Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:07 min. • July 8th, 2025
Pegue uma placa de vários poços contendo neurônios sensoriais do gânglio da raiz dorsal do rato transfectado.
Os neurônios do poço de teste exibem expressão reduzida do receptor de neuropeptídeos, enquanto os neurônios do poço de controle exibem níveis fisiológicos de expressão do receptor de neuropeptídeos.
Substitua o meio por meio sem soro para fornecer um ambiente controlado para uma resposta de estimulação precisa.
Adicione um agonista do receptor neuropeptídico aos poços e misture. Incube a placa.
No poço de controle, o agonista do receptor neuropeptídico se liga aos receptores-alvo, desencadeando uma cascata de sinalização intracelular que libera neurotransmissores.
No entanto, nos poços de teste, a expressão reduzida do receptor de neuropeptídeos limita a ligação do agonista, levando à diminuição da liberação de neurotransmissores em comparação com o controle.
Após a incubação, colete o meio dos poços e centrifugue.
Transfira o sobrenadante para tubos e use um imunoensaio adequado para medir os níveis de neurotransmissores. A amostra de controle exibe maior liberação de neurotransmissores do que a amostra de teste após estimulação do agonista do neurorreceptor.
No dia 6, ap
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