JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 4:39 min • April 28th, 2025
Prenda um rato anestesiado com a cabeça raspada em um quadro estereotáxico. Aplique pomada nos olhos para evitar o ressecamento e cubra com um campo cirúrgico
Desinfete a cabeça e a incisão para expor o crânio.
Usando um microscópio de dissecação, visualize uma das órbitas do olho, a cavidade óssea no crânio que abriga o olho.
Desvie os tecidos moles circundantes para expor o nervo infraorbital, que transmite sinais sensoriais da face para o cérebro.
Amarre duas ligaduras ao redor do nervo infraorbital para contraí-lo e induzir danos ao nervo.
Suture a incisão no couro cabeludo e permita que o rato se recupere.
Após a constrição do nervo, os neurônios danificados liberam moléculas de sinalização que recrutam células imunes.
Essas células imunes liberam mediadores que se ligam a nociceptores intactos próximos, neurônios sensoriais que transmitem dor.
Esta ligação mediadora sensibiliza os nociceptores, aumentando a excitabilidade neuronal e gerando sinais de dor que viajam para o cérebro, contribuindo para a dor neuropática.
Na preparação, corte dois pedaços de seis centímetros de ligadura intestinal crômica 5-0. Guarde-os em um prato de solução salina estéril para que não endureçam. Depois de confirmar que o rato está anestesiado pela ausência de uma resposta reflexa, comece a prepará-lo para a cirurgia raspando a cabeça para uma incisão no meio do couro cabeludo. Raspe um raio de 25 milímetros a partir do ponto central dos olhos.
Em seguida, fixe a cabeça do rato em uma moldura estereotáxica e coloque uma almofada aquecida sob o corpo do rato. Em seguida, aplique um pouco de pomada oftálmica. E limpe a área raspada com álcool alternado e esfoliantes betadine. Comece a cirurgia com uma incisão no couro cabeludo na linha média para expor o crânio e o osso nasal.
Prossiga com a cirurgia usando um microscópio de dissecação. Em seguida, usando uma pinça, libere a borda da órbita formada pelos ossos maxilar, frontal, lacrimal e zigomático. Além disso, limpe o sangue conforme necessário.
Agora, para acessar o IoN, desvie suavemente o conteúdo orbital com um cotonete de precisão. Ao fazer isso, não estique demais o nervo etmoidal anterior, que cruza superiormente ao IoN. Em seguida, com a ajuda de uma pinça, use um movimento de espalhamento para dissecar o IoN livre do tecido conjuntivo circundante. Sempre limpe o sangramento conforme necessário.
Agora, coloque o pedaço de ligadura entre o IoN e o osso frontal empurrando uma extremidade para baixo ao longo do osso frontal, medial ao IoN, e depois avançando-o alguns milímetros paralelos ao IoN, ficando inferior ao IoN. Em seguida, deslize a ponta de uma pinça com ângulo de 45 graus sob o IoN, perto da ligadura, e retraia suavemente o IoN lateralmente, revelando a ligadura e as pontas da pinça.
Segure a ligadura e passe-a sob o IoN, puxando-a para fora até que os comprimentos expostos sejam uniformes. Em seguida, amarre as pontas com um nó deslizante e deslize o nó no IoN. Contraia visivelmente o nervo apenas ligeiramente e complete o nó para que ele não escorregue mais.
Agora, corte as extremidades livres da ligadura e coloque outra ligadura usando a mesma técnica, a dois milímetros de distância da primeira ligadura. Confirme visualmente o posicionamento correto das ligaduras.
Complete a cirurgia fechando o couro cabeludo com sutura de poliéster 4-0. Em seguida, monitore o rato enquanto ele se recupera em uma almofada aquecida. Quando ele tiver recuperado a decúbito esternal, devolva-o a uma gaiola adequada. O rato deve ser alojado sozinho até que esteja completamente recuperado.
Este artigo detalha um procedimento cirúrgico para induzir dano nervoso em uma rata anestesiada, com foco no nervo infraorbitário. A metodologia inclui preparação, técnicas cirúrgicas e cuidados pós-operatórios.
Modelos pré-clínicos confiáveis de dor neuropática são essenciais para a validação de alvos e a redução de riscos mecanicistas na descoberta de terapias para dor. O modelo de constrição do nervo infraorbitário permite a avaliação quantitativa de vias de sinalização da dor e interações imunes-neuronais relevantes para neuropatias trigeminais. Esta abordagem reforça a confiança preditiva nas fases iniciais de descoberta e identificação de compostos líderes para o avanço de portfólios analgésicos.
Este modelo está posicionado na interface entre a descoberta inicial e a validação pré-clínica, conectando estudos mecanicistas e a identificação de compostos promissores para terapêuticas da dor.
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Última atualização: 29 agosto 2026