T-maze Alternância forçado e Tarefas esquerda-direita para a Avaliação da Discriminação de Trabalho e Memória de Referência em Ratos

O aplicativo modificado de colegas de equipe automático com sistema de rastreamento é mostrado. Este aplicativo é construído com trilhos de plástico branco com paredes de 25 centímetros de altura. O MA é dividido em seis áreas por um fio automático em direção à área A. Um deles é um compartimento STA.

S dois é uma semelhança entre os colegas de equipe. A um sob A dois são, respectivamente, o braço esquerdo sob o direito. As áreas P um sob P dois comparam as passagens de conexão das áreas A um ou A dois até A um, de modo que o camundongo possa retornar ao compartimento estático.

As portas abrem-se automaticamente para baixo aqui neste vídeo como demonstração, sendo que uma das portas é operada manualmente. Esses operadores aprimorados permitem-nos utilizar o INB micro SSIS na fisiologia molecular e na técnica gênica durante o desempenho dos colegas de equipe. A letra N, seguida por um ponto, aciona o dispensador, sendo o ponto cruzado usado como recompensa alimentar que empurra um frasco do dispensador de alimento, seguido pelo frasco descartado.

Você pode observar o período sendo liberado do dispensador de alimento sobre a bandeja de comida e então descartado sob o terreno até que o camundongo seja detectado pelo sensor e registrado por um computador. Na prática, o programa do sistema de rastreamento de vídeo dispensa automaticamente o período, de modo que você não precise fazer nada até o fim da sessão. A câmera CCD é montada acima do operador para capturar o comportamento do camundongo pelo computador como uma imagem em tempo real, enquanto o aplicativo Parus é iluminado com 100 lux por centímetro quadrado.

Recomenda-se que o Appell seja colocado em uma sala insonorizada para reduzir os ruídos ambientais ao redor, iniciando uma semana antes das sessões operantes. Pese os animais diariamente e atribua a cada camundongo uma pontuação de velocidade para habituação ao período e ao conjunto de placas, com alimentação padrão para CHO, mantendo 80% a 85% do peso com alimentação livre durante todo o experimento. No dia seguinte ao alcance do peso-alvo, transfira todas as gaiolas contendo os camundongos para a sala insonorizada pelo menos 30 minutos antes do início do primeiro ensaio, evitando exposição à luz direta. Evite colocar as gaiolas na prateleira superior devido às luzes recentes.

Antes de colocar seu camundongo nos operadores, você deve primeiro limpar os operadores com uma língua, abrindo assim sua água super-hipoclorosa para evitar um viés baseado em sinais ProAct. Seis espíritos próximos por camundongo são adicionados ao centro, juntamente com os seis Mandamentos e um para cada período em cada bandeja dos dispensadores de alimento. Coloque todos os camundongos individualmente em gaiolas no Perus e permita-lhes liberdade.

Explore o labirinto de Perus com todas as portas abertas ou antes de 30 minutos. Um dia após a arbitragem, os camundongos serão submetidos a drenagem sanguínea diária com todas as portas fechadas e a colocação do comprimido na esteira alimentar. Coloque o camundongo no braço esquerdo se ele consumir o comprimido dentro de cinco minutos. Após isso, transfira o camundongo para o braço direito e reinicie o pré-treinamento. Esse procedimento de treinamento é repetido até cinco vezes por dia e continuado até que o camundongo o consuma.

Mais de 80% dos períodos colocaram o camundongo no compartimento estático. As portas são abertas e a boca é dada como primeira escolha para um braço rapidamente, e o camundongo retorna por si só ao compartimento inicial. Em seguida, o camundongo é submetido à escolha no futuro.

Agora, o braço oposto ao quarto braço é mordido. Em seguida, o camundongo retorna por si só à caixa estática e o procedimento é repetido. Isso é repetido até 10 vezes por dia, tanto em camundongos controle quanto em camundongos experimentais.

Esses critérios permitem testar ainda mais os camundongos na tarefa de retenção com atraso, inserindo atrasos de 3, 10, 30 ou 60 segundos entre a primeira escolha e os substantivos da escolha completa. Esta é uma planilha para registrar as informações desta tarefa, identificação única do camundongo, genótipo, padrão de furo na orelha e espaço para registrar os dados manualmente no programa de aplicação Land. Selecione o projeto de entrada online Plug TM pelo identificador do projeto.

Por exemplo, sessão de entrada do nome da linha mestra. Por exemplo, data do teste, parâmetros de entrada como fórmula com imagem capturada pelo corte de tempo da câmera C e tamanho do operador. Em seguida, insira o ID do ensaio.

Por exemplo, o número da estação deve ser vinculado ao nome do arquivo de referência ou a esta tarefa e deve-se informar o número da opção através do menu suspenso, o tempo limite para erro da máquina e o tempo de penalidade. Em seguida, defina os valores de nitidez e contraste com base na imagem capturada, seguido pela imagem binária especial curta. Por fim, após verificar se as regiões de interesse desejadas foram coletadas, pode-se concluir o padrão para que o programa fique pronto para testes.

Pegue o camundongo suavemente e coloque-o no compartimento inicial. Clique no botão de início e na escolha forçada. Após o início, você poderá ver imagens binárias e em tempo real, bem como lesões em inte.

Neste caso, o braço apical foi ED no campo hoje com o braço direito, o camundongo entrou na página e a porta estava aberta. A escolha completa para baixo inicia o período que foi entregue ao braço esquerdo. Como o camundongo entrou no braço esquerdo, a resposta foi marcada como correta.

O resultado das respostas é exibido na janela inferior clara do monitor. Aqui, as imagens ao vivo de exemplo reproduzidas no espírito mostrado levam aves indicando que aquelas palavras estão fechadas e o ciclo amarelo indica o período de cruzamento. Um camundongo é submetido a 10 ensaios consecutivos em uma sessão por dia.

O mouse treinado diariamente para liderar apresenta uma média de 80% de respostas corretas; a porcentagem de respostas corretas, a latência para completar a sessão, a distância até o nível e o número de erros de remissão são calculados automaticamente pelo programa. Após cada sessão, o animal é devolvido à sua gaiola de origem. Limpe a placa até o dispensador, limpe as plataformas com uma toalha de papel, use água limpa e super hiper pura para evitar um viés baseado em resíduos de fábrica. Se for controlar os camundongos experimentais, esses são os critérios e, caso deseje testar ainda mais os camundongos na tarefa de retenção com atraso, basta selecionar o arquivo de atraso nas configurações do programa e iniciar a próxima sessão.

O procedimento é algo semelhante à tarefa de postura, mas seja da esquerda para o braço direito, é sempre Ed, como na tarefa de retenção de postura e programa de aplicação. Selecione o nome do arquivo de referência para esta tarefa e o nome do camundongo no menu suspenso, coloque um camundongo no compartimento de início. Clique no botão iniciar e a escolha principal começa agora.

Neste caso, o braço selecionado é sempre mordido com o Período. Um camundongo geralmente é submetido a 10 a 20 tentativas consecutivas em uma sessão por dia. Os camundongos são treinados diariamente até atingirem o critério médio de 80% de respostas corretas.

Os resultados são calculados automaticamente após os camundongos. Com base nesses critérios, sessões adicionais com os camundongos podem ser realizadas para avaliar a memória de retenção, feitas inserindo um intervalo entre as sessões, ou para avaliar a atividade comportamental. Ao alternar o local do braço para o braço oposto ao longo das tentativas e sessões, o vídeo foi corrigido por uma pessoa neste processo por meio de um alfa hetero M complicado e controlado pelo tipo LI na tarefa de automação forçada.

O resultado demonstrativo da memória de trabalho com um mutante, mas com CBR prejudicado na tarefa do disco, mostra que camundongos mutantes realizam esta tarefa sem nenhum problema e, mesmo após um atraso de um mês, demonstraram nenhuma deficiência na aprendizagem do ônibus. No entanto, os mutantes apresentaram desempenho prejudicado. O Teste de Companheiros de Equipe é um dos testes comportamentais mais amplamente utilizados para avaliar a memória de trabalho e de referência.

Em roedores, aperfeiçoamos o aparelho de teste, que possui várias vantagens. Primeiro, as portas deslizantes abrem automaticamente e o camundongo pode entrar na caixa S por conta própria após cada ensaio. Essa automação do MA reduz o tempo e o esforço necessários para operar manualmente as comportas e os dispensadores de alimento.

E em nosso laboratório, um experimento pode envolver até quatro colegas de equipe ao mesmo tempo. Segundo, o equipamento nos permite utilizar técnicas que exigem fiação na cabeça, como microdiálise in vivo, eletrofisiologia in vivo ou optogenética in vivo, porque as portas deslizantes abrem para baixo. Por fim, o labirinto foi projetado de modo que o camundongo só possa avançar nos outros caminhos, não retroceder, o que pode permitir um movimento mais suave do animal.

Neste vídeo, apresentamos este aparato modificado para colega automático e nossos protocolos aqui é o Dr. Hiro Pash. Em nosso laboratório, Hirotaka demonstrará os protocolos utilizando este aparato automatizado modificado neste filme. Hirotaka, qual foi sua primeira impressão sobre o teste com colegas utilizando este aparato aprimorado?

Minha primeira impressão foi que o aparelho e o programa de software eram muito fáceis de manusear e que o teste podia ser realizado prontamente. Você acha que qualquer pessoa pode operar esses equipamentos e esse programa ou é necessária alguma forma de treinamento especial? Concordo parcialmente.

Qualquer pessoa pode aprender a manipular os operadores. Nenhuma formação especial é necessária para realizar nenhum dos procedimentos de teste. Existem dicas ou aspectos aos quais você deve prestar atenção ao realizar o teste?

Sim. Tenho o cuidado de manter a motivação pela comida fornecida em massa, controlando diariamente o peso corporal. Diferenças individuais na motivação podem resultar em variações no desempenho dos colegas de equipe.