Estabelecendo uma configuração de célula inteira por meio do método Patch Clamp

Comece com uma fatia de cérebro de camundongo imobilizado colocada em uma câmara de gravação da configuração eletrofisiológica preenchida com um líquido cefalorraquidiano artificial para manter a viabilidade neuronal.

A configuração contém uma micropipeta de gravação preenchida com solução catiônica pré-montada conectada a um amplificador e uma unidade de controle de pressão.

Sob um microscópio, localize um neurônio e posicione a micropipeta perto dele.

Aplique pressão de ar positiva para limpar quaisquer detritos.

Mova a micropipeta em direção ao neurônio até que uma covinha se forme na membrana, indicando proximidade neuronal.

Aplique sucção fraca para puxar um pequeno adesivo de membrana dentro da micropipeta.

Isso cria uma vedação hermética que aumenta a resistência da micropipeta, confirmando uma vedação estável.

Manter o potencial da célula em um potencial fisiológico de repouso para estabilidade celular.

Em seguida, aplique uma sucção breve e forte para romper a membrana do remendo, estabelecendo uma conexão direta com o interior da célula.

Essa configuração de célula inteira está pronta para registrar a atividade elétrica neuronal.

Usando a roda de foco fino do microscópio,