Um método de co-cultura para modelar interações neurônio-oligodendrócitos
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:26 min. • July 8th, 2025
Pegue os neurônios induzidos por humanos, ou iNs, cultivados em uma matriz extracelular.
Remova o meio e adicione enzimas digestivas que rompem a matriz, dissociando as células.
Transfira os iNs para um tubo. Centrifugar a suspensão e rejeitar o sobrenadante que contém as enzimas.
Ressuspenda os iNs em um meio de co-cultura; transfira-os para uma cultura de células precursoras de oligodendrócitos induzidas, ou iOPCs.
As iOPCs são precursoras dos oligodendrócitos que formam bainhas de mielina ao redor dos axônios dos neurônios.
Após a incubação, os iOPCs formam conexões sinápticas com os iNs. Fatores tróficos liberados pelos iOPCs e fatores de crescimento no meio promovem a maturação iN em neurônios, exibindo processos celulares aumentados que formam conexões sinápticas com outros neurônios.
A atividade elétrica dos neurônios maduros e fatores de crescimento no meio induz a maturação do iOPC em oligodendrócitos.
Os oligodendrócitos estendem os processos celulares, formando bainhas de mielina ao redor dos axônios neuronais.
A co-cultura estabelecida está pronta para análise.
No dia 14, placa iOPCs a uma densidade de 1 x 105 células por poço em uma placa de 24 poços em meio de diferen
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos