Imagem de polissomos isolados de um cérebro de camundongo usando microscopia de força atômica

0 views • 2:28 min • May 29th, 2025

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Comece com uma folha de mica com polissomos aderidos isolados do tecido cerebral do camundongo.

Um polissoma é um complexo de vários ribossomos ligados a uma fita de RNA.

Usando fita adesiva, prenda a folha de mica ao porta-amostras.

Coloque o suporte de amostra no microscópio de força atômica stage.

Posicione o balanço pré-montado. Alinhe o laser e o detector para garantir a detecção precisa do sinal durante a geração de imagens.

Ajuste a frequência de oscilação do cantilever para otimizar a detecção de características da superfície, preservando a integridade da amostra.

Comece a imagem oscilando a ponta do cantilever sobre a superfície da amostra.

À medida que a ponta encontra uma superfície elevada do polissomo, o laser é desviado.

Essas deflexões do laser são capturadas pelo detector, que gera uma imagem com resolução em nanoescala.

Use o software apropriado para corrigir efeitos arbitrários de inclinação e deriva, permitindo a visualização do polissomo.

Anexe a amostra preparada ao suporte de amostra do AFM usando fita dupla face. Em seguida, insira o porta-amostras no estágio AFM de acordo com as instruções do fabricante. Após a calibração, aproxime-se da amostra até que a ponta do cantilever se encaixe na superfície.

Selecione uma área de varredura de 2 por 2 mícrons, uma resolução de pelo menos 512 por 512 pixels. Escolha o modo de subtração de fundo ao vivo e selecione uma escala Z de 20 a 25 nanômetros. Em seguida, comece a aquisição da imagem. Inspecione a imagem, procurando a presença de objetos redondos caracterizados por uma altura entre 10 e 15 nanômetros ao adquirir imagens no ar.

Em seguida, ajuste o ponto de ajuste e os parâmetros de feedback até que objetos pontiagudos sejam visualizados. O fundo deve parecer relativamente plano em boas amostras com alguns objetos de 2 a 4 nanômetros de altura. Quando a imagem estiver boa, adquira várias varreduras de 2 por 2 mícrons em diferentes áreas de amostra.

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Last updated: 27 June 2026