Um modelo in vitro para estudar o cruzamento de patógenos da barreira hematoencefálica e a infecção de células cerebrais

Pegue um modelo de barreira hematoencefálica in vitro, ou BBB, compreendendo dois compartimentos separados por uma membrana porosa.

O compartimento superior ou luminal contém células endoteliais microvasculares. Essas células expressam junções apertadas, imitando o endotélio da barreira hematoencefálica que limita a passagem de células e moléculas.

O compartimento inferior ou abluminal contém neurônios, astrócitos e micróglia, representando o parênquima cerebral.

Introduza um vírus neurotrópico no compartimento luminal para simular uma infecção transmitida pelo sangue e incubar.

O vírus é endocitado pelas células endoteliais, sofre tráfego intracelular dentro das vesículas e é liberado no lado abluminal.

Após a incubação, remova a câmara superior. Colete amostras do meio do lado abluminal para avaliar a quantidade viral, confirmando o cruzamento bem-sucedido da camada endotelial.

Adicione meio fresco e incube novamente.

O vírus entra nas células neurais por endocitose, replica-se e libera progênie viral.

Quantifique o aumento da carga viral extracelular para confirmar a neuroinvasão e replicação viral.

Depois de configurar um mini dispositivo cerebral BBB, conforme demonstrado, adi