Sonda baseada Endomicroscopy Laser Confocal do Trato Urinário: A Técnica
10 de janeiro de 2013
Sonda baseada endomicroscopy laser confocal permite microscopia em tempo real do aparelho urinário humano durante cistoscopia, fornecendo imagens, dinâmico intravital de estados patológicos tais como o cancro da bexiga, com resolução celular. Endomicroscopy pode aumentar a precisão do diagnóstico do padrão de luz branca endoscopia intra-operatória e fornecer orientação imagem para melhorar a ressecção cirúrgica.
O objetivo do presente experimento é demonstrar a microscopia in vivo usando a microscopia endo a laser confocal baseada em sonda em um paciente submetido à ressecção transuretral de um tumor de bexiga. Isso é conseguido usando primeiro a cistoscopia de luz branca para visualizar todo o urotélio da bexiga e observar quaisquer lesões anormais ou suspeitas da mucosa. Como segunda etapa, um agente de contraste é instilado intra-aliado, fornecendo o contraste de fluorescência necessário para a visualização com o microscópio endo a laser confocal na terceira etapa, a microscopia in vivo de cada área de interesse é realizada e as características microarquitetônicas e vasculares celulares do tecido são anotadas.
Em última análise, os achados da microscopia in vivo podem ser comparados à análise histopatológica das biópsias das regiões de interesse. Demonstrando o procedimento estará o Dr. Joseph Leal, o cirurgião urológico, que desenvolveu a aplicação da microscopia endo a laser confocal baseada em sonda para o trato urinário na sala de cirurgia. Depois que o sujeito estiver na posição de litotomia, comece inserindo um cistoscópio rígido através da uretra usando cistoscopia de luz branca padrão para vigiar as regiões da bexiga sob luz branca.
Marque as regiões de interesse para microscopia endo a laser confocal com uma alça de ressecção. Outras modalidades de imagem óptica macroscópica, como cistoscopia fluorescente e imagem de banda estreita, podem ser usadas nesta etapa para identificar áreas adicionais de suspeita, agora insira um cateter urinário estéril na bexiga usando um cateter de 60 mililitros. Dica seringa, instilar o agente de contraste diluído por gravidade.
Em seguida, prenda o cateter urinário para segurar o agente de contraste em casa. Após cinco minutos, drene o agente da bexiga. Em seguida, despeje 240 a 300 mililitros de solução salina normal na seringa de 60 mililitros para lavar qualquer contraste residual da bexiga para injeção intravenosa de fluoresceína.
Retire um mililitro de fluoresceína para uma seringa. Conecte a seringa ao ponto de acesso intravenoso e injete 0,5 a um mililitro de fluoresceína por via intravenosa como um bolus, lavando a linha com solução salina normal. Após a injeção do agente de contraste, remova uma sonda de imagem de microscopia endo a laser confocal estéril da embalagem e conecte-a à unidade de varredura a laser.
Em seguida, aqueça e calibre a sonda de imagem de acordo com as instruções do fabricante e, em seguida, reinsira o cistoscópio rígido com uma lente de zero grau na bexiga. Agora avance a sonda de imagem de microscopia endo confocal ao longo do canal de trabalho do cistoscópio com a ponta logo além do cistoscópio sob luz branca. Localize as regiões de interesse marcadas anteriormente enquanto a sonda de imagem varre a região de interesse.
Registre as imagens para análise futura. Em seguida, use a mão do operador para manipular a imagem de microscopia endo confocal. Sonda para contato direto e rápido das regiões de interesse para seccionamento óptico das regiões de interesse.
Aumente e diminua suavemente a pressão na sonda de imagem, mantendo contato direto Para alcançar tumores localizados no interior da bexiga. Use um cotovelo e ponte AL padrão para facilitar a deflexão da sonda de imagem para contato direto com a região de interesse. Se desejar, obtenha biópsias de corte a frio de quaisquer regiões de interesse correspondentes que foram digitalizadas pela microscopia endo a laser confocal.
Após a conclusão da imagem, remova a sonda de imagem de microscopia endo confocal do canal de trabalho. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de lavar o excesso de fluoresceína de dentro da bexiga antes da imagem e manter um contato de 90 graus entre uma sonda e a superfície da mucosa. Esta primeira imagem é de uma cistoscopia representativa de luz branca com um tumor papilar corado por via intravascular.
Observe a sonda de imagem de 2,6 milímetros visível na parte inferior da imagem. Essas duas imagens são imagens representativas de microscopia endoscópica a laser confocal obtidas de dois tumores de bexiga diferentes usando fluoresceína intravesical e intravenosa, respectivamente. Dado que as sondas de imagem podem ser trocadas entre os diferentes tipos de cistoscópios a laser confocal, a endo microscopia pode ser combinada com outras modalidades de imagem emergentes, o que pode melhorar a precisão diagnóstica de qualquer tecnologia por si só, incluindo cistoscopia fluorescente como mostrado aqui, e imagem de banda estreita como mostrado aqui.
Portanto, esse método pode fornecer informações sobre o câncer de bexiga. Pode ser aplicado a outros sistemas, como carcinomas uroteliais do trato superior, que podem ser difíceis de diagnosticar na biópsia.
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Visão Geral
Este estudo demonstra o uso da endomicroscopia a laser confocal com sonda para obtenção de imagens em tempo real do trato urinário humano durante a cistoscopia. A técnica permite a visualização dinâmica de tumores da bexiga com resolução celular, podendo aumentar a precisão diagnóstica e orientar procedimentos cirúrgicos.
Componentes Principais do Estudo
Área de Ciência
- Urologia
- Endoscopia
- Microscopia
Contexto
- A microscopia endoscópica a laser confocal baseada em sonda fornece imagens de alta resolução.
- Pode ser utilizada em conjunto com a endoscopia padrão com luz branca.
- O método pode melhorar a detecção do câncer de bexiga.
- A imagem intraoperatória pode orientar a ressecção cirúrgica.
Objetivo do Estudo
- Demonstrar a microscopia in vivo durante a ressecção transuretral de tumores da bexiga.
- Comparar os achados in vivo com a análise histopatológica.
- Avaliar a eficácia da microscopia endoscópica a laser confocal na identificação de tumores da bexiga.
Métodos Utilizados
- Visualização inicial da bexiga utilizando cistoscopia com luz branca.
- Instilação de um agente de contraste para melhorar a imagem.
- Uso de uma sonda de endomicroscopia a laser confocal para análise detalhada.
- Gravação de imagens para comparação futura com os resultados da biópsia.
Resultados Principais
- Identificação bem-sucedida de tumores utilizando endomicroscopia a laser confocal.
- Imagens de alta resolução obtidas a partir de diversas lesões da bexiga.
- A comparação dos resultados de imagem com achados histopatológicos confirmou a precisão.
- Potencial de aplicação em outros carcinomas do trato urinário.
Conclusões
- A microscopia endoscópica a laser confocal baseada em sonda aprimora o diagnóstico do câncer de bexiga.
- A técnica pode melhorar os resultados cirúrgicos por meio de imagens mais precisas.
- São necessárias pesquisas adicionais para explorar sua aplicação em outros sistemas.
Perguntas Frequentes
Relevância Executiva para a Indústria
A endomicroscopia a laser confocal com sonda permite a obtenção de imagens em tempo real e alta resolução de tecidos do trato urinário durante a cistoscopia, auxiliando na detecção precoce do câncer de bexiga e orientando a ressecção cirúrgica. Essa tecnologia aumenta a confiança diagnóstica ao fornecer visualização em nível celular que complementa a análise histopatológica, reduzindo a incerteza na caracterização de lesões. Sua integração aos fluxos de trabalho endoscópicos padrão oferece uma via translacional para melhorar a estratificação de risco no manejo do carcinoma urotelial.
Aplicações Estratégicas em P&D de Biotecnologia Farmacêutica
Descoberta Inicial e Validação de Alvo
- Valor Científico: Permite a investigação de hipóteses terapêuticas por meio da visualização da morfologia celular e da arquitetura vascular in vivo.
- Valor Operacional: Apoia a validação funcional de alvos por meio da correlação em tempo real entre achados de imagem e pontos finais histopatológicos.
- Valor Preditivo: Aumenta a confiança na relevância do alvo ao permitir a observação direta de alterações microarquiteturais associadas à doença.
Desenvolvimento de Ensaios e Triagem
- Valor Científico: Prepara sistemas biológicos validados para triagem subsequente, permitindo a localização precisa de regiões de interesse para biópsia.
- Valor Operacional: Promove a padronização de ensaios por meio da administração reprodutível de agentes de contraste e protocolos de imagem baseados em sondas.
- Escalabilidade: Facilita a reutilização da plataforma em sistemas de cistoscopia flexíveis e rígidos, com sondas de imagem intercambiáveis.
Pesquisa Translacional e Pré-clínica
- Valor Científico: Apoia a modelagem de sistemas relevantes para doenças ao capturar características vasculares e celulares dinâmicas do tecido neoplásico.
- Continuidade Tradutiva: Conecta a descoberta à validação pré-clínica ao permitir o monitoramento longitudinal da progressão da lesão.
- Decisões Ajustadas ao Risco: Orienta critérios de avanço por meio de leituras quantitativas de imagem que se correlacionam com a graduação patológica.
Integração de Pipeline e Fluxo de Trabalho
O método integra-se ao continuum de descoberta, desde a verificação inicial da hipótese do alvo até a identificação de compostos promissores e validação pré-clínica, fornecendo leituras fenotípicas baseadas em imagem.
- Biologia da Descoberta: Apoia a verificação de hipóteses e a clarificação de vias ao permitir a visualização direta das interações estromais e epiteliais associadas ao tumor.
- Triagem: Melhora a prontidão do ensaio ao permitir o direcionamento preciso de lesões suspeitas para perfilagem molecular e triagem de compostos.
- Análises: Gera resultados quantitativos, como escores de densidade vascular e de atipia celular, que permitem análise comparativa entre diferentes condições.
- Pesquisa Translacional: Conecta-se à continuidade pré-clínica por meio de imagens longitudinais que refletem modelos de progressão histopatológica.
- Reutilização Empresarial: Funciona como uma plataforma de imagem reutilizável, aplicável em múltiplas indicações urológicas e configurações de endoscópio.
Impacto Operacional e Empresarial
- Valor Científico: Aumenta a confiança preditiva na validação de alvos ao reduzir a ambiguidade mecanicista por meio da visualização direta do tecido.
- Valor Operacional: Melhora a padronização e reprodutibilidade por meio de protocolos padronizados de dosagem de contraste e manuseio de sondas.
- Valor Estratégico: Aprimora a tomada de decisões de avanço ou interrupção ao fornecer biomarcadores precoces baseados em imagem da malignidade da lesão.
- Impacto no Portfólio: Apoia a priorização ajustada ao risco ao permitir o monitoramento não invasivo da resposta terapêutica em modelos pré-clínicos.
Considerações de Implementação
- Requer experiência em urologia endoscópica e técnicas de imagem confocal para a navegação da sonda e interpretação das imagens.
- Depende de unidades de varredura a laser e sondas fibroópticas compatíveis com diâmetro apropriado para acesso ao trato urinário.
- Necessita padronização na administração do agente de contraste (intravesical ou intravenosa) e protocolos de lavagem para minimizar a fluorescência de fundo.
- Envolve considerações de adaptação quanto à deflexão da sonda e manutenção do contato em regiões anatomicamente complexas do trato urinário.
- Limitado pela necessidade de contato direto com o tecido, o que pode restringir o uso em mucosa inflamada ou frágil sem ajustes no procedimento.
