Usando reflectometria espectral para determinar diâmetros de axônio mielinizados em uma fatia de cérebro de camundongo fixa

Pegue um microscópio confocal hiperespectral com uma fonte de laser estabilizada configurada para uma ampla faixa espectral para decodificar a nanoestrutura da bainha de mielina do tecido cerebral.

Use um espelho de referência para capturar o espectro de refletância da linha de base. Remova o espelho e adquira um espectro de deslocamento escuro para correção de ruído do detector.

Transfira uma câmara com uma seção fixa de tecido cerebral para o estágio de microscópio.

Alinhe o plano focal à região do tecido de interesse, garantindo profundidade suficiente para minimizar a interferência da interface vidro-tecido.

A luz do laser é direcionada para a bainha de mielina multicamadas dos axônios.

À medida que a luz interage com a mielina, ocorrem reflexos parciais nas interfaces das camadas, produzindo padrões de interferência devido à variação das espessuras das camadas e dos índices de refração.

Adquira imagens espectrais desses padrões de interferência.

Após a correção da linha de base e análise do sinal, o espectro de refletância revela a periodicidade do número de onda, permitindo a determinação dos diâmetros dos axônios mielinizados.

Monte um espelho de referência na platina do microscópi