Name: Microinjeção insulina hipocampal e Em vivo Microdiálise Durante um teste de memória espacial (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-01-11T17:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Aprenda microinjeção hipocampal e microdiálise in vivo para medir metabolismo durante testes de memória espacial em animais conscientes. Este método permite analisar mudanças neuroquímicas em tempo real.

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Este trabalho foi financiado pelo NIH / NIDDK (DK077106 para ECM).

<ol><li>McNay, E. C., Fries, T. M., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreases+in+rat+extracellular+hippocampal+glucose+concentration+associated+with+cognitive+demand+during+a+spatial+task%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Decreases in rat extracellular hippocampal glucose concentration associated with cognitive demand during a spatial task.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 97 (6), 2881(2000).</li>
<li>McNay, E. C., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+differences+in+hippocampal+extracellular+fluid+glucose+concentration+during+behavioral+testing+and+following+systemic+glucose+administration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol.+A.+Biol.+Sci.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-related differences in hippocampal extracellular fluid glucose concentration during behavioral testing and following systemic glucose administration.</a> J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 56 (2), 66(2001).</li>
<li>McNay, E. C., McCarty, R. C., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluctuations+in+brain+glucose+concentration+during+behavioral+testing%3A+dissociations+between+brain+areas+and+between+brain+and+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Learn.+Mem%22%5BJournal%5D)">Fluctuations in brain glucose concentration during behavioral testing: dissociations between brain areas and between brain and blood.</a> Neurobiol. Learn. Mem. 75 (3), 325(2001).</li>
<li>McNay, E. C., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+glucose+concentrations+in+the+rat+hippocampus+measured+by+zero-net-flux%3A+effects+of+microdialysis+flow+rate%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Extracellular glucose concentrations in the rat hippocampus measured by zero-net-flux: effects of microdialysis flow rate.</a> 72 (2), 785(1999).</li>
<li>McNay, E. C., Sherwin, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+recurrent+hypoglycemia+on+spatial+cognition+and+cognitive+metabolism+in+normal+and+diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Effect of recurrent hypoglycemia on spatial cognition and cognitive metabolism in normal and diabetic rats.</a> Diabetes. 53 (2), 418(2004).</li>
<li>McNay, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+memory+processes+are+modulated+by+insulin+and+high-fat-induced+insulin+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Learning+and+Memory%22%5BJournal%5D)">Hippocampal memory processes are modulated by insulin and high-fat-induced insulin resistance.</a> Neurobiology of Learning and Memory. 93 (4), 546(2010).</li>
<li>McNay, E. C., McCarty, R. C., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluctuations+in+brain+glucose+concentration+during+behavioral+testing%3A+dissociations+between+brain+areas+and+between+brain+and+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Learning+%26+Memory%22%5BJournal%5D)">Fluctuations in brain glucose concentration during behavioral testing: dissociations between brain areas and between brain and blood.</a> Neurobiology of Learning & Memory. 75 (3), 325(2001).</li>
<li>McNay, E. C., Williamson, A., McCrimmon, R. J., Sherwin, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+and+neural+hippocampal+effects+of+long-term+moderate+recurrent+hypoglycemia%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Cognitive and neural hippocampal effects of long-term moderate recurrent hypoglycemia.</a> Diabetes. 55 (4), 1088(2006).</li>
<li>McNay, E. C., Sherwin, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+artificial+cerebro-spinal+fluid+%28aCSF%29+to+artificial+extracellular+fluid+%28aECF%29%3A+microdialysis+perfusate+composition+effects+on+in+vivo+brain+ECF+glucose+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">From artificial cerebro-spinal fluid (aCSF) to artificial extracellular fluid (aECF): microdialysis perfusate composition effects on in vivo brain ECF glucose measurements.</a> Journal of Neuroscience Methods. 132 (1), 35(2004).</li>
<li>McNay, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+memory+processes+are+modulated+by+insulin+and+high-fat-induced+insulin+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Learning+and+Memory%22%5BJournal%5D)">Hippocampal memory processes are modulated by insulin and high-fat-induced insulin resistance.</a> Neurobiology of Learning and Memory. 93 (4), 546(2010).</li>
<li>Benveniste, H., Drejer, J., Schousboe, A., Diemer, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+cerebral+glucose+phosphorylation+and+blood+flow+after+insertion+of+a+microdialysis+fiber+through+the+dorsal+hippocampus+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurochemistry%22%5BJournal%5D)">Regional cerebral glucose phosphorylation and blood flow after insertion of a microdialysis fiber through the dorsal hippocampus in the rat.</a> Journal of Neurochemistry. 49 (3), 729(1987).</li>
<li>Benveniste, H., Diemer, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+reactions+to+implantation+of+a+microdialysis+tube+in+the+rat+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Cellular reactions to implantation of a microdialysis tube in the rat hippocampus.</a> Acta Neuropathologica. 74 (3), 234(1987).</li>
<li>McNay, E. C., Fries, T. M., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreases+in+rat+extracellular+hippocampal+glucose+concentration+associated+with+cognitive+demand+during+a+spatial+task%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Decreases in rat extracellular hippocampal glucose concentration associated with cognitive demand during a spatial task.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 97 (6), 2881(2000).</li>
<li>McNay, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+memory+processes+are+modulated+by+insulin+and+high-fat-induced+insulin+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol.+Learn+Mem%22%5BJournal%5D)">Hippocampal memory processes are modulated by insulin and high-fat-induced insulin resistance.</a> Neurobiol. Learn Mem. 93 (4), 546(2010).</li>
<li>Lonnroth, P., Jansson, P. -A., Smith, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microdialysis+method+allowing+characterization+of+intercellular+water+space+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">A microdialysis method allowing characterization of intercellular water space in humans.</a> American Journal of Physiology. 1987, E228(1987).</li>
<li>McNay, E. C., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+glucose+concentrations+in+the+rat+hippocampus+measured+by+zero-net-flux%3A+effects+of+microdialysis+flow+rate%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Extracellular glucose concentrations in the rat hippocampus measured by zero-net-flux: effects of microdialysis flow rate.</a> 72 (2), 785(1999).</li>
<li>Lalonde, R. obert <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neurobiological+basis+of+spontaneous+alternation%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+%26+Biobehavioral+Reviews%22%5BJournal%5D)">The neurobiological basis of spontaneous alternation.</a> Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 26 (1), 91(2002).</li>
<li>Richman, C., Dember, W., Kim, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+alternation+behavior+in+animals%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Psychology%22%5BJournal%5D)">Spontaneous alternation behavior in animals: A review.</a> Current Psychology. 5 (4), 358(1986).</li>
<li>McNay, E. C., Canal, C. E., Sherwin, R. S., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+memory+with+septal+injections+of+morphine+and+glucose%3A+effects+on+extracellular+glucose+levels+in+the+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Modulation of memory with septal injections of morphine and glucose: effects on extracellular glucose levels in the hippocampus.</a> Physiol. Behav. 87 (2), 298(2006).</li>
<li>McNay, E. C., Gold, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+modulation+across+neural+systems%3A+intra-amygdala+glucose+reverses+deficits+caused+by+intraseptal+morphine+on+a+spatial+task+but+not+on+an+aversive+task%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Memory modulation across neural systems: intra-amygdala glucose reverses deficits caused by intraseptal morphine on a spatial task but not on an aversive task.</a> Journal of Neuroscience. 18 (10), 3853(1998).</li>
<li>Rex, A., Bert, B., Fink, H., Voigt, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulus-dependent+changes+of+extracellular+glucose+in+the+rat+hippocampus+determined+by+in+vivo+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Behav%22%5BJournal%5D)">Stimulus-dependent changes of extracellular glucose in the rat hippocampus determined by in vivo microdialysis.</a> Physiol. Behav. 98 (4), 467(2009).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Todas as soluções utilizadas no microdiálise deve ser filtrada antes da utilização, utilizando um filtro de 0,2 | iM. Após a inserção da sonda na cânula guia, observar para confirmar que o fluxo é livre e coleta de amostra está ocorrendo. Se o fluxo pára após a inserção, a causa mais provável é a lesão da membrana causada por sonda cuidados insuficientes na inserção, e uma sonda de fresco tem de ser substituído. Como observado acima, uma vantagem chave para esses métodos é a falta de confund...

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> A maioria dos reagentes são de qualidade padrão de laboratório e podem ser obtidos a partir de um fornecedor de escolha. Do mesmo modo, o equipamento tal como bombas de seringa e os tubos podem ser usados ​​a partir de qualquer um dos vários fabricantes. Itens específicos usados ​​aqui para que os detalhes são importantes incluem: </td></tr><tr><td> CMA 12 sondas de microdiálise </td><td> CMA microdiálise / </td><td> CMA-12-XXX </td><td> Estes estão disponíveis em vários comprimentos de membrana e cortes, indicados por códigos específicos no &#39;XXX. </td></tr><tr><td> Insulina humana (Humulin) </td><td> Eli Lilly </td><td> N / a </td><td></td></tr><tr><td> Giratória líquido </td><td> Instech </td><td> 375/D/22QM </td><td> Isto tem o torque rotativo específico muito baixo e o volume interno, bem como um nonrearevestimento de quartzo ctive. </td></tr></tbody></table>

microinjeção insulina hipocampal e<em&gt; em vivo</em&gt; microdiálise durante um teste de memória espacial

Hippocampal Insulin Microinjection and In vivo Microdialysis During Spatial Memory Testing

O metabolismo da glicose é um marcador útil para a actividade neural local, formando a base de métodos, tais como a imagiologia de ressonância 2-desoxiglicose e magnética funcional. No entanto, o uso de tais métodos em modelos animais e, portanto, requer anestesia ambos altera o estado do cérebro e impede medidas comportamentais. Um método alternativo é a utilização de microdiálise in vivo de tomar a medição contínua da concentração do fluido extracelular do cérebro de glucose, lactato, e afins metabolitos em animais acordados, sem restrições. Esta técnica é especialmente útil quando combinado com as tarefas destinadas a confiar em regiões específicas do cérebro e / ou manipulação farmacológica aguda, por exemplo, as medições do hipocampo durante uma tarefa espacial da memória de trabalho (alternação espontânea) mostram uma queda na glucose extracelular e aumento do lactato que são sugestivo de 1,2 glicólise aumentada, e administração de insulina intrahippocampal tanto melhora a memória e aumenta glicol hipocampoYsis 3. Substâncias como a insulina pode ser entregue ao hipocampo através da sonda de microdiálise mesmo utilizado para medir metabolitos. O uso de alternação espontânea, como uma medida da função do hipocampo foi concebido para evitar qualquer confundir motivadores de stress (por exemplo, choque nas patas), de retenção, ou recompensas (por exemplo, comida), todos os quais podem alterar o desempenho de tarefas e metabolismo, o que proporciona também uma tarefa medida da atividade motora que permite o controle de efeitos não específicos de tratamento. Combinados, esses métodos permitem a medição direta das variáveis ​​neuroquímicos e metabólicos que regulam o comportamento.

Ratos deve se recuperar rapidamente de cirurgia e estar alerta, móveis e ativo dentro de 30 minutos após o término da anestesia. O impacto da tampa da cânula deve ser mínima, se a cirurgia for realizada de forma limpa e cimento dental mínima é utilizada. Se qualquer sinal de infecção é observado durante o acompanhamento pós-operatório, ou o rato é de qualquer forma a mostrar sinais de desconforto ou constrangimento, rescindir imediatamente o experimento, o que deve ser extremamente raro. Durante a manipulação, antes do ...

Modulação da hippocampally dependente de memória espacial de trabalho por microinjeção intrahippocampal direta, acompanhado e seguido por<em&gt; In vivo</em&gt; Microdiálise para metabólitos em conscientes, animais se comportando.

Microinjeção insulina hipocampal e<em&gt; Em vivo</em&gt; Microdiálise Durante um teste de memória espacial

O metabolismo da glicose é um marcador útil da atividade neural local, constituindo a base de métodos como a 2-desoxiglicose e a ressonância magnética funcional...

O objetivo geral deste procedimento é medir o metabolismo do hipocampo durante testes comportamentais. Isso é realizado preparando cirurgicamente um animal bem manipulado com uma cânula-guia para microdiálise. No dia do teste, uma sonda de microdiálise é inserida na cânula e o fluxo PERFUSE eight é confirmado.Em seguida, permite-se que a sonda equilibre enquanto o animal permanece em uma câmara de controle. Por fim, métodos analíticos apropriados, por exemplo, uma reação de glicose oxidase, NADP, N-A-D-P-H e análise fluorométrica. Se a medição da glicose for utilizada para demonstrar o nível de metabolismo e/ou liberação neuroquímica ao longo do período de teste, um dos aspectos mais difíceis dessa técnica é o cuidado necessário no manuseio dos tubos de microdiálise e também o fato de os animais frequentemente roerem ou embaraçarem os tubos caso não se tome cuidado.Então, a primeira vez que utilizei microdiálise hipocampal durante testes comportamentais foi durante meu trabalho de pós-graduação, e queríamos verificar se os modelos existentes sobre o fornecimento de glicose eram, de fato, compatíveis com os dados psicológicos conhecidos sobre a melhoria da memória pela glicose. Essa metodologia nos permitiu demonstrar que, na realidade, os modelos existentes de glicose aplicados ao cérebro estavam completamente errados.Após seguir os procedimentos cirúrgicos padrão, prepare o animal, exponha o crânio e faça furos para a colocação da cânula. Insira uma cânula nas coordenadas predeterminadas e, em seguida, abaixe-a lentamente até a profundidade alvo. Uma vez corretamente posicionada, fixe a cânula no lugar com cimento dental.Utilize um fio cirúrgico estéril para fechar a ferida, se necessário. Por fim, utiliza-se um estilo para manter a perviedade da cânula. Em seguida, prepare o PERFUSE oito para ser usado na microdiálise.Deve-se observar que a composição exata do fluido é essencial para resultados ideais. No dia do teste, a albumina sérica bovina BSA deve ser adicionada e completamente dissolvida. Após o preparo, o PERFUSE eight deve ser filtrado através de um filtro de 0,2 mícron.Em seguida, prepare o tratamento que será administrado ao cérebro, se houver, utilizando uma alíquota do ECF-A preparado. Aqui, a insulina é preparada para entrega no hipocampo. Uma sonda de microdiálise nova e sua linha devem ser preparadas no dia anterior ao teste.Crie duas linhas separadas para entrada e saída. Use tubo PE 50 para conectar duas peças de tubo FEP com um metro de comprimento e certifique-se de que haja um espaço morto mínimo entre as linhas. Os tubos devem ser cortados conforme mostrado, criando extremidades inclinadas para facilitar a inserção nos conectores PE 50.Conecte a tubulação de entrada a uma seringa Hamilton de um mililitro cheia com água desionizada estéril filtrada e fixe a sonda na outra extremidade, permitindo que o animal se mova livremente durante as medições. Conecte as linhas de entrada e saída a um comutador de dois canais. Em seguida, conecte a tubulação de saída à bomba e execute-a a 1,5 microlitros por minuto até observar água desionizada saindo pelo tubo de saída na sonda.Desligue a bomba e conecte a outra linha entre o tubo de saída e um tubo de coleta de amostra. Passe cinco mililitros através do tubo e coloque a sonda em um frasco contendo água desionizada estéril durante a noite, garantindo que a ponta da sonda permaneça sempre úmida. 24 horas antes do teste, prepare o sujeito de teste removendo o estilo falso e inserindo uma sonda de microdiálise que é usada exclusivamente para essa finalidade.Durante 10 minutos após, substitua o estilo fictício e coloque o rato de volta em sua gaiola. Alternativamente, use uma sonda nova nesta etapa e deixe-a no lugar sem remoção até realizar as medições. No dia seguinte.No dia da microdiálise, preencha a seringa Hamilton e o frasco de cintilação com A ECF filtrado e deixe a bomba equilibrar por uma hora. Se necessário, preencha uma segunda seringa Hamilton com o tratamento preparado e coloque-a na bomba de seringa. A chave para o sucesso neste procedimento é permanecer calmo e manipular o animal de forma muito cuidadosa.Portanto, mantenha-se calmo, mova-se lentamente e com precisão e, acima de tudo, pratique. Quando a equilibração estiver completa, remova o estilote simulado e insira suavemente a sonda de microdiálise equilibrada no cérebro do rato através da cânula. Coloque o rato em uma caixa de plástico transparente que contenha um pouco da cama usada na sua gaiola de origem.Certifique-se de contrabalançar o tubo. Prenda um tubo de microcentrífuga de 1,6 mililitro cheio de água ao tubo do lado de fora da gaiola de forma que a gravidade mantenha as linhas de microdiálise sem dobrar, mas sem ficar esticado. Deixe a sonda e o rato se equilibrarem por duas horas.No início deste período, confirme que o fluxo do Perfuse oito está desobstruído. Para isso, colete o efluente do PERFUSE oito durante um período definido e pese a amostra para confirmar que o volume esperado está saindo do sistema antes de coletar as amostras. Certifique-se de que a correlação entre a diálise da amostra e a coleta seja calculada com precisão.Aqui temos um volume de 30 microlitros entre a sonda e o ponto de coleta, a uma taxa de 1,5 microlitro por minuto. Há um atraso de 20 minutos entre a saída da amostra do cérebro e sua coleta. Após o período de equilíbrio, colete pelo menos três amostras enquanto o rato está em repouso na câmara de alojamento.Para estabelecer uma linha de base estável de medições antes dos testes comportamentais, planeje cuidadosamente o cronograma de administração do seu tratamento ao cérebro. Assim, nesta configuração, em que temos um volume de 30 microlitros entre a ponta da seringa e a sonda que entra no cérebro do animal, trocamos a seringa do tratamento pela solução de tratamento profusa oito 20 minutos antes de o momento em que desejamos que o tratamento chegue ao hipocampo. Para trocar as seringas.Basta desconectar a linha de entrada da seringa de controle do PERFUSE eight e conectar rapidamente à seringa de tratamento do PERFUSE eight. Isso deve levar não mais do que cinco segundos para evitar interrupção no fluxo do PERFUSE eight. Tenha cuidado para não introduzir bolhas de ar, que podem reduzir a eficiência no período apropriado.Após a administração do tratamento, mova suavemente o rato para o aparelho escolhido para testes comportamentais. Aqui, a alternância espontânea é medida em um labirinto em forma de cruz. Permita que o animal explore livremente o labirinto por 20 minutos.Registre a sequência e o cronograma dos braços de áries, utilizando uma gravação em vídeo ou manualmente, para coletar amostras. Durante este período, transfira o tubo de saída para um novo tubo de coleta. A cada cinco minutos, segure o tubo de modo que ele se mova livremente.Não deve restringir o movimento da rata nem se mover à frente do animal e distraí-lo; permaneça imóvel para que seus movimentos não afetem o comportamento da rata. Após o teste, retire cuidadosamente a rata do labirinto e devolva-a à câmara de controle. Continue a coleta de amostras de microdiálise por pelo menos quatro amostras para cobrir o período de recuperação após a realização da tarefa.Após coletar as amostras desejadas, remova suavemente a sonda da cabeça do animal e coloque-a em um frasco de armazenamento. Devolva o animal à sua gaiola de origem e observe atentamente qualquer alteração na saúde ou no comportamento após o experimento. Por fim, lave o tubo trocando para uma seringa contendo uma solução de catho para prevenir o crescimento de micróbios.Este exemplo mostra uma diminuição da glicose no LEC hipocampal associada a uma tarefa. A caixa cinza representa o tempo que o animal passou no labirinto. A linha roxa mostra a glicose hipocampal em animais sem teste no labirinto, enquanto a linha vermelha representa animais realizando a tarefa de alternância espontânea do antebraço.A linha laranja mostra as medições em animais realizando a versão mais fácil desta tarefa, com três braços. As alterações no hipocampo, glicose e lactato após a administração de insulina são observadas aqui. Observe que essas alterações são vistas sem qualquer teste comportamental e, portanto, refletem o impacto da insulina isoladamente sob condições basais.Ao realizar este procedimento, é realmente importante permanecer calmo. Os ratos podem perceber o estresse do experimentador e ficarão agitados, o que pode dificultar muito o procedimento e provavelmente confundir os seus resultados. Esta combinação de técnicas permitiu a investigação neuroquímica precisa de processos comportamentais.Técnicas semelhantes são agora também utilizadas em pacientes humanos. Por exemplo, pacientes com epilepsia que possuem eletrodos implantados para localizar o foco da crise podem também ter cânulas de microdiálise implantadas para permitir medições metabólicas.

hippocampal-insulin-microinjection-vivo-microdialysis-during-spatial

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

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