Monitoramento da ubiquitina-proteassoma Atividade em células vivas Usando um Degron (dgn) desestabilizado Green Fluorescent Protein Protein Repórter (GFP) com base em

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10:25 min

10 de novembro de 2012

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Um método para monitorizar a actividade de ubiquitina-proteassoma nas células vivas é descrito. A degron-GFP-desestabilizado (GFP-dgn) e uma proteína de fusão GFP estável dgnFS-são gerados e transduzidos para a célula utilizando um vector de expressão lentiviral. Esta técnica permite a geração de um estábulo GFP-dgn/GFP-dgnFS linha celular que expressa em que a actividade de ubiquitina-proteassoma podem ser facilmente avaliados utilizando epifluorescência ou citometria de fluxo.

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Rep rter GFP Dgn

Chapters in this video

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Title

1:21

Virus Production

4:11

Titering of Virus

6:13

Transduction of Human Diploid Fibroblasts

7:19

FACS Experiments

8:50

Proteasomal Activity in vivo

10:04

Conclusion

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