Name: Teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e Monitorado por cateterismo cardíaco em ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-10T14:00:00.000+00:00
Duration: 15 min 45 s
Description: Aprenda a realizar teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e monitorado por cateterismo em camundongos. Este método revela doenças cardíacas subclínicas em modelos obesos induzidos por dieta rica em gordura.

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Agradecemos ao Dr. Hélio Salgado, Renata Lataro e Mauro de Oliveira, da Escola de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo e Ben Dr. Janssen, Instituto de Pesquisa Cardiovascular de Maastricht, Universidade de Maastricht, por generosa assistência durante o processo de configuração. Este trabalho foi financiado por subvenções Fondecyt N ° 11090114 para SDC

Protocolo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Faculdade de Medicina Clínica Alemã-Universidade del Desarrollo. I. Preparação infusão de dobutamina <ol><li> Dissolvem-se 10 mg de dobutamina, em 20 ml de água destilada estéril, com o fim de se obter uma solução stock de 500 ug / ml de dobutamina. Alíquota e armazenar a -20 ° C. Esta solução pode ser utilizada, pelo menos, durante 3 meses. </li><li> Descongelar uma alíquota da solução de reserva de dobutamina, à temperatura ambiente. </li><li> Diluir solução-mãe de dobutamina em NaCl estéril 0,9%, a fim de obter a solução de trabalho de dobutamina, cuja concentração é calculada utilizando a fórmula: dobutamina (ug / ml) = peso corporal x 0,2. </li><li> Encha uma seringa 1 ml 29Gx1 / 2 &quot;com solução de trabalho dobutamina. </li><li> Inserir a agulha da seringa para um tubo de 20 centímetros PE-10. </li><li> Ajuste a seringa na bomba de infusão, seguindo as instruções do fabricante. </li><li> Defina-se a infusão de rampa em uma etapa-A-passo com o formato de um aumento de 10 ul / min para cada etapa, de 6 passos. </li></ol> II. Preparando sensor de pressão <ol><li> Para minimizar a variação do sinal, o sensor de pressão submergir em água estéril a 37 ° C durante pelo menos 15 min. Não molhe o cateter mais de 0,5 cm de profundidade, de modo a evitar que a pressão hidrostática atinge o sensor de pressão. </li><li> Electronicamente calibrar o sensor de pressão a 25 e 100 mmHg. Eléctrico de entrada (Volt) é convertido em sinal de pressão (mmHg). </li><li> Definir a taxa de amostragem de 2 k / s e utilizar o filtro passa baixo com um corte de 100 Hz. Definir o sinal de pressão para zero mmHg. </li><li> Marcar o cateter 15 mm da ponta. Distante para alcançar o coração a partir do ponto de introdução foi estimada por ecocardiograma, detectando a presença do cateter no interior do ventrículo esquerdo. </li></ol> III. Preparando Rato para cateterismo <ol><li> Peso C57BL / 6, machos, 30-32 semanas de idade. </li><li> Injectar por via intraperitoneal de cetamina 60 mg / kg e 4 mg / kg de xilazina 1. Nota: Outros anestésicos podem ser utilizados, por exemplo: 350-450 ug / kg avertina, 50 ug / kg de pentobarbital, ou 1,5-2% 2-3 isoflurano. </li><li> Raspar o pescoço com um barbeador elétrico. </li><li> Posicione o mouse anestesiado em decúbito dorsal em uma placa de aquecimento aquecido isotérmica. Fixe seus membros com fita de papel. </li><li> Realizar uma pitada de igual para confirmar sedação completa. </li><li> Insira com cuidado a sonda retal para monitorar a temperatura do corpo. Usando sonda vaselinized é recomendada. </li><li> Se a temperatura do corpo difere de 37 ° C ± 0,5 ° C, ajusta-lo através da placa de aquecimento. </li><li> Coloque focinho de rato perto do suprimento de oxigênio. </li><li> Coloque a região do pescoço do rato, ao microscópio estereoscópico. </li></ol> IV. Aquisição de Dados <ol><li> Na 7 LabChartPro software, selecione um canal para registro de pressão e um canal para a freqüência cardíaca (FC)registro. Para este último, selecione a opção &quot;Medidas cíclicos&quot; e medição de configuração como taxa. </li><li> Para o canal de pressão definir a faixa de escala: 0 a 150 mmHg. </li><li> Para HR canal definir a faixa de escala: 200-600 bpm. </li><li> Pressione a tecla START para iniciar o registro. </li><li> Inserir comentários indicando procedimentos realizados, por exemplo: administração de anestesia, o início da infusão de dobutamina, a concentração de dobutamina, respirando alterações. </li></ol> V. Cateterismo Cardíaco 4,5 <ol><li> Realizar uma pequena incisão no lado direito, perto da mandíbula. Com uma tesoura separar o tecido conjuntivo da pele-muscular. </li><li> Realizar uma dissecção longitudinal (1,5-2 cm), no lado direito da traqueia. Separou-se a gordura do tecido conjuntivo, músculo e com fórceps curvo, de modo a expor a artéria carótida direita perto da traqueia. </li><li> Coloque um expansor no lado animal direito para expor a artéria carótida. Pulsátilpressão gerada pelo coração facilita a identificação da artéria. A veia jugular, que é vermelho escuro, está à direita. </li><li> Separou-se a artéria a partir de tecidos adjacentes com fórceps curvo. O nervo vago, que se assemelha a uma linha branca, fica ao longo da artéria. </li><li> Corte um pedaço de 20 cm de fio 6/0 e seda &quot;double-lo&quot;. </li><li> Passe a linha &quot;casal&quot; sob a artéria da esquerda para a direita. Cortar o fio, a fim de obter extremidades separadas. </li><li> Passar por um terceiro segmento (10 cm) abaixo da artéria. </li><li> Dê um nó apertado no fio posicionado perto da cabeça, e um solto no segmento mais distal. </li><li> Dê um nó frouxo na linha do meio, e fixar a extremidade direita da linha média para a almofada de aquecimento com uma fita de papel. </li><li> Mantenha artéria carótida úmido, largando estéril NaCl 0,9%. Secar o excesso de líquido com cotonetes. </li><li> Estique a linha inferior com uma pinça hemostática. </li><li> Fixar a posição da tesoura pinça hemostática por pavançando a pele do abdómen, que se estende a linha de cima, a fim de ocluir o fluxo de sangue. Verificar que o tecido conjuntivo em torno da artéria foi removido. A artéria deve estar cheio de sangue e privados de pulso. Prevenir tópicos de produzir uma força de binário sobre a artéria. </li><li> Fazer uma secção transversal nick perto da parte inferior da artéria com um Vannas micro-tesoura. Gotas de sangue será derramado. </li><li> Inserir o cateter na artéria carótida. Certifique-se de introduzir o sensor de pressão inteiro. Verificar que não há perda de sangue. </li><li> Suavemente ajustar o nó rosca do meio, a fim de segurar o cateter no lugar. Não comprimir em demasia, o sensor de pressão é muito frágil. </li><li> Solte a tesoura hemostat do abdômen animal. </li><li> Segurar o cateter com uma mão e empurra o fio do meio, a fim de evitar a perda de sangue. Nota: artéria deve estar cheio de sangue. </li><li> Iniciar sinais de pressão de gravação. </li><li> Quando o cateter está dentro, osinal de pressão arterial oscila 60-70 a 100-120 mmHg. A forma do sinal de pressão é mostrada na Figura 1.A. Nota: se estiver interessado em diante, neste ponto do tempo é possível registar a pressão arterial se sinal é estável durante pelo menos 5 min. Valores de FC foram obtidos a partir das formas de onda de pressão, considerando um intervalo de 30 segundos de sinal de gravação. É possível utilizar também um método de ECG para a medição directa da AR, de acordo com os objectivos de investigação. </li><li> Suavemente empurrar o cateter se observar uma alteração na forma do sinal de pressão (Figura 1 B). Uma vez que o cateter está no interior do ventrículo esquerdo, o sinal de pressão varia de 0 a 100-120 mmHg. Se for difícil para deslizar o cateter, belisque peito animal com dois dedos. </li><li> Continuamente controlar a taxa de respiração, a temperatura corporal, o nível de anestesia e sinal de pressão. Todos eles devem permanecer estáveis. </li></ol> VI. A infusão de dobutamina <ol><li&gt; Para a canulação da veia jugular certifique-se de descascar o tecido adiposo em torno da veia, a fim de evitar a sua perfuração. O procedimento cirúrgico para a oclusão da veia é semelhante ao procedimento descrito para a artéria carótida. </li><li> Introduzir um tubo de PE-10 para dentro da veia. Confirmar que o fluxo de sangue não é bloqueado se movendo para trás o êmbolo da seringa. </li><li> A infusão de dobutamina começa com 10 ul / min e terminar com 60 ul / min. Em cada passo, a velocidade de perfusão é mantida durante 2 min 6. </li><li> Após a última dose de dobutamina, sacrificar o animal com uma overdose de anestesia. </li></ol> VII. Análise de Dados <ol><li> Para análise dos dados, escolha a seção dos dados gravados de seu interesse. Certifique-se de considerar um intervalo de tempo em que o sinal de pressão é estável. </li><li> Selecione o ícone de configuração no módulo de Pressão Arterial. Indique o tipo selecionado de sinal de pressão. </li><li> Automaticamente os LabChartPro 7 software exibe média máxima,e os valores mínimos de RH, pressão arterial sistólica (P max), pressão diastólica (P min), pressão diastólica final (PDE), o desenvolvimento positivo pressão máxima (dP / dtmax) e desenvolvimento de pressão negativa máxima (dP / dt min). Além disso, os parâmetros cardíacos podem ser representadas no traçado da pressão. </li></ol>

<ol><li>Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+avertin+versus+xylazine-ketamine+anesthesia+on+cardiac+function+in+normal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).</li>
<li>Janssen, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+anesthetics+on+systemic+hemodynamics+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of anesthetics on systemic hemodynamics in mice.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, H1618-H1624 (2004).</li>
<li>Lorenz, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+evaluating+cardiovascular%2C+renal%2C+and+pulmonary+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Regul.+Integr.+Comp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A practical guide to evaluating cardiovascular, renal, and pulmonary function in mice.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, R1565-R1582 (2002).</li>
<li>Lorenz, J. N., Robbins, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+intraventricular+pressure+and+cardiac+performance+in+the+intact+closed-chest+anesthetized+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Measurement of intraventricular pressure and cardiac performance in the intact closed-chest anesthetized mouse.</a> Am. J. Physiol. 272, H1137-H1146 (1997).</li>
<li>Nemoto, S., DeFreitas, G., Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+catheterization+technique+in+a+closed-chest+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Contemp.+Top.+Lab+Anim.+Sci%22%5BJournal%5D)">Cardiac catheterization technique in a closed-chest murine model.</a> Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 42, 34-38 (2003).</li>
<li>Daniels, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+cardiac+functional+reserve+in+type+2+diabetic+db%2Fdb+mice+is+associated+with+metabolic%2C+but+not+structural%2C+remodelling%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol.+%28Oxf%29%22%5BJournal%5D)">Impaired cardiac functional reserve in type 2 diabetic db/db mice is associated with metabolic, but not structural, remodelling.</a> Acta Physiol. (Oxf). 200, 11-22 (2010).</li>
<li>De Celle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+structural+and+functional+consequences+of+cardiac+ischaemia-reperfusion+injury+in+vivo+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Long-term structural and functional consequences of cardiac ischaemia-reperfusion injury in vivo in mice.</a> Exp. Physiol. 89, 605-615 (2004).</li>
<li>Huntgeburth, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transforming+growth+factor+beta+oppositely+regulates+the+hypertrophic+and+contractile+response+to+beta-adrenergic+stimulation+in+the+heart%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Transforming growth factor beta oppositely regulates the hypertrophic and contractile response to beta-adrenergic stimulation in the heart.</a> PLoS One. 6, e26628(2011).</li>
<li>Reddy, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+function+in+young+and+old+Little+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gerontol.+A.+Biol.+Sci.+Med.+Sci%22%5BJournal%5D)">Cardiac function in young and old Little mice.</a> J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 62, 1319-1325 (2007).</li>
<li>Christoffersen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+lipid+accumulation+associated+with+diastolic+dysfunction+in+obese+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Cardiac lipid accumulation associated with diastolic dysfunction in obese mice.</a> Endocrinology. 144, 3483-3490 (2003).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e monitorado por cateterismo cardíaco é trabalhoso. No entanto, seguindo o protocolo aqui descrever e com um curto tempo de formação, é possível avaliar a seis parâmetros hemodinâmicos numa única experiência que duram aproximadamente uma hora. Os passos essenciais do protocolo aqui apresentado são as cânulas dos vasos sanguíneos. Em relação à canulação da artéria carótida, a incisão realizada deve ser profundo o suficiente para quebrar as tr...

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td> Reagentes </td></tr><tr><td> PE-50/10 </td><td> Warner Instruments </td><td> 64-0752 </td><td></td></tr><tr><td> Fio de seda 6/0 HR17 </td><td> Tagum </td><td> SN0713K </td><td></td></tr><tr><td> Xylacin 20 mg / ml </td><td> Centrovet Laboratorio </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cetamina 100 mg / ml </td><td> Arraste Pharma </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cloreto de sódio a 0,9% </td><td> Laboratório de Sanderson SA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Cloridrato de Dobutamina </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D0676 </td><td></td></tr><tr><td> Seringa de insulina U-100 29G x ½ &quot; </td><td> Terumo Medical Co. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fórceps Dissecando Estilo Micro centímetros 11,5 7 </td><td> LawtonMedizintechnik </td><td> 09-0959 </td><td></td></tr><tr><td> Graefe Fórceps DCV 0,7 milímetros 7 centímetros </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 62-0263 </td><td></td></tr><tr><td> Grampos Dieffenbach bulldog Str Cl 38 milímetros </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 60-010 </td><td></td></tr><tr><td> Vannas Tesoura 8 centímetros Str Fh </td><td> Lawton Medizintechnik </td><td> 63-1400 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Equipamento </td></tr><tr><td> SPR-671 Pressão cateter Mikro-Tip </td><td> Millar instrumentos </td><td> 840-6719 </td><td></td></tr><tr><td> PCU-2000 Unidade de Controle de Pressão </td><td> Millar instrumentos </td><td> 880-0129 </td><td></td></tr><tr><td> PowerLab 4/30 </td><td> ADInstruments Pty Ltd. </td><td> ML866 </td><td></td></tr><tr><td> LabChartPro 7 </td><td> ADInstruments Pty Ltd. </td><td> MLU260 / 7 </td><td></td></tr><tr><td> Bomba de infusão Legato200 </td><td> KdScientific </td><td> KD-KDS210P </td><td></td></tr><tr><td> TCAT-2LV controlador de temperatura e placa de aquecimento isotérmico </td><td> PhysiTemp instrumentos Inc. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Fornecimento de oxigênio medicinal </td><td> Indura </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Retal sonda </td><td> ADInstruments Pty Ltd. </td><td> MLT1404 </td><td></td></tr><tr><td> Microscópio trinocular, iluminação axial </td><td> LW Científico </td><td> Z2B-TRI-Etne, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF </td><td></td></tr></tbody></table>

teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e monitorado por cateterismo cardíaco em ratos

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

A dobutamina é um agonista β-adrenérgico com uma afinidade mais elevada para o receptor expresso no coração (β 1) do que para os receptores expressos nas artérias (β 2). Quando administrada sistemicamente, aumenta a procura cardíaca. Assim, dobutamina desmascara ritmo anormal ou áreas isquêmicas potencialmente em risco de infarto. A monitorização da função cardíaca durante um teste de esforço cardíaco pode ser realizada por qualquer ecocardiografia ou a cateterização cardíaca. A última é uma técnica invasiva, mas mais preciso e informativo que a primeira. Teste de esforço cardíaco induzido pela dobutamina e monitorizada por cateterismo realizado como descrito aqui permite, numa única experiência, a medição dos seguintes parâmetros hemodinâmicos: ritmo cardíaco (HR), pressão sistólica, pressão diastólica, a pressão diastólica final, a pressão positiva máxima desenvolvimento (dP / dtmax) e negativa da imprensa máximaure desenvolvimento (dP / dt min), em condições basais e sob doses crescentes de dobutamina. Como esperado, em camundongos normais foi observado um aumento relacionado com a dose de dobutamina em RH, dP / dt max e dP / dt min. Além disso, na maior dose testada (12 ng / g / min), a descompensação cardíaca de alto teor de gordura da dieta, os ratos obesos induzidos foi desmascarado.

O sinal de pressão arterial é definida pela pressão sistólica e diastólica. Quando o sensor de pressão está no interior do ventrículo esquerdo, a sua pressão (LVP) da forma de onda é caracterizada por uma queda para zero da pressão diastólica, e o aparecimento da contracção do átrio esquerdo, antes de contracção do ventrículo esquerdo (Figura 1). No estado inicial, cetamina-xilazina anestesiados ratos normais tiveram de RH de 280 ± 24, P máximo de 107 ± 8, P min de 5 ± 1, a EDP, de...

Nós descrever o protocolo para realizar um teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e monitorado por cateterismo cardíaco em ratos normais. Também vamos mostrar a sua aplicação para desmascarar doença cardíaca subclínica em alto teor de gordura da dieta induzida ratos obesos.

Teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e Monitorado por cateterismo cardíaco em ratos

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Teste de esforço cardíaco induzido por dobutamina e monitorado por cateterismo cardíaco em camundongos. Neste vídeo, apresentaremos uma descrição passo a passo de um teste de esforço cardíaco induzido por dobutamina e monitorado por cateterismo cardíaco realizado em camundongos normais. Também mostraremos sua aplicação para desmascarar doenças cardíacas subclínicas em camundongos obesos induzidos por dieta rica em gordura.O mouse anestesiado é colocado em uma placa de regulação térmica. O suprimento de oxigênio é administrado por meio de um tubo de plástico e a temperatura corporal é monitorada por meio de uma sonda retal para cateterismo cardíaco. Em um procedimento de tórax fechado, a artéria carótida é usada, pois o acesso através do sensor de pressão na ponta do cateter é fino o suficiente para entrar na artéria para medir a pressão arterial.O cateter é introduzido aproximadamente 10 milímetros. A forma de onda da pressão arterial é assim. Para medir a pressão ventricular, o cateter deve seguir a via retilínea do RE e passar pela válvula aórtica até a câmara ventricular.A forma da onda de pressão muda quando o sensor de pressão entra na câmara ventricular para administrar dobutamina. Um tubo de plástico é introduzido na veia jugular. O medicamento é infundido a partir de uma bomba programada que injeta um volume crescente da solução em um modo passo a passo.O teste de esforço cardíaco é baseado no efeito inotrópico e cronotrópico da dobutamina no coração durante a avaliação do desempenho cardíaco. A estimulação de duplo domínio é uma ferramenta poderosa para ama, uma doença clínica no coração que é normal. As condições são indetectáveis.Agora vamos mostrar-lhe como configurar o S e o instrumento, como realizar o cateterismo cardíaco e as infusões de domine e como coletar e analisar dados. Todos os protocolos animais apresentados foram aprovados pelo Comitê de Ética da FTA. Preparando a infusão de dobutamina, diluir a alíquota da solução estoque de dobutamina.500 microgramas por mililitro em 0,9% de cloreto de sódio. A concentração da solução de trabalho é calculada usando a fórmula microgramas de dobutamina por mililitro igual ao peso corporal vezes 0,2. Encha uma seringa de um mililitro de calibre 29 vezes meia polegada e insira um tubo P 20 de 10 centímetros na agulha da seringa.Ajuste a seringa na bomba de perfusão seguindo as instruções de fabrico. Configure a infusão de rampa em um formato passo a passo com um aumento de 10 microlitros por minuto para cada passo em nosso caso para seis etapas. Preparando o sensor de pressão.Mergulhe o sensor de pressão em água a 37 graus Celsius por pelo menos 15 minutos para minimizar o desvio do sinal. Não mergulhe o cateter a mais de 0.5 centímetros de profundidade para evitar que a pressão hidrostática afete o sensor de pressão eletronicamente. Calibre o sensor de pressão em 25 e 100 milímetros.A entrada elétrica de mercúrio é convertida em um sinal de pressão em milímetros de mercúrio. Defina a taxa de amostragem em 2000 por segundo e use o passa-baixo do filtro com um corte de 100 hertz. Defina o sinal de pressão para zero milímetros. Mercúrio.Marque o cateter a 15 milímetros da ponta. Recomenda-se saber o quão perto você está do ventrículo esquerdo ao introduzir o cateter. Preparando o camundongo para o cateterismo, o animal é anestesiado com 60 microgramas por grama de cetamina e quatro microgramas por grama de xilazina de acordo com o peso corporal.Em seguida, seu pescoço é raspado com um barbeador elétrico. Coloque o mouse anestesiado em decúbito dorsal em uma placa de aquecimento isotérmico aquecida. Prenda seus membros com fita adesiva.Usando vaselina para sonda. Recomenda-se a introdução. Insira suavemente uma sonda retal para monitorar a temperatura corporal.Faça uma pinça no dedo do pé para confirmar a sedação completa. Se a temperatura corporal diferir de 37 graus Celsius mais ou menos 0.5 graus Celsius, ajuste-a através da placa de aquecimento. Coloque o focinho do rato perto do suprimento de oxigênio.Ajuste o fluxo de oxigênio em três libras por polegada quadrada. Coloque a região do pescoço do rato sob o microscópio estéreo. Cateterismo cardíaco.Faça uma pequena incisão no lado direito perto da mandíbula com uma tesoura. Separe o tecido conjuntivo muscular da pele. Realize uma dissecção longitudinal no lado direito da traqueia.Separe o tecido conjuntivo, a gordura e o músculo com uma pinça curva para expor a artéria carótida direita perto da traqueia. Coloque um expansor no lado direito do animal para expor a artéria carótida. A veia jugular, que é vermelha escura, está à direita.A pressão pulsátil gerada pelo coração facilita a identificação da artéria. Separe a artéria do tecido adjacente com uma pinça curva. O nervo vago, que se assemelha a um fio branco, fica ao longo da artéria.Corte um pedaço de 20 centímetros de seis fios de seda OTT e dobre-o. Passe o fio duplo sob a artéria da esquerda para a direita. Corte a linha para obter pontas separadas.Passe um terceiro fio abaixo da artéria. Dê um nó apertado no fio posicionado perto da cabeça e um nó solto no tálus do fio mais distal. Nó no meio.Passe e fixe a extremidade direita da linha do meio na almofada de aquecimento com papel. Estique a fita adesiva inferior com uma braçadeira hemostática. Mantenha a artéria carótida úmida com gotas de cloreto de sódio.Seque o excesso de líquido com cotonetes. Fixe a posição da tesoura hemostática beliscando a pele do abdômen, esticando o fio superior para obstruir o fluxo sanguíneo. Verifique se o tecido conjuntivo ao redor da artéria foi removido.A artéria deve estar cheia de sangue e não deve haver pulso. Evite que os fios produzam uma força de torque na artéria. Faça um corte transversal próximo ao fundo da artéria com uma microtesoura vanosa.Insira o cateter na artéria carótida. Certifique-se de introduzir todo o sensor de pressão. Verifique se não há perda de sangue.Ajuste suavemente o nó da linha do meio para manter o cateter no lugar. Não aplique muita pressão. O sensor de pressão é muito frágil.Solte a tesoura hemostática do animal. Abdómen. Segure o cateter com a mão e empurre a linha do meio. Para evitar a perda de sangue, a artéria deve estar cheia de sangue.Comece a gravar sinais de pressão. Selecione um canal para rastreamento de pressão e o outro canal para registro de frequência cardíaca. Para a escada, selecione a opção medições cíclicas e configure a medição como taxa.Quando o cateter está dentro, o sinal da pressão arterial oscila de 70 a 110 milímetros. Mercúrio, se você estiver interessado neste momento, você pode economizar pressão arterial. Empurre suavemente o cateter para cima para observar uma mudança na forma do sinal de pressão.Uma vez que o cateter está dentro do ventrículo esquerdo, o sinal de pressão flutua de zero a 100 a 120 milímetros. Mercúrio, controle contínuo da frequência respiratória, temperatura corporal, nível de anestesia e sinal de pressão, todos eles devem permanecer estáveis. Infusão de dobutamina.Para a canulação da veia jugular, certifique-se de descascar o tecido adiposo ao redor da veia para evitar sua perfuração. O procedimento cirúrgico para oclusão venosa é semelhante ao procedimento mostrado para a artéria carótida. Introduza um tubo PE 10 na veia.Confirme se o fluxo sanguíneo não é bloqueado movendo-se para trás. O êmbolo da seringa com a bomba de infusão de dobutamina começa com 10 microlitros por minuto e termina com 60 microlitros por minuto. Em cada etapa, a taxa de infusão é mantida por dois minutos.Após a estimulação da dobutamina, o animal é sacrificado com uma overdose de anestesia. Análise de dados. Para análise de dados, escolha a seção dos dados registrados de seu interesse.Certifique-se de considerar um intervalo de tempo. Quando o sinal de pressão parecer estável, selecione o ícone de configuração no módulo de pressão arterial, indique o tipo selecionado de sinal de pressão automaticamente. O software exibe valores máximos e mínimos de parâmetros que descrevem características do traço de pressão selecionado.Além disso, os parâmetros cardíacos podem ser representados nos resultados representativos do traço de pressão. O sinal de pressão arterial é definido pela pressão sistólica e diastólica quando o sensor está dentro do ventrículo esquerdo. A forma de onda da pressão do ventrículo esquerdo é caracterizada por uma queda da pressão diastólica para zero e o aparecimento da contração do átrio esquerdo antes da contração do ventrículo.O desenvolvimento da pressão positiva máxima e o desenvolvimento da pressão negativa máxima são a primeira derivada nos pontos de inflexão da curva. Em camundongos normais, a pressão ventricular esquerda e a frequência cardíaca aumentam progressivamente durante o derrame de dobutamina. Como esperado, todos os parâmetros hemodinâmicos avaliados também aumentam de forma dependente da dose de dobutamina.Assim, o aumento da frequência cardíaca cronotrópica domine e os efeitos inotrópicos positivos são evidenciados em comparação com camundongos normais em camundongos obesos induzidos por dieta rica em gordura. Observamos um menor aumento da frequência cardíaca e do desenvolvimento de pressão positiva máxima quando o estresse cardíaco é induzido, sendo estatisticamente significativo na maior dose de dobutamina testada. Essas diferenças não foram observadas nas condições basais.Este teste de esforço cardíaco baseia-se no esforço inotrópico e cronotrópico da média WTA no coração. Cada confiabilidade depende de cada detalhe. Esperamos que este vídeo ajude você a configurar a técnica e obter um resultado confiante em pouco tempo.Se você tiver dúvidas, não hesite em nos contatar.

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Este artigo descreve a medição da função ventricular esquerda murina por meio da análise de pressão/volume em diferentes frequências cardíacas.

O cateterismo cardíaco em camundongos para medir o volume Pressão do relacionamento: Investigando o efeito Bowditch

O objetivo deste protocolo é avaliar de forma não invasiva alterações cardíacas estruturais e funcionais em um rato modelo da doença de coração criado por constrição aórtica transversal, usando B e M-mode ecocardiografia e cor / impulso de imagem onda Doppler.

Avaliação da morfológicas e funcionais cardíacas Mudanças no Modelo rato de Transverse aórtica constrição por ecocardiográfica de imagem

Este protocolo fornece uma descrição detalhada da abordagem ecocardiográfica para fenotipagem abrangente do coração e da função da válvula cardíaca em camundongos.

Abordagens ecocardiograma e protocolos de Comprehensive Caracterização fenotípica de doença cardíaca valvular em ratos

Durante a cirurgia de isquemia/reperfusão miocárdica murina, a colocação correta da ligadura ocluída é normalmente confirmada pela observação visível da palidez miocárdica. Aqui, um método de confirmação eletrocardiográfica de isquemia e reperfusão, para complementar a palidez miocárdica observada, é demonstrado em camundongos C57Bl/6 machos.

A confirmação da Isquemia Miocárdica e reperfusão em ratos usando Pad Superfície Eletrocardiografia

Infarto agudo do miocárdio em ratos induz alterações agudas mas incompleta caracterizadas em função de ventrículo esquerdo (LV). LV cateterismo em ratos submetidos à oclusão da artéria coronária serve como um método novo para uma avaliação em tempo real da função de LV.

Análise em tempo real de pressão-volume de infarto agudo do miocárdio em ratos

Descrevemos um método simples e reprodutível que pode induzir infarto do miocárdio ou lesão de isquemia-reperfusão miocárdica em camundongos por ligadura precisa da artéria coronária descendente anterior esquerda através de micromanipulação.

Indução de Infarto do Miocárdio e Lesão de Isquemia-Reperfusão Miocárdica em Camundongos

O eletrocardiograma (ECG) é a variável chave para o entendimento da eletrofisiologia cardíaca. O exercício físico tem efeitos benéficos, mas também pode ser prejudicial no contexto de doenças cardiovasculares. Este manuscrito fornece um método de registro de ECG em tempo real durante o exercício, que pode servir para investigar seus efeitos na eletrofisiologia cardíaca em camundongos.

Monitoramento do Eletrocardiograma em Tempo Real Durante o Treinamento em Esteira Rolante em Camundongos

O presente protocolo descreve uma visão paraesternal modificada do eixo longo para localização rápida e precisa da artéria descendente anterior. Essa abordagem foi projetada para ser mais simples e fácil de usar, facilitando o exame de mudanças dinâmicas na reserva de fluxo coronariano após isquemia-reperfusão miocárdica em camundongos.

Avaliações dinâmicas da reserva de fluxo coronariano após reperfusão de isquemia miocárdica em camundongos

Este protocolo descreve um método para induzir cardiomiopatia diabética por meio de uma combinação de dieta rica em gordura e injeção de estreptozotocina. Essa abordagem visa fornecer uma estrutura confiável para a investigação científica sobre a cardiomiopatia diabética e explorar possíveis caminhos para aplicações de tratamento clínico.

Modelagem e Avaliação do Modelo de Cardiomiopatia Diabética Murina

Isolamento das veias pulmonares utilizando um eficaz cryoballoon depende oclusão completa da veia pulmonar. O ponto de oclusão pode ser efectivamente prevista por análise directa da veia pulmonar análise da forma de onda da pressão durante a insuflação do balão, usando uma técnica simples e reprodutível.

Monitorização da Pressão direta é capaz de predizer oclusão da veia pulmonar durante ablação Cryoballoon

Aprenda a realizar teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e monitorado por cateterismo em camundongos. Este método revela doenças cardíacas subclínicas em modelos obesos induzidos por dieta rica em gordura.

Teste de estresse cardíaco induzido por dobutamina e Monitorado por cateterismo cardíaco em ratos

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