Gerando um modelo de cultura de órgãos pró-inflamatórios para simular uma doença precoce do disco intervertebral
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:27 min. • July 8th, 2025
Pegue uma cauda bovina.
Remova o tecido sobrejacente e os processos vertebrais e, em seguida, corte transversalmente para obter segmentos.
Identifique o disco intervertebral ou IVD, localizado entre as placas de crescimento e as placas terminais vertebrais.
Corte em ambos os lados do IVD e coloque-o em um prato contendo gaze embebida em tampão para manter a viabilidade do tecido.
Raspe qualquer tecido vertebral anexado e meça a altura do IVD.
Lave com tampão para remover restos de sangue e desinfete o IVD em um tampão contendo antibióticos.
Coloque os IVDs em câmaras de biorreatores contendo meios.
O meio no grupo fisiológico tem glicose alta, enquanto no grupo patológico, um meio com baixo teor de glicose induz a privação de nutrientes.
Coloque as câmaras no biorreator.
Para o IVD fisiológico, aplique uma carga suave diariamente. Para o DIV patológico, aplique uma carga intensa a uma taxa mais alta diariamente.
Entre os testes de carga diários, permita que os IVDs se recuperem no meio.
Após todos os procedimentos de carregamento, meça as alturas do IVD.
Uma altura reduzida nos DIVs patológicos indica uma condição degenerativa e pró-inflamatória.
Comece enxaguando bem toda a cauda
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