos de tecido em uma solução contendo enzimas proteolíticas para romper a matriz extracelular e liberar as células. Posteriormente, as células liberadas são plaqueadas em um meio contendo fatores de crescimento específicos que aumentam a proliferação do tronco neural / progenitor e promovem a agregação em neuroesferas...

Este vídeo demonstra um protocolo para obter uma suspensão unicelular altamente viável do hipocampo do cérebro de camundongo usando uma combinação de dissociação mecânica automatizada e uma mistura de enzimas para auxiliar na digestão enzimática.

O vídeo demonstra a preparação de uma suspensão unicelular de células imunes a partir de um tecido cerebral murino. Envolve digestão enzimática para liberar células do tecido cerebral, seguida de centrifugação com gradiente de densidade para isolar as células imunes com base em suas densidades para obter a suspensão unicelular.

Este vídeo demonstra um método para isolar células oligodendrócitos primárias de uma suspensão de células neurais obtida de um filhote de camundongo usando separação magnética. A técnica emprega esferas magnéticas revestidas com anticorpos específicos para antígenos de oligodendrócitos, permitindo o isolamento seletivo dessas células.

Este vídeo descreve o isolamento e a cultura de células de Schwann das raízes espinhais de camundongos. As células isoladas são então cultivadas em meios específicos. As células de Schwann são isoladas por digestão diferencial e aderência. Eles são posteriormente transferidos para lamínulas revestidas com matriz extracelular para fixação e proliferação.

Este vídeo demonstra um protocolo detalhado para preparar fatias horizontais de cérebro de hipocampo de camundongos, com foco na preservação da integridade das vias de fibra do hipocampo. O processo envolve cuidadosamente dividir e proteger o cérebro, usar um vibratomo para fatiar e manter as condições ideais do tecido com um fluido carbogenado, resultando em fatias do cérebro do hipocampo prontas para experimentação posterior.

O vídeo demonstra a geração de fatias de amígdala inclinadas a partir de um cérebro de camundongo. O cérebro é posicionado em um ângulo no estágio de espécime de vibratomo para obter fatias contendo a amígdala e os axônios do córtex pré-frontal medial que formam conexões sinápticas com a amígdala. As fatias do cérebro são mantidas na temperatura fisiológica para preservar o tecido para experimentos futuros.

Este vídeo demonstra a preparação de finas fatias de cérebro coronal de um cérebro murino, expondo as regiões da amígdala ricas em conexões sinápticas do córtex pré-frontal medial. As fatias são então recuperadas em líquido cefalorraquidiano artificial oxigenado para manter a viabilidade neuronal.

Este vídeo demonstra um protocolo para extrair células microgliais de lesões desmielinizantes em cérebros de camundongos usando classificação magnética de células. O protocolo envolve a dissecação do tecido cerebral lesionado contendo células microgliais, o tratamento do tecido com enzimas específicas para obter uma suspensão unicelular e a utilização de esferas magnéticas específicas do receptor microglial para isolar as células microgliais.

Este vídeo demonstra o isolamento de vários tipos de células do tecido cerebral de camundongos. O tecido é primeiro cortado mecanicamente usando um moedor de tecido em uma solução salina para manter um equilíbrio osmótico. O homogeneizado tecidual é então submetido à centrifugação por gradiente de densidade para remover os detritos celulares. As células são então ressuspensas em uma solução para análise posterior.

Este vídeo demonstra o procedimento de isolamento de células imunes dos plexos coróides de camundongos. Este procedimento é usado na pesquisa de neuroimunologia para entender como as células imunes nos plexos coróides afetam a saúde do cérebro e várias doenças neurológicas.

O vídeo demonstrou o método de isolar e cultivar células de um cérebro de camundongo neonatal. Envolveu dissociação enzimática e mecânica do cérebro, seguida de cultura em meios de crescimento sem fator de crescimento neuronal para obter uma população glial mista.

Este vídeo demonstra o procedimento para isolar e classificar núcleos de tecido cerebral humano recém-congelado usando classificação de núcleos ativados por fluorescência (FANS), que permite o estudo de diferentes populações de células para várias aplicações neurológicas.

Este vídeo demonstra um protocolo para isolar células do hipocampo de ratos, incluindo neurônios, astrócitos e microglia.

Este vídeo demonstra o isolamento de neurônios marcados com fluorescência de Caenorhabditis elegans. Uma suspensão celular é obtida a partir de vermes transgênicos projetados para expressar transportadores transmembranares vesiculares fundidos com proteínas fluorescentes em neurônios colinérgicos. Os neurônios marcados com fluorescência são então isolados usando classificação de células ativadas por fluorescência (FACS) e mantidos em cultura.

O vídeo demonstra a preparação de fatias de cerebelo. Ele mostra um procedimento detalhado para isolar o cerebelo de um embrião de galinha. As fatias são então preparadas a partir do cerebelo dissecado usando um cortador de tecidos para posterior análise experimental.

Este vídeo demonstra o procedimento para isolar células ganglionares primárias da retina (RGCs) murinas usando citometria de fluxo. Este método permite o estudo futuro dos RGCs, com o objetivo de entender melhor o grande declínio na acuidade visual que resulta da perda de RGCs funcionais em doenças neurodegenerativas.

Este vídeo descreve o isolamento de um órgão vomeronasal de camundongo (VNO) e a preparação de tecido para seccionamento de vibratomo. As seções são usadas para caracterizar os atributos biofísicos e fisiológicos de um grupo específico de neurônios sensoriais.

Este vídeo demonstra um protocolo para isolar e cultivar células primárias do córtex cerebral do telencéfalo dorsolateral de embriões de camundongos.

Este vídeo demonstra uma técnica para isolar e cultivar células dos gânglios da raiz dorsal (DRG) da coluna vertebral de ratos. Os DRGs excisados da coluna vertebral são tratados com enzimas e dissociados mecanicamente para obter uma suspensão unicelular. As células são cultivadas em um meio contendo inibidores e fatores de crescimento que limitam a proliferação de células gliais e promovem o crescimento neuronal, respectivamente.

O vídeo demonstra o processo de isolamento e cultura de neurônios dopaminérgicos do mesencéfalo de embriões de camundongos. Os assoalhos do mesencéfalo ventral isolados são dissociados usando enzimas. Os neurônios dopaminérgicos resultantes são colhidos e transferidos para micro-ilhas dentro de placas de vários poços. As células são incubadas com um meio de neurônio dopaminérgico para manter as células em alta densidade dentro das micro-ilhas.

Este vídeo demonstra um método para diferenciar células progenitoras neurais humanas (NPCs) em neurônios. Os NPCs são introduzidos em uma co-cultura estabelecida de neurônios corticais de astrócitos de camundongos e ratos, promovendo a diferenciação de NPCs em neurônios. A diferenciação é confirmada pela visualização das células sob um microscópio confocal.

Este vídeo mostra uma técnica para co-cultivar neurônios glutamatérgicos e células pediátricas de glioma de alto grau (pHGG) dentro de um dispositivo microfluídico. As células-tronco pluripotentes induzidas por humanos são introduzidas no sistema microfluídico e incubadas para promover sua diferenciação em neurônios glutamatérgicos corticais maduros. Em seguida, as células pHGG são introduzidas nos neurônios maduros, estabelecendo uma co-cultura e permitindo interações entre neurônios e células...

Este vídeo ilustra um método para estabelecer uma co-cultura indireta de neurônio-astrócitos usando uma abordagem compartimentada. Nessa configuração, neurônios e astrócitos são espacialmente separados, mas compartilham um meio condicionado. Fatores neurotróficos liberados pelos astrócitos promovem a diferenciação de neurônios e a formação de conexões sinápticas, sugerindo interações neurônio-glia.

Este vídeo mostra a co-cultura de neurônios e macrófagos do gânglio da raiz dorsal murina. Os neurônios são semeados em uma placa revestida, enquanto os macrófagos são coletados de um camundongo sacrificado, tratados e adicionados ao inserto de cultura. O tratamento com db-cAMP ativa os neurônios e leva os macrófagos a adotar um fenótipo pró-regenerativo para apoiar o crescimento neuronal.

Este vídeo demonstra um ensaio para promover o crescimento de projeções de neurônios conhecidas como crescimento de neuritos usando o meio condicionado por macrófagos. Co-cultive neurônios e macrófagos com cAMP e colha o meio condicionado derivado de macrófagos. O crescimento dos neurônios com o meio condicionado promove crescimentos de neurites. Essas conseqüências são marcadas com fluorescência e visualizadas usando um microscópio de fluorescência.

Este vídeo demonstra o processo de preparação de tecidos ventrais, hipocampo e núcleo accumbens de cérebros de camundongos para co-cultura. Os neurônios estendem as projeções para formar conexões sinápticas entre os tecidos ventral do hipocampo e do núcleo accumbens. Este método permite estudar as interações neuronais entre essas duas regiões do cérebro, oferecendo insights sobre cognição, comportamento e distúrbios neurológicos.

Este vídeo mostra uma técnica para estabelecer uma co-cultura de neurônios trigêmeos e células primárias da polpa dentária usando um filtro transwell. Nessa condição fisicamente separada, as células mesenquimais obtidas do tecido da polpa dentária secretam moléculas sinalizadoras parácrinas que atravessam os poros, promovendo a diferenciação e migração de neurônios em direção às células mesenquimais, estabelecendo um sistema de co-cultura.

Este vídeo demonstra uma técnica para estabelecer uma co-cultura de interneurônios com células endoteliais perivasculares. As células são adicionadas a uma inserção de um poço colocada dentro de uma placa de cultura. Depois que as células aderem ao prato, a inserção é removida, permitindo que as células proliferem e interajam e formem uma co-cultura.

Este vídeo demonstra o desenvolvimento de um sistema de co-cultura 3D. Fatias de cérebro de camundongo são colocadas em uma membrana e células tumorais cerebrais humanas marcadas com fluorescência podem crescer nela. Uma vez que o sistema está pronto, ele é corado para imagens.

O vídeo demonstra a regeneração funcional das conexões proprioespinhais usando um ensaio baseado em matriz de múltiplos eletrodos (MEA). As fatias da medula espinhal são colocadas no MEA e podem se fundir. As fatias fundidas são separadas mecanicamente criando uma lesão, induzindo os neurônios proprioespinhais a crescer sobre a lesão e conectar as fatias. A atividade elétrica das fatias é avaliada para identificar a regeneração das conexões funcionais.

O vídeo demonstra o isolamento de células mononucleares do sangue periférico que se infiltram em tumores a partir de um cérebro de camundongo usando dissociação mecânica e digestão enzimática. Isso é seguido pela centrifugação do gradiente de densidade para coletar as células imunes para análise posterior.

Este vídeo demonstra uma técnica para a remoção seletiva da microglia de uma cultura neuronal primária de rato. Os neurônios do grânulo cerebelar são tratados com um antimetabólito para eliminar as células gliais em proliferação. Além disso, eles são tratados com agentes direcionados ao lisossomo para esgotar a micróglia da cultura.

Este vídeo demonstra um procedimento para co-cultivar os astrócitos e neurônios para formar esferas 3D. Essas esferas 3D fornecem uma plataforma distinta para examinar a formação de sinapses e a integração da rede neural, servindo assim como um modelo potencial para pesquisas em neurociência do desenvolvimento, doenças neurodegenerativas e intervenções neurofarmacológicas.

Este vídeo demonstra um procedimento para isolar neurônios do gânglio da raiz dorsal (DRG) de embriões de ratos e co-cultivá-los com precursores de células de Schwann para gerar células de Schwann maduras. Os DRGs isolados são processados para isolar neurônios e células gliais. As células isoladas são cultivadas para purificar os neurônios, que são então co-cultivados com células semelhantes a células de Schwann (SCLCs) em um meio de co-cultura. A interação com os neurônios DRG leva à maturação...

Este vídeo demonstra a co-cultura de células pericitos, astrócitos e endoteliais do cérebro humano. Cada camada celular é formada separadamente e depois cultivada em conjunto, criando um sistema de três camadas que imita o arranjo celular da barreira...

Este vídeo demonstra o estabelecimento de uma co-cultura de neurônios induzidos humanos (iNs) e células precursoras de oligodendrócitos induzidos (iOPCs). Os iNs são misturados com iOPCs em uma co-cultura e depois incubados para apoiar a maturação de ambos os iNs em neurônios e iOPCs em oligodendrócitos. Os neurônios formam conexões sinápticas com outros neurônios e oligodendrócitos, enquanto os oligodendrócitos desenvolvem bainhas de mielina ao redor dos axônios dos neurônios.

Este vídeo demonstra a utilização de um dispositivo microfluídico para estudar as interações entre a polpa germinativa do dente e os gânglios do trigêmeo. Ele mostra a colocação de tecidos dentro do dispositivo microfluídico e fornece uma visualização detalhada do crescimento do neurite trigêmeo em direção ao germe dentário através dos microsulcos do dispositivo. Além disso, destaca o papel dos fatores moleculares derivados do dente na promoção ou inibição da extensão do neurite para a polpa...

Este vídeo demonstra o procedimento para isolar os neurônios ganglionares da retina (RGNs) da retina de um rato e cocultivá-los com células da glia de revestimento olfativo (OEG). Este método permite estudar o potencial neuro-regenerativo dos OEGs após lesão neural.

Este vídeo demonstra o método para diferenciar células-tronco neurais humanas de neuroesferas em progenitores neurais e astrócitos usando tratamento enzimático e cultura em um meio rico em fator de crescimento, o que eventualmente leva à maturação em células progenitoras especializadas.

Este vídeo descreve a criação de organoides do tipo prosencéfalo a partir de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos (iPSCs), demonstrando a progressão de agregados de células-tronco para estruturas complexas que imitam o córtex do cérebro e se diferenciam em vários tipos de neurônios.

O vídeo demonstra a co-cultura de neurônios do gânglio da raiz dorsal (DRG) com células de Schwann. Os neurônios DRG são cultivados primeiro em uma membrana pré-esticada para o crescimento do axônio alinhado. As células de Schwann são então introduzidas, que se ligam aos axônios, isolando-os e promovendo a sobrevivência e a função das células neurais.

Este vídeo demonstra um protocolo para enriquecer culturas neuronais dos gânglios da raiz dorsal por imunopanning, melhorando assim sua pureza e utilidade para pesquisas neurológicas.

Este vídeo demonstra um protocolo para identificar fatores exógenos que iniciam a reativação das células-tronco neurais cerebrais da Drosophila de seu estado quiescente. As larvas recém-eclodidas são dissecadas para isolar seus cérebros, que são então cultivados em meio com ou sem um hormônio de teste para avaliar o potencial do hormônio para induzir a reativação e proliferação de células-tronco neurais.

Este vídeo demonstra um protocolo para co-cultura de células endoteliais do cérebro de camundongos e células-tronco corticais primárias e marcação das glicoproteínas da superfície celular usando Ac4ManNAz (azidoaçúcar per-O-acetilado N-azidoacetilmanosamina). Este método permite o enriquecimento seletivo e a identificação de proteínas da superfície celular em células primárias.

Este vídeo demonstra o modelo de cocultura de um explante de gânglio da raiz dorsal e células de Schwann. Em condições de cocultura, o ácido ascórbico promove a diferenciação das células de Schwann em formas mielinizantes. As células mielinizantes de Schwann envolvem os axônios várias vezes para criar uma bainha de mielina, que é essencial para a função nervosa.

Este vídeo descreve o isolamento de neurônios DRG por meio de digestão enzimática, dissociação mecânica e centrifugação de gradiente. As células DRG são co-cultivadas com células assassinas naturais em uma matriz extracelular para estudar a interação entre células imunes e neurônios sensoriais.

Este vídeo demonstra uma técnica para avaliar a atividade do ácido retinóico em embriões de camundongos. Ao isolar as células dos embriões de camundongo, as células são co-cultivadas com células repórteres de ácido retinóico (RA). As células embrionárias produzem AR, que induz a expressão de beta-galactosidase nas células repórteres, indicando atividade de AR nas células embrionárias.

Este vídeo demonstra uma técnica para gerar um sistema modelo de co-cultura tridimensional de fibroblastos primários da córnea humana e células neuronais diferenciadas. Este sistema de co-cultura pode ser usado para estudar as interações estromal-nervo.

O vídeo demonstra um protocolo que usa mídia sem soro para gerar progenitores neurais a partir de células-tronco embrionárias de camundongos. A concentração desejada de células-tronco embrionárias, suspensas em meio sem soro, é revestida em lamínulas revestidas de gelatina. Em uma densidade celular ideal, as células produzem fatores de sinalização autócrinos, que, juntamente com os fatores indutores de diferenciação neural no meio livre de soro, desencadeiam a diferenciação de células-tronco...

Este vídeo mostra o desenvolvimento e a diferenciação de células-tronco neurais humanas dentro de um andaime tridimensional. Um revestimento de laminina no andaime promove a fixação celular, enquanto um meio neural livre de fator de crescimento induz a diferenciação celular em células progenitoras neurais, que estendem seus processos dentro de uma arquitetura porosa em várias direções, formando uma cultura...

Este vídeo demonstra um método in vitro para gerar neurônios simpáticos pós-ganglionares a partir de células-tronco pluripotentes humanas (hPSCs). As hPSCs são diferenciadas em células da crista neural (NCCs) em um suporte de matriz de membrana basal usando um meio de diferenciação. Os NCCs são então dissociados e formados em esferóides usando outro meio de diferenciação. Finalmente, os esferóides são transformados em neurônios simpáticos pós-ganglionares usando um meio de neurônio simpático.

Este vídeo demonstra a geração e diferenciação de neuroesferas primárias. As células-tronco neurais do peixe-zebra, na presença de fatores de crescimento, proliferam em neuroesferas flutuantes com capacidade de auto-renovação, que mais tarde se diferenciam em células gliais e neurônios.

O vídeo demonstra um método para gerar organoides cerebrais humanos a partir de células-tronco pluripotentes induzidas. Ele mostra como a neuroesfera forma uma camada neuroectodérmica, que suprime a formação de outras camadas germinativas. As neuroesferas são incorporadas em uma matriz de gel 3D e formam brotos neuroepiteliais. Quando incubados com meios organoides, esses brotos neuroepiteliais se diferenciam em regiões cerebrais específicas, resultando na formação de organoides cerebrais...

Este vídeo demonstra o uso de um chip microfluídico revestido com matriz extracelular para diferenciar células-tronco neurais e progenitoras ou NPCs por meio de estimulação elétrica. Após a semeadura e aderência à região revestida, os NPCs crescem e a aplicação de uma corrente contínua desencadeia sua diferenciação em neurônios, astrócitos e oligodendrócitos.

Este vídeo demonstra um ensaio para gerar organoides cerebrais a partir de células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs). As iPSCs humanas são induzidas a formar corpos embrióides (EBs). Os EBs são cultivados sobre um andaime de polímero usando um meio de indução, promovendo a diferenciação em células-tronco neurais, células progenitoras e neurônios imaturos. Finalmente, os EBs são embutidos em uma matriz e transferidos para um meio de manutenção para a formação de organoides cerebrais.

O vídeo demonstra a formação de junções neuromusculares usando um dispositivo microfluídico. As células precursoras neurais e as células progenitoras musculares são semeadas em diferentes poços dentro do dispositivo e deixadas para amadurecer em neurônios motores e miotubos, respectivamente. A criação de um gradiente de volume e químico leva ao desenvolvimento de junções neuromusculares ativas.

Este vídeo demonstra o desenvolvimento de uma cultura neuronal 3D acoplada a uma matriz de microeletrodos planares com neurônios do hipocampo. Os neurônios isolados formam uma rede 2D na área ativa do conjunto de microeletrodos e aderem a microesferas de vidro em uma placa de vários poços com uma inserção de membrana. Ao transferir essas microesferas revestidas de neurônios para o eletrodo, elas se organizam em uma rede neural 3D interconectada.

Este vídeo demonstra o processo de geração de bolas de neurônios usando uma técnica de cultura de gota suspensa. Dentro das gotas suspensas, as células se movem para o fundo, auto-montadas em estruturas tridimensionais formando bolas de neurônios, que podem ser usadas para estudos neurobiológicos.

Este vídeo demonstra um método para rastrear o transporte axonal em neurônios motores usando um sistema de câmara microfluídica. Envolve a cultura de tecidos embrionários da medula espinhal de camundongos em poços revestidos de polímero com meio nutriente para induzir o crescimento axonal. O movimento de organelas coradas com corante fluorescente em imagens ao vivo confirma o transporte axonal bidirecional.

Este vídeo mostra a reprogramação direta de astrócitos expressando fatores transformadores em neurônios. Os fatores de transformação desencadeiam uma cascata de eventos moleculares que facilitam a conversão de astrócitos em neurônios. O processo é ainda apoiado pelo fornecimento de agentes e suplementos específicos por meio de um meio de diferenciação neuronal.

Este vídeo demonstra o processo de preparação de fatias de cérebro em forma de cunha em um ambiente de laboratório. Usando um vibratome, uma fatia em forma de cunha do cérebro de um camundongo é trabalhada com espessura variável. Esta fatia contém a raiz nervosa auditiva posicionada na extremidade mais espessa, enquanto os neurônios relacionados à audição estão localizados na extremidade mais fina.

Este vídeo demonstra uma técnica para promover a diferenciação neuronal expondo as células nervosas a nanobastões de ouro e luz laser, que forma projeções celulares suportadas pela βIII-tubulina. A coloração e a observação da tubulina e do núcleo celular com microscopia de epifluorescência revelam as conseqüências celulares, indicando a eficácia dos nanobastões na diferenciação neuronal.

Este vídeo demonstra a captação de nanopartículas magnéticas fluorescentes (MNPs) pelas células neuronais via endocitose. O crescimento desses neurônios carregados com MNP no substrato com padrão magnético permite a fixação das células. A adição de um fator de crescimento contendo meio auxilia no crescimento das extensões dos neurônios, enquanto o campo magnético do substrato direciona a orientação da extensão.

Este vídeo demonstra a diferenciação de células-tronco embrionárias humanas, ou hESCs, diretamente em células progenitoras neurais sem o uso de células alimentadoras ou quaisquer etapas intermediárias. A inibição seletiva das vias de sinalização da proteína morfogenética óssea ou BMP e do fator de crescimento transformador beta, ou TGF-β, leva à diferenciação de hESCs em células progenitoras neurais, ou NPCs.

Este vídeo demonstra uma técnica para preparar culturas de fatias flutuantes a partir do cérebro humano adulto. Fatias finas são geradas a partir de uma seção do cérebro usando um vibratome. Essas fatias são então suspensas em um meio de cultura suplementado com fatores de crescimento para manter a viabilidade do tecido.

Este vídeo demonstra um método para preparar culturas organotípicas de fatias de hipocampo a partir do cérebro de um filhote de rato. Ele descreve as etapas envolvidas na dissecação do hipocampo, fatiamento e condições de cultura necessárias para promover a viabilidade celular e o crescimento nas fatias do hipocampo, gerando culturas de fatias organotípicas.

Este vídeo descreve um protocolo para obter fatias de cérebro usando um método de recuperação protetora baseado em N-metil-D-glucamina (NMDG). Um cérebro dissecado é incubado em um aCSF com NMDG e HEPES para minimizar a morte e os danos das células neuronais durante a secção. A seção pode se recuperar no aCSF para restaurar as atividades...

Este vídeo demonstra um método para incubação prolongada do tecido neuronal da retina. As oculares contendo retina são obtidas de um olho de camundongo; a membrana limitante interna (ILM) é digerida enzimaticamente para expor as células neuronais da retina, e a ocular tratada ou a retina isolada é transferida para uma incubadora especializada para incubação prolongada a baixa temperatura.

Este vídeo demonstra uma técnica para gerar organoides cerebelares maduros a partir de células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs) usando um biorreator 3D de uso único. O biorreator facilita a formação de agregados iPSC, que então passam por tratamento com uma série de meios de cultura enriquecidos em fatores de crescimento e quimiocinas que induzem a diferenciação dos agregados iPSC em organoides cerebelares maduros. Posteriormente, os organoides são colhidos e criopreservados para análise...

Este vídeo demonstra uma técnica para estabelecer uma cultura tridimensional de células gliais. As células gliais derivadas do cérebro de rato são encapsuladas em uma matriz polimérica fotoreticulável contendo componentes da matriz extracelular. Ao incubar em um meio de crescimento, as células gliais proliferam dentro da matriz de suporte para criar uma cultura tridimensional.

O vídeo demonstra um método para gerar astrosferas a partir de progenitores a partir de células-tronco pluripotentes humanas. Envolve o crescimento e proliferação de células-tronco com meios nutrientes contendo fatores de crescimento e inibidores de quinase. Essas células então se agregam e se diferenciam em astrócitos, formando astrosferas.

Este vídeo demonstra a geração de células progenitoras neurais a partir de células-tronco pluripotentes humanas não transgênicas e transgênicas (hPSCs). As hPSCs são diferenciadas em células progenitoras neurais usando um meio de diferenciação neuronal. Enquanto a diferenciação é induzida em células não transgênicas usando pequenas moléculas, as hPSCs transgênicas são diferenciadas pela adição de um antibiótico que induz o promotor de um fator de transcrição específico de diferenciação neuronal.

Este vídeo demonstra um método para obter células semelhantes a células de Schwann a partir de células estromais da medula óssea (BMSCs) multipotentes. Inicialmente, as BMSCs passam por tratamento de hipóxia, seguido de diferenciação direcionada em células progenitoras neuronais. Posteriormente, condições específicas de meio e cultura são empregadas para induzir a transformação dessas células progenitoras em células semelhantes a células de Schwann.

Este vídeo demonstra um método para gerar andaimes tridimensionais de astrócitos dentro de microcolunas de hidrogel. O interior das microcolunas é revestido com colágeno. São introduzidos astrócitos, que aderem ao colágeno e, com posterior incubação, se automontam em um andaime tridimensional.

Este vídeo mostra a criação de um modelo de tecido neural polarizado em 3D utilizando andaimes de seda-colágeno. Ele detalha o processo de semeadura de células neuronais em andaimes de seda porosa, incubação para fixação celular, incorporação do andaime com colágeno e ressalta a importância da matriz de colágeno de suporte na formação de um modelo de tecido neural polarizado 3D.

O vídeo mostra um método para separar e replantar neurônios humanos pluripotentes derivados de células-tronco usando uma enzima proteolítica leve. Após filtração e centrifugação, os neurônios são recolocados em uma placa revestida de vários poços para incubação, promovendo a fixação e a maturação.

Este vídeo demonstra o método de criação de organoides nervosos motores, primeiro cultivando células-tronco pluripotentes induzidas por humanos em um meio especial para formar esferoides, depois diferenciando-as em neurônios motores usando inibidores específicos e, finalmente, cultivando-as em um chip microfluídico para estender axônios e formar organoides nervosos motores.

Este vídeo apresenta um método para desencadear a diferenciação em células-tronco neurais utilizando plasma atmosférico frio. Isso gera radiação UV e moléculas reativas para estimular as células nervosas a produzir projeções, indicando diferenciação celular neuronal.

Este vídeo apresenta um método para gerar precursores de interneurônios corticais a partir de células-tronco embrionárias de camundongos. O protocolo envolve a cultura das células-tronco em meios contendo inibidores específicos de pequenas moléculas, que facilitam a proliferação e agregação de células-tronco em corpos embrióides (EBs). Posteriormente, os EBs são dissociados com enzimas e plaqueados em poços de placa de cultura revestidos com proteínas de adesão para promover sua diferenciação...

Este vídeo demonstra a reprogramação direta de células progenitoras hematopoiéticas geneticamente modificadas em células-tronco neuronais. Os fatores de transcrição expressos pelas células progenitoras hematopoiéticas desencadeiam uma cascata de eventos moleculares que facilitam sua transformação. Outros meios específicos são usados para selecionar e cultivar células-tronco neuronais induzidas.

Este vídeo demonstra o uso de pequenos RNAs interferentes (siRNA) para silenciar genes específicos de interesse em células-tronco neurais e diferenciá-los em tipos de células desejados usando o meio de diferenciação apropriado. Este procedimento permite o estudo do papel crítico de genes específicos no processo de diferenciação de células-tronco neurais.

Este vídeo demonstra o processo de diferenciação de células progenitoras neurais induzidas (iNPCs) em neurônios e astrócitos usando meios especializados.

Este vídeo demonstra um método para a geração in vitro de células progenitoras neurais (NPCs) a partir de células-tronco embrionárias de camundongos (mESCs). As mESCs são cultivadas em suspensão para formar corpos embrióides (EBs), que são então guiados para se diferenciar em NPCs por meio de tratamento com ácido retinóico em uma cultura aderente.

O vídeo mostrou um método de cultura de células para diferenciar células progenitoras neurais em neurônios. Ao incubar células em um meio rico em nutrientes suplementado com fatores de crescimento, as células progenitoras amadureceram em neurônios com axônios e dendritos desenvolvidos. Um agente estabilizador garantiu a viabilidade celular e protegeu contra danos oxidativos durante todo o processo de diferenciação.

Este vídeo demonstra um método de tubo de rolo modificado para a cultura a longo prazo de fatias de cérebro de um modelo de roedor. Primeiro, as fatias do cérebro são presas a lamínulas. Em seguida, são retirados tubos de rolos de lados planos com um orifício no lado plano e as lamínulas são posicionadas no orifício usando discos adesivos. Finalmente, um meio nutriente e uma mistura de dióxido de carbono e ar são adicionados ao tubo, e os tubos são incubados com um movimento de rolamento.

Este vídeo demonstra uma técnica para a rápida iniciação e extensão de um neurônio e criação de novas conexões com um neurônio alvo usando um dispositivo microfluídico e micromanipulação. Isso pode ser usado para terapias que visam reconectar circuitos neuronais após trauma ou em doenças neurodegenerativas.

O vídeo demonstra a geração de neurônios a partir de fibroblastos dérmicos humanos adultos (aHDFs). Os aHDFs são reprogramados usando um vetor lentiviral que transporta genes para fatores de transcrição neuronal e RNAs de grampo curto (shRNAs). Os shRNAs inibem a expressão de um repressor transcricional neuronal, e os fatores de transcrição neuronal ativam genes para diferenciar aHDFs em neurônios. Esses aHDFs reprogramados são cultivados em um meio de conversão neuronal precoce e tardia para...

O vídeo demonstra a geração e manutenção de culturas de fatias organotípicas a partir de tecido de glioblastoma. O tecido isolado é incorporado em uma matriz de agarose e seções finas são obtidas usando um vibratome. Essas seções são então colocadas em inserções de membrana permeável dentro de uma microplaca e cultivadas em um meio de manutenção de cultura de fatias para manutenção a longo prazo.

Este vídeo demonstra um protocolo para isolar e cultivar células de Schwann de tecidos dérmicos humanos. A derme humana contém vários tipos de células, incluindo fibroblastos e células de Schwann. Após o isolamento, as células são tratadas com um agente antimitótico para eliminar os fibroblastos em proliferação, resultando em uma cultura pura de células de Schwann.

O vídeo demonstra o processo de criação de uma construção bioimpressa em 3D usando astrócitos suspensos em uma solução de bioink. A construção bioimpressa, após a reticulação, facilita a adesão dos astrócitos e sua disseminação, formando tecido semelhante a neurais.

Este vídeo demonstra como as gliomasferas, derivadas de tumores cerebrais, são separadas em células únicas e encapsuladas em um hidrogel à base de ácido hialurônico. Esse processo promove interações célula-célula, formando um modelo de glioblastoma tridimensional estruturado.

Este vídeo ilustra uma técnica para obter fatias organotípicas cerebelares do cérebro de um filhote de camundongo e cultivar as fatias em meio suplementado com nutrientes e fatores de crescimento para imitar o desenvolvimento cerebelar in vitro. Além disso, fatias cerebelares específicas são tratadas com um composto de teste e a capacidade neuroprotetora do composto é analisada usando uma técnica de coloração por imunofluorescência.

Este vídeo descreve a preparação e o cultivo de organoides de tumores cerebrais a partir de suspensão de célula única. Usando uma matriz extracelular rica em laminina como andaime e meio de cultura para nutrientes, as células são facilitadas a se multiplicar e se auto-organizar dentro do organoide. Consequentemente, organoides ex vivo são gerados, mimetizando a diversidade celular e o microambiente dos tumores cerebrais.

Este vídeo demonstra o processo de geração de células precursoras de oligodendrócitos (OPCs) a partir de células-tronco embrionárias humanas, seguido pela maturação de OPCs em oligodendrócitos. Esse processo de geração de oligodendrócitos abre vários caminhos para melhorar a pesquisa e o tratamento de doenças neurodegenerativas, incluindo a doença de Alzheimer.

Este vídeo demonstra um protocolo para diferenciar células-tronco pluripotentes induzidas por humanos em progenitores cerebelares. Envolve a transferência de colônias de células-tronco para uma placa de fixação ultrabaixa para formar corpos embrióides, promovendo a diferenciação com fatores de crescimento e, em seguida, transferindo os corpos embrióides para uma placa revestida com matriz para adesão. As etapas subsequentes envolvem a indução da migração celular e a adição de um meio de...

Este vídeo demonstra o processo de diferenciação de corpos embrióides (EBs) em agregados neuroepiteliais e sua subsequente divisão em células neuronais e gliais. Este método permite a geração eficiente de células neuronais e gliais in vitro, que servem como sistemas de teste para testes de toxicidade, bem como avaliação de diferentes vias envolvidas na neurotoxicidade.

Este vídeo demonstra o processo de isolamento e cultura de células progenitoras gliais de glio pontino intrínseco difuso ou tecido do tronco cerebral afetado por DIPG. Células gliais isoladas do tecido tumoral via uma digestão enzimática são cultivadas em meio neurobasal, o que promove seu crescimento e o desenvolvimento de neuroesferas flutuantes.

Este vídeo mostra um método para diferenciar células progenitoras neurais da medula espinhal (NPCs) em neurônios motores. Ele detalha o processo de cultura dos NPCs em uma placa de cultura revestida usando meios especializados enriquecidos com inibidores específicos destinados a facilitar a diferenciação de NPCs em neurônios motores maduros.

Este vídeo demonstra a transformação de células-tronco pluripotentes humanas (hPSCs) em organoides cerebrais esféricos. Usando inibidores específicos, as hPSCs são guiadas para se diferenciar em direção a uma linhagem neuronal, formando colônias neuroectodérmicas. Fatores especiais de crescimento são então introduzidos, o que estimula a auto-organização e proliferação das colônias, levando à formação de organoides cerebrais esféricos.

O vídeo demonstra a diferenciação de células-tronco neurais (NSCs) usando um dispositivo microfluídico composto por um compartimento somático e um axonal separados por uma barreira de microsulco. Os NSCs são introduzidos no compartimento somático e podem aderir. As NSCs se diferenciam em neurônios dentro do compartimento somático e estendem os axônios através da barreira do microsulco até o compartimento axonal.

Este vídeo demonstra um método para isolar células-tronco do cerebelo pós-natal de camundongos e diferenciá-las em células neurais. As células-tronco da suspensão de células isoladas são purificadas usando esferas magnéticas revestidas com anticorpos e são cultivadas para formar neuroesferas. As neuroesferas são então mantidas em um meio de diferenciação para gerar células neurais.

Este vídeo demonstra o isolamento de células satélites dos tecidos musculares branquioéricos da cabeça de rato por meio de dissecção tecidual, digestão enzimática e subsequente purificação mecânica e centrífuga. As células são então semeadas em poços revestidos com matriz extracelular para diferenciação em mioblastos e, eventualmente, em miotubos e fibras musculares maduras.

Este vídeo demonstra uma técnica simples para neurogênese induzida por ácido retinóico em células de carcinoma embrionário de camundongo P19. O ácido retinóico ativa fatores de transcrição e desencadeia a expressão gênica para diferenciação neuronal.

O vídeo demonstra o método para induzir a diferenciação de células-tronco em progenitores neurais usando ácido retinóico e o método de cultura de gota suspensa.

O vídeo demonstra um protocolo para diferenciar células precursoras de oligodendrócitos (OPCs) em oligodendrócitos e induzir mielinização em uma co-cultura com neurônios do gânglio da raiz dorsal (DRG). As OPCs são transduzidas com vetores lentivirais que codificam uma proteína sinalizadora que regula a mielinização. Os OPCs transduzidos são co-cultivados com neurônios DRG para avaliar a diferenciação em oligodendrócitos e a mielinização induzida por proteína de sinalização.

Este vídeo demonstra a produção de meio condicionado por oligodendrócitos (OCM) a partir de células de linhagem de oligodendrócitos, enfatizando-as para aumentar sua liberação molecular no meio. Este meio, que é rico em fatores de crescimento, citocinas e outras moléculas bioativas, pode ser adicionado a culturas de neurônios para obter informações sobre o impacto dos fatores secretados por oligodendrócitos na fisiologia e conectividade neuronal.

Este vídeo ilustra uma técnica para isolar as dobras neurais cranianas da região do mesencéfalo de embriões de pintinhos. Apresenta um processo detalhado de dissecção das dobras neurais, sua colocação e fixação em lamínulas revestidas com fibronectina, seguido pela observação da migração das células da crista neural das dobras neurais.

Este vídeo demonstra uma técnica para gerar organoides cerebrais a partir de células-tronco embrionárias humanas (hESCs). A cultura aderente de colônias de hESC é tratada com enzimas para desprepará-las e quebrá-las em cachos. Esses aglomerados formam esferas tridimensionais em suspensão, que são então induzidas a se diferenciar em organoides que imitam o córtex cerebral com camadas de neurônios e células gliais.

O vídeo demonstra o isolamento de neurônios oculomotores, trocleares e motores espinhais de um embrião de camundongo transgênico. O embrião expressa neurônios motores marcados com uma proteína fluorescente verde (GFP) para fácil visualização e identificação. Os neurônios motores são isolados cirurgicamente sob um microscópio de fluorescência e mantidos em meio de cultura.

O vídeo descreve o procedimento para manter um ambiente controlado em uma estação de trabalho de cultura de células para o crescimento e manutenção de células-tronco neuronais. Esses procedimentos envolvem o estabelecimento de condições de câmara, protocolos de limpeza e preparação de meios, mantendo assim a máxima esterilidade e reprodutibilidade e substituindo os métodos tradicionais.

Este vídeo demonstra uma técnica para purificar células progenitoras endoteliais CD31+ (EPCs) de uma cultura usando classificação de células ativadas por magnetismo (MACS). A suspensão celular é tratada com um anticorpo conjugado com fluoróforo que se liga ao CD31 nas CPEs. Completar a marcação de EPCs CD31+ envolve a adição de um complexo de anticorpos, que se liga aos fluoróforos, e uma nanopartícula magnética revestida com polímero, que se liga ao complexo de anticorpos. As células marcadas...

Este vídeo demonstra o processo de formação da neuroesfera e sua expansão a partir do tecido do hipocampo. As células-tronco neurais e progenitoras do tecido do giro dentado do camundongo pós-natal proliferam e formam neuroesferas primárias, que são então replantadas para formar neuroesferas secundárias.

Este vídeo demonstra um protocolo para induzir a diferenciação de células-tronco pluripotentes induzidas em células endoteliais cerebrais.

Este vídeo demonstra uma técnica para isolar e cultivar células-tronco derivadas do tecido adiposo do arco periaórtico murino marcadas com fluorescência (ADSCs) do tecido adiposo do arco periaórtico murino. Após o isolamento, os NCADSCs são detectados, classificados usando classificação de células ativadas por fluorescência e, posteriormente, cultivados em uma placa, promovendo a proliferação celular.

Este vídeo demonstra um método para isolar células gliais entéricas da submucosa e lâmina própria do intestino de camundongos. Ele descreve as etapas envolvidas na extração do tecido da submucosa e da lâmina própria, isolando as células gliais entéricas delas e cultivando as células em uma placa de poço revestida para estabelecer uma cultura de células gliais entéricas.

Este vídeo demonstra o isolamento dos capilares de cérebros suínos frescos. O processo envolve a remoção das meninges, isolando a substância cinzenta do tecido cerebral, homogeneizando e filtrando a substância cinzenta para isolar os capilares e, finalmente, usando a digestão enzimática para purificar ainda mais os capilares.

Este vídeo demonstra o processo de isolamento de microvasos cerebrais de ratos sacrificados. Inclui a dissecção do cérebro, limpeza do tecido e digestão mecânica, seguida de centrifugação repetida para isolar a fração pura dos microvasos.

Este vídeo descreve um método para preparar lamínulas de vidro revestidas com poliornitina e laminina para aumentar a adesão e o crescimento de células-tronco neurais. A técnica envolve incubações e lavagens sequenciais, facilitando a formação de uma matriz de suporte que promove o crescimento e a diferenciação das células neuronais, mimetizando estruturas encontradas nos neurônios.

Este experimento detalha um método para gerar junções neuromusculares a partir de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos. Ele usa um processo de diferenciação em estágios para promover o desenvolvimento do miotubo e do neurônio motor e a formação de sinapses, produzindo junções neuromusculares funcionais.

Este vídeo demonstra o método para melhorar a diferenciação de células-tronco com tratamento transitório de DMSO, que prende as células na fase G1. Após o tratamento, um meio de diferenciação ectodérmica com inibidores de BMP e TGF-β é adicionado para promover a formação de precursores neurais.

Este vídeo demonstra um método para isolar pericitos cerebrais de um cérebro de camundongo. As células isoladas são cultivadas em meios específicos de pericitos para promover a proliferação de pericitos.

Este vídeo mostra a utilização de uma técnica de iluminação lateral de luz suave para melhorar a visualização a olho nu de corpos embrióides, facilitando assim sua manipulação e transferência durante a cultura de organoides cerebrais. Ele elucida a configuração da iluminação de luz suave, métodos para mudanças de mídia e transferência de corpos embrióides, bem como o procedimento para induzir a diferenciação neural em corpos embrióides para o desenvolvimento de organoides cerebrais.

O vídeo descreve a preparação de um substrato micropadronizado para estudar a especificação do fenótipo celular. Um carimbo PDMS micropadronizado revestido de proteína é usado para transferir o micropadrão em uma lamínula revestida com PDMS. A lamínula é então tratada com um surfactante para impedir a adesão celular nas superfícies indesejadas. As células são então adicionadas para se estabelecer no padrão e incubadas para análise posterior.

Este vídeo demonstra um método para isolar os tubos endoteliais do parênquima cerebral de camundongos. Por meio de uma combinação de digestão enzimática e dissociação mecânica, o processo produz um tubo intacto com células endoteliais.

Este vídeo demonstra uma técnica de cultura de discos intervertebrais bovinos em biorreatores para desenvolver um modelo tridimensional de cultura de órgãos. Meios específicos privados de nutrientes e condições de pressão degenerativa são aplicados aos discos, imitando o microambiente pró-inflamatório e degenerativo observado durante a doença do disco intervertebral em estágio inicial. As alturas dos discos são medidas após o tratamento para analisar os efeitos da privação de nutrientes e da...

Este vídeo demonstra o processo de indução de células-tronco pluripotentes humanas a se diferenciarem em neurônios, transfectando-as com lentivírus modificados carregando um gene do fator de transcrição neurogênico sob o controle do elemento responsivo à tetraciclina, seguido de tratamento com um derivado de tetraciclina e meio de maturação.

Este vídeo demonstra uma técnica para diferenciação de células-tronco embrionárias em uma população em rede de neurônios com sinapses funcionais. Ele descreve as etapas envolvidas na diferenciação de células-tronco embrionárias em neurônios, indução da formação de redes neuronais e enriquecimento da cultura com neurônios em rede.

Este vídeo demonstra um método para isolar células de Schwann das fibras do nervo ciático de camundongos.

O vídeo demonstra um método para isolar núcleos intactos de células gliais e estaminais no giro dentado do hipocampo de camundongos (DG). O tecido DG é mecanicamente dissociado em um tampão de homogeneização a frio para liberar os núcleos. Detritos teciduais e outras organelas liberadas são descartados, e os núcleos são corados com uma coloração de DNA e um anticorpo conjugado com fluoróforo específico para o antígeno nuclear neuronal (NeuN). A classificação de núcleos ativados por...

Este vídeo demonstra a reprogramação do destino celular de células germinativas de nematóides em neurônios. As larvas transgênicas do nematóide Caenorhabditis elegans são submetidas à interferência de RNA (RNAi) para derrubar um fator regulador específico da cromatina, tornando as células germinativas de sua progênie mais suscetíveis à reprogramação do destino celular. O choque térmico é aplicado à progênie, induzindo as células germinativas a expressar um fator de transcrição específico do...

Este vídeo demonstra o procedimento de diferenciação de células pluripotentes humanas em células semelhantes à microglia. O processo envolve a formação de corpos embrióides, transferindo-os para poços revestidos e usando fatores de crescimento específicos para guiar a diferenciação em precursores primitivos de macrófagos, que finalmente se diferenciam em células semelhantes à micróglia.

Este vídeo demonstra a cultura de células gliais de Müller (MG) isoladas de retinas de camundongos. As retinas são dissociadas em uma suspensão unicelular usando enzimas digestivas. As células são então cultivadas em um meio com um fator de crescimento que promove a proliferação de células MG e a mortalidade celular neuronal. As células neuronais mortas são removidas durante a passagem e as células MG são cultivadas para análise posterior.

Este vídeo demonstra uma técnica para isolar e cultivar células gliais mistas primárias do tecido da medula espinhal de camundongos adultos. O protocolo envolve a digestão enzimática do tecido, seguida pela remoção de membranas celulares quebradas e detritos de mielina para obter uma população unicelular. As células são então cultivadas em meios otimizados para o crescimento de células gliais mistas.

Este vídeo demonstra a diferenciação de células progenitoras óticas multipotentes imortalizadas (iMOP) em células epiteliais sensoriais. Ele descreve as etapas envolvidas na cultura de células iMOP, formação de otosferas, indução de diferenciação e visualização de componentes celulares e marcadores de diferenciação por meio de microscopia de fluorescência para confirmar a diferenciação celular bem-sucedida.

O vídeo demonstra a diferenciação de progenitores óticos multipotentes imortalizados (iMOPs) em neurônios ganglionares espirais (SGNs) e a confirmação da diferenciação baseada em imunofluorescência. Os iMOPs são plaqueados em lamínulas revestidas com substrato de cultura em um meio de diferenciação neuronal para diferenciação em SGNs. As células diferenciadas são marcadas com anticorpos específicos para marcadores de diferenciação neuronal e analisadas ao microscópio para confirmar a...

Este vídeo demonstra a cultura ex vivo e a imagem de fatias oculomotoras de embriões de camundongos transgênicos. Os embriões são isolados e incluídos em agarose. Usando um vibratome, são obtidas fatias contendo os núcleos oculomotores e os olhos. As fatias são mantidas em cultura e fotografadas usando um microscópio de fluorescência.

Este vídeo demonstra um processo de várias etapas para diferenciar iPSCs humanas em células endoteliais microvasculares cerebrais. As células diferenciadas resultantes imitam de perto as células endoteliais microvasculares cerebrais, caracterizadas por junções apertadas, tornando-as ideais para pesquisas sobre doenças cerebrais.

Este vídeo demonstra um método para isolar neurônios do prosencéfalo de um embrião de galinha em estágio inicial e cultivá-los em uma matriz de microeletrodos para formar uma rede neuronal.

Este vídeo mostra a criação de um chip de barreira hematoencefálica usando células precursoras derivadas de iPSC. Envolve a semeadura de células progenitoras neurais e células endoteliais microvasculares cerebrais em canais separados com uma membrana porosa. Ao fluir meios de diferenciação, as células endoteliais formam junções apertadas semelhantes a vasos sanguíneos, e as células neurais amadurecem em vários tipos de células cerebrais, estabelecendo uma barreira hematoencefálica funcional no...

O vídeo demonstra a preparação de fatias do córtex cingulado anterior do tálamo medial (MT-ACC) a partir de cérebros de camundongos. O cérebro de um camundongo é dissecado, cortes são feitos para expor a via MT-ACC e fatias são geradas usando um vibratome. As fatias de MT-ACC são então mantidas em líquido cefalorraquidiano artificial oxigenado.

Este vídeo demonstra uma técnica para gerar uma linhagem repórter de células-tronco de glioblastoma para identificar a diferenciação de células-tronco de glioblastoma (GSCs) em astroglia. Ele descreve as etapas envolvidas na semeadura de GSCs, transduzindo-as com um lentivírus que codifica GFP e determinando a expressão do repórter GFP por meio de citometria de fluxo.

Este vídeo mostra a infecção de neurônios primários do mesencéfalo de camundongos com vírus adeno-associados carregando um indicador fluorescente de cálcio. A fluorescência do indicador confirma a infecção bem-sucedida e permite o monitoramento em tempo real da infecção neuronal.

O vídeo demonstra um método para obter fatias de córtex rinal-hipocampo do cérebro de um filhote de rato e cultivá-las em inserções membranosas dentro de uma placa de vários poços cheia de mídia para análise posterior.

Este vídeo demonstra a dissecação e montagem de explantes cerebrais de larvas de Drosophila. O sistema nervoso central (SNC), ligado aos discos oculares, é extraído das larvas e, em seguida, montado em uma lâmina de vidro em uma solução salina fisiológica.

O vídeo demonstra uma técnica para diferenciar células-tronco pluripotentes induzidas por humanos (hiPSCs) em células progenitoras neurais (NPCs). Inicialmente, os hiPSCs são cultivados em uma camada alimentadora de fibroblastos embrionários de camundongos (MEFs). Posteriormente, as células são destacadas e transferidas para uma placa revestida com biopolímero para permitir que os MEFs adiram e se separem dos hiPSCs. Os hiPSCs suspensos são então transferidos para uma placa de fundo em V e...

O vídeo descreve o procedimento para o desenvolvimento de corpos embrióides livres de soro (SFEBs) a partir de células progenitoras neuronais usando vários meios de diferenciação sem soro ou DM. O DM-2 facilita a maturação e o arranjo dos neurônios para formar SFEBs, enquanto o DM-3 é usado para manutenção do crescimento.

Este vídeo demonstra o processo de cultura de células neuronais em uma matriz de múltiplos eletrodos padronizada (MEA) para estabelecer redes neuronais modulares. Este método permite o estudo da transmissão de sinais neurais e interações celulares.

Este vídeo mostra o processo de diferenciação de iPSCs humanas em neurônios motores. A lógica envolve a utilização de iPSCs que foram geneticamente modificadas para expressar fatores de transcrição específicos. Quando cultivado em um meio contendo doxiciclina, esse antibiótico desencadeia a expressão de fatores de transcrição, promovendo assim a diferenciação de iPSC em progenitores do neurônio motor. Em última análise, os progenitores são cultivados em um meio neuronal para produzir neurônios...