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JoVE Journal Neuroscience
Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

Transdução Viral seletiva de Adultos-nascido neurônios olfativos de crônica In vivo Estímulo Optogenetic

Full Text
15,969 Views
12:00 min
December 28, 2011

DOI: 10.3791/3380-v

Gabriel Lepousez1, Mariana Alonso1, Sebastian Wagner1, Benjamin W. Gallarda1, Pierre-Marie Lledo1

1Laboratory for Perception and Memory,Institut Pasteur and Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Neurônios adultos-nascido do bulbo olfativo pode ser controlado usando optogenetically Channelrhodopsin2 expressando injeção lentiviral no fluxo migratório rostral e fotoestimulação crônica com uma miniatura implantado LED.

O objetivo deste procedimento é usar o controle remoto para ativar os neurônios do bulbo olfatório e observar como sua ativação afeta o comportamento. Isso é feito pela introdução de um gene de tendências do canal Redin dois, acoplado ao YFP em neurônios-alvo de adultos com injeções estereotáxicas de um vetor lentiviral. Em seguida, um LED é calibrado e preparado para implantação, produzindo uma ideia geral da quantidade de luz transmitida ao cérebro.

A etapa final do procedimento é a implantação do LED sobre o bulbo olfatório, garantindo seu posicionamento e fixação adequados. Em última análise, a ativação neuronal é confirmada por meio de CFOs, coloração imunológica e resultados de testes comportamentais. A principal vantagem dessa técnica sobre os métodos existentes, como estimulação elétrica padrão ou perturbações farmacológicas, é que a estimulação optogenética de neurônios marcados é altamente específica em relação ao tipo e ao número de neurônios ativados.

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Neurociência Issue 58 bulbo olfatório neurônios olfativos in vivo a transdução viral mouse LED

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