Estabelecendo uma configuração de grampo de voltagem de célula inteira para registros eletrofisiológicos em fatias cerebrais

Pegue uma pipeta de registro com um eletrodo de fio em uma solução eletrolítica.

Posicione a pipeta acima de uma fatia de cérebro imobilizada.

Ajuste a corrente da pipeta para reduzir os sinais de fundo.

Use um microscópio para localizar o neurônio alvo e mova a pipeta em direção ao neurônio.

Aplique uma leve pressão positiva e trave-a.

A pressão positiva perturba a superfície do tecido, indicando proximidade com a célula.

Aproxime a pipeta até formar uma covinha na membrana, significando o posicionamento correto.

Libere a pressão positiva.

Observe um aumento na resistência à medida que a célula forma uma vedação com a pipeta.

Mantenha o potencial da membrana em uma tensão negativa constante para estabilidade.

Puxe a micropipeta para remover o excesso de pressão.

Ajuste as respostas elétricas rápidas e lentas da pipeta para precisão.

Aplique uma breve sucção para romper a célula, estabelecendo uma conexão elétrica direta.

A configuração do grampo de tensão de célula inteira agora está pronta para o registro eletrofisiológico.

Para obter a configuração de célula inteira, coloque a pipeta de gravação logo acima da fatia e compense a corrente da pipeta no modo Voltage Clamp. Aplique u