Imagem de microscopia confocal de árvores dendríticas intactas e morfologia da coluna vertebral em um cérebro de camundongo limpo

Pegue um cérebro de camundongo limpo com células que expressam proteínas fluorescentes e lipídios removidos para transparência para imagens de estrutura profunda com alta resolução.

Uma malha de hidrogel preserva biomoléculas e mantém redes neuronais.

Transfira o cérebro para uma câmara de imagem contendo um anel de agarose para suporte.

Prenda o tecido com adesivo e preencha a câmara com uma solução de correspondência de índice de refração para minimizar a dispersão de luz e criar um ambiente de imagem estável.

Coloque a câmara em um estágio de microscópio confocal e abaixe suavemente a objetiva na solução para estabelecer uma coluna contínua de contato.

Use epifluorescência para localizar regiões de interesse. Em seguida, ajuste os parâmetros de laser e imagem para otimizar a qualidade da imagem.

Capture uma série de pilhas z para criar uma representação tridimensional do tecido.

Use o software apropriado para analisar a morfologia celular, incluindo árvores dendríticas, suas espinhas e a distribuição e densidade dos neurônios.

Para construir uma grande câmara de imagem de tecido para tecidos com mais de 5 milímetros de espessura, use um prato de vidro de 10 centímetros com uma par