Name: Em novembro deste ano em JOVE (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 51 s
Description: Descubra os destaques da edição de novembro do Journal of Visualized Experiments. Explore avanços em neurociência e biologia com experimentos visualizados que revelam novos comportamentos neuronais e técnicas inovadoras.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3505/">Medição de Fluxos Rápidos de Cálcio em Cardiomiócitos</a></h2>
Urszula Golebiewska1, Suzanne Scarlata2 1Departamento de Ciências Biológicas e Geologia, Queensborough Community College, 2Departamento de Fisiologia e Biofísica, Stony Brook University
Apresentamos um método para isolar eventos rápidos (microssegundos) de cálcio de fluxos mais lentos em células vivas usando microscopia confocal de varredura a laser. O método mede as flutuações de intensidade de fluorescência dos indicadores de cálcio registrando varreduras de linha de várias centenas de pixels em uma célula. A análise de histograma nos permite isolar as escalas de tempo de diferentes fluxos de cálcio.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3373/">Síntese de submonômeros em fase sólida de polímeros peptóides e sua automontagem em nanofolhas altamente ordenadas </a></h2>
Helen Tran, Sarah L. Gael, <cor da fonte = 'preto'>Michael D. Connolly, <cor da fonte = 'preto' >Ronald N. Fundição Molecular Zuckermann , Laboratório Nacional Lawrence Berkeley
Um método manual simples e geral de síntese de peptóides envolvendo equipamentos básicos e reagentes disponíveis comercialmente é descrito, permitindo que os peptóides sejam facilmente sintetizados na maioria dos laboratórios. A síntese, purificação e caracterização de um peptóide anfifílico 36mer é descrita, bem como sua automontagem em nanofolhas altamente ordenadas.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3258/">Avaliação Comportamental da Destreza Manual em Primatas Não Humanos</a></h2>
<font color='black'>Eric Schmidlin*, Mélanie Kaeser*, Anne- Dominique Gindrat, Julie Savidan, Pauline Chatagny, Simon Badoud, Adjia Hamadjida, Marie-Laure Beaud, Thierry Wannier, Abderraouf Belhaj-Saif, Eric M. Departamento de Medicina Rouiller , Universidade de Friburgo * Esses autores contribuíram igualmente
Como a destreza manual é uma prerrogativa principalmente dos primatas, tarefas comportamentais têm sido desenvolvidas em macacos. Quatro tarefas de preensão de alcance e preensão, medindo a capacidade e a força de manipulação da mão, permitem estabelecer a recuperação funcional após uma lesão do sistema nervoso central e testar o efeito de um tratamento.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3588/">Determinando a atividade fagocítica de amostras clínicas de anticorpos</a></h2>
Elizabeth G. McAndrew1, <cor da fonte = 'preto' > Anne-Sophie Dugast1, < cor da fonte = 'preto' > Anna F. Licht1, Justin R. Eusébio1, <cor da fonte = 'preto' > Galit Alter1, < cor da fonte = 'preto'>Margaret E. Ackerman2 1Hospital Geral de Massachusetts, Instituto Ragon de MGH, MIT e Harvard, 2Escola de Engenharia Thayer, Dartmouth College
Apresentamos um ensaio citométrico de fluxo de alto rendimento para determinar a atividade fagocítica de anticorpos específicos de antígeno de amostras clínicas, utilizando esferas revestidas de antígeno fluorescente e uma linha celular monocítica expressando múltiplos receptores Fc - fornecendo uso de receptor e determinações de atividade fagocítica de forma padronizada e reprodutível para qualquer antígeno de interesse.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3187/">Estudo do citoesqueleto de actina em células endoteliais vivas que expressam GFP-actina</a></h2>
Travis M. Doggett, <cor da fonte = 'preto'>Jerome W. Departamento de Fisiologia de Breslin , Centro de Ciências da Saúde da Universidade Estadual da Louisiana Imagens microscópicas de células endoteliais vivas que expressam GFP-actina permitem a caracterização de mudanças dinâmicas nas estruturas do citoesqueleto. Ao contrário das técnicas que usam espécimes fixos, este método fornece uma avaliação detalhada das mudanças temporais no citoesqueleto de actina nas mesmas células antes, durante e depois de vários estímulos físicos, farmacológicos ou inflamatórios.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3260/">Implantação de transmissores de radiotelemetria que produzem dados sobre ECG, frequência cardíaca, temperatura corporal central e atividade em camundongos de laboratório em movimento livre</a></h2>
Nikola Cesarovic1, Paulin Jirkof2, Andreas Rettich2, Margarete Arras1 1Divisão de Pesquisa Cirúrgica, Hospital Universitário de Zurique, 2Instituto de Ciência de Animais de Laboratório, Universidade de Zurique
Uma técnica cirúrgica para implantação de transmissores de telemetria disponíveis comercialmente usados para medição contínua de biopotencial (ECG de uma derivação), frequência cardíaca, temperatura corporal central e atividade locomotora em camundongos em movimento livre é mostrada. Também são apresentadas recomendações e protocolos para cuidados pós-operatórios e alívio da dor, melhorando a recuperação, o bem-estar e a taxa de sobrevida.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3381">Eletroporação do Mesenquima Craniofacial</a></h2>
Jacqueline M. Tabler, Karen J. Departamento de Desenvolvimento Craniofacial de Liu , King's College London
As cartilagens craniofaciais se desenvolvem em contato próximo com outros tecidos e são difíceis de manipular em animais vivos. Estamos usando eletroporação para fornecer ferramentas moleculares durante o crescimento do esqueleto craniofacial, ignorando os efeitos embrionários iniciais. Essa abordagem nos permitirá testar com eficiência moléculas candidatas in vivo.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3379">Registro eletrofisiológico de fatias e estimulação optogenética de neurônios nascidos em adultos no bulbo olfatório</a></h2>
Matthew Valley, Sebastian Wagner, Benjamin W. Gallarda, Laboratório Pierre-Marie Lledo de Percepção e Memória, Institut Pasteur e Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Neurônios nascidos em adultos que expressam ChR2 podem ser manipulados em preparações eletrofisiológicas de fatia para examinar sua contribuição para a função dos circuitos neurais olfativos.

em novembro deste ano em jove

November 2011: This Month in JoVE

A edição de novembro do Journal of Visualized Experiments começa com uma série de experimentos comportamentais para medir a capacidade de preensão em primatas. Pesquisadores da Universidade de Friburgo demonstram quatro tarefas de agarrar e alcançar, que seguem etapas comuns para conter confortavelmente o animal e posicionar corretamente sua cabeça. O teste Brinkman Board é usado para avaliar o alcance de objetos estáticos, enquanto o Rotating Brinkman Board apresenta uma condição em que os animais precisam antecipar a posição do objeto. O teste da Caixa de Brinkman permite que a destreza seja investigada em condições em que o macaco tem menos graus de liberdade para realizar a tarefa de preensão e não pode usar a visão para guiar o movimento. Enquanto os testes de placa e caixa de brinkman dependem exclusivamente da análise de vídeo obtido durante os experimentos, a fim de gerar dados, o aparelho de tarefa de alcance da gaveta possui detectores que monitoram as forças de aderência e carga, bem como a posição da gaveta, tornando este teste apropriado para medir a força e a capacidade de preensão. Em combinação, esses quatro testes fornecem uma abordagem poderosa para avaliar o controle motor no membro torácico distal, e o grupo de Friburgo apresenta dados de estudos de lesões e experimentos destinados a testar terapias potenciais para lesão medular. Em Medicina Clínica e Translacional, colaboradores da Divisão de Pesquisa Cirúrgica do Hospital Universitário de Zurique e do Instituto de Ciência de Animais de Laboratório da Universidade de Zurique, trabalham juntos para implantar um dispositivo de radiotelemetria em camundongos, que pode ser usado para fazer medições fisiológicas em animais que se movem livremente. Os dispositivos consistem em dois eletrodos, que são capazes de medir a atividade biopotencial (ECG, EEG ou EMG), bem como a temperatura, e um transmissor de rádio leve (1-200 Hz em largura de banda) que pode ser implantado na cavidade abdominal. O estresse do manuseio de animais, bem como a anestesia, são elementos de confusão conhecidos, que afetam as medições fisiológicas, de modo que os dispositivos de radiotelemetria são uma maneira conveniente de adquirir dados fisiológicos de animais em um estado natural e imperturbável, bem como fazer medições de vários animais, simultaneamente. JoVE também adiciona à sua série de protocolos de eletroporação um método para introduzir macromoledules no mesênquima craniofacial de girinos de Xenopus laevis em desenvolvimento, do Liu Lab no King's College London. Os girinos de Xenopus são transferidos para uma câmara de eletroporação, onde podem ser injetados com ácido nucléico e, em seguida, submetidos à eletroporação, que fornecerá vetores de expressão ou morfolinos no tecido craniofacial em desenvolvimento. A entrega de genes em cartilagens diferenciadas é inerentemente problemática, e o laboratório de Liu mostra que, por meio da eletroporação, os morfolinos podem ser introduzidos nos tecidos procartilinosos e cartilaginosos do girino Xenopus ao longo de uma variedade de estágios de desenvolvimento. Em Bioengenharia, o grupo de Zuckerman do Laboratório Nacional Lawrence Berkeley ilustra seu método de síntese de peptóides, uma classe de moléculas orgânicas biologicamente ativas que se assemelham a peptídeos, mas têm suas cadeias laterais ligadas ao nitrogênio da ligação peptídica, em vez do carbono alfa, o que os torna resistentes à proteólise. O grupo de Zuckerman demonstra a síntese de submonômeros, onde monômeros peptídicos são adicionados sequencialmente em reações de bromoacetilação e deslocamento de brometo, permitindo que o comprimento e a composição da cadeia peptoide sejam controlados com precisão. Além disso, o fato de a síntese ser feita em resina de amida e, portanto, ser síntese em fase sólida, simplifica muito a purificação dos peptóides sintetizados. Esses autores também mostram como os peptóides recém-sintetizados podem ser induzidos a se auto-montar em estruturas altamente ordenadas, denominadas nanofolhas, que podem ser visualizadas por fluorescência e microscopia eletrônica de varredura. Essas nanofolhas podem servir como uma plataforma potencial para miméticos de proteínas e membranas. No final do mês, o JoVE apresenta um ensaio para medir a atividade fagocítica em células expostas a amostras de anticorpos clínicos para nossa seção de Imunologia e Infecção. Colaboradores do Massachusetts General Hospital e do Dartmouth College mostram que as células THP-1 engolem grânulos revestidos de antígenos ligados a anticorpos em microscopia de vídeo de lapso de tempo e apresentam um método de citometria de fluxo baseado em placas para quantificar a extensão da fagocitose. Nossos autores usam esse método para determinar a capacidade de diferentes amostras de anticorpos induzirem fagocitose, como as de pacientes com HIV tratados e não tratados com terapias antirretrovirais. Este resumo do conteúdo do JoVE em novembro fornece uma breve visão geral dos destaques do JoVE para o mês. Outros artigos dignos de nota incluem métodos para imagens ao vivo da dinâmica do citoesqueleto em células endoteliais, medição do fluxo de cálcio em cardiomiócitos e eletrofisiologia de fatias de neurônios nascidos em adultos no bulbo olfatório.

Em novembro deste ano em JOVE

The November issue of the Journal of Visualized Experiments begins with a series of behavioral experiments for measuring prehension ability in primates. ...

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Descubra os destaques da edição de novembro do Journal of Visualized Experiments. Explore avanços em neurociência e biologia com experimentos visualizados que revelam novos comportamentos neuronais e técnicas inovadoras.

Em novembro deste ano em JOVE (Vídeo) | JoVE Journal

Aaron Kolski-Andreaco

Em novembro deste ano em JOVE

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