Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:09 min. • July 8th, 2025
Comece com um rato imobilizado e anestesiado com um microeletrodo de carvão ativado implantado no núcleo accumbens ou região NAc e um fio de referência no hemisfério esquerdo.
Esses eletrodos são conectados a um potenciostato, que mede os sinais elétricos gerados pela dopamina.
Um eletrodo estimulante com uma cânula guia é implantado na área tegmental ventral ou VTA, visando neurônios dopaminérgicos que se projetam na região NAc.
Aplique pulsos elétricos através do eletrodo estimulante que ativa os neurônios VTA, liberando dopamina, um mensageiro químico, na região NAc.
Na região NAc, a dopamina interage com o eletrodo de carbono e sofre oxidação e redução, gerando sinais elétricos basais.
Insira uma cânula interna na cânula guia para infundir um ativador ou um medicamento inibidor.
A droga ativadora estimula os neurônios VTA, aumentando a liberação de dopamina e elevando os sinais elétricos.
Em contraste, a droga inibitória diminui o sinal elétrico, impedindo a liberação de dopamina.
Estimule o animal a cada três minutos por 20 a 30 minutos. Depois de atingir uma linha de base estável, abaixe suavemente a cânula interna manualmente na cânula guia, pré-encaixada no estimulador bipolar, e obtenha dois a três registros de linha de base adicionais para confirmar que a inserção da cânula não causou uma alteração no sinal evocado.
Uma vez estabelecida uma resposta basal, use uma bomba de seringa em uma microsseringa para infundir 0,5 microlitros da solução do medicamento de interesse no VTA durante um período de dois minutos. Após a infusão, deixe a cânula interna no lugar por pelo menos um minuto antes da remoção, continuando a registrar a resposta a cada três minutos para medir os efeitos pós-infusão.