Avaliação da colonização bacteriana em um cérebro de camundongo após infecção por Listeria monocytogenes
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:18 min. • July 8th, 2025
Pegue um cérebro de rato perfundido no buffer.
O cérebro está infectado com Listeria monocytogenes resistente à estreptomicina, uma bactéria patogênica.
A etapa de perfusão remove o sangue do cérebro, garantindo que as medições da carga bacteriana reflitam a carga de Listeria monocytogenes no tecido.
Em seguida, homogeneizar o cérebro usando um homogeneizador esterilizado para quebrar o tecido e liberar bactérias.
Agora, prepare diluições em série do homogeneizado cerebral usando tampão.
Coloque essas diluições em placas de ágar de infusão cérebro-coração contendo estreptomicina, um antibiótico.
Incube as placas. O ágar de infusão cérebro-coração fornece nutrientes para o crescimento de Listeria monocytogenes, enquanto a estreptomicina seleciona bactérias resistentes, permitindo a formação apenas de colônias de Listeria resistentes à estreptomicina.
Conte o número de colônias na placa para determinar as unidades formadoras de colônias, uma medida da carga bacteriana infecciosa viável no cérebro.
Usando uma pinça, abra o crânio para expor o cérebro e coloque uma espátula entre a parte inferior do cérebro e a base do crânio para transferir cuidadosamente o cérebro para um tubo de 15
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