Name: 2-oclusão do vaso / hipotensão: um modelo de rato de isquemia cerebral (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: Aprenda a induzir isquemia cerebral global em ratos por oclusão carotídea bilateral e hipotensão sistêmica. Este modelo simula insulto cerebral pós-parada cardíaca com baixa mortalidade e danos previsíveis no hipocampo.

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<ol><li>Kirino, T., Sano, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+vulnerability+in+the+gerbil+hippocampus+following+transient+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Selective vulnerability in the gerbil hippocampus following transient ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 62, 201-208 (1984).</li>
<li>Smith, M. L., Auer, R. N., Siesjo, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+density+and+distribution+of+ischemic+brain+injury+in+the+rat+following+2-10+min+of+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">The density and distribution of ischemic brain injury in the rat following 2-10 min of forebrain ischemia.</a> Acta Neuropathologica. 64, 319-332 (1984).</li>
<li>Sanderson, T. H., Kumar, R., Sullivan, J. M., Krause, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+blocks+cytochrome+c+release+in+the+reperfused+brain+through+PI3-K+signaling+and+by+promoting+Bax%2FBcl-XL+binding%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurochemistry%22%5BJournal%5D)">Insulin blocks cytochrome c release in the reperfused brain through PI3-K signaling and by promoting Bax/Bcl-XL binding.</a> Journal of Neurochemistry. 106, 1248-1258 (2008).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+activates+the+PI3K-Akt+survival+pathway+in+vulnerable+neurons+following+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neurological+Research%22%5BJournal%5D)">Insulin activates the PI3K-Akt survival pathway in vulnerable neurons following global brain ischemia.</a> Neurological Research. 31, 947-958 (2009).</li>
<li>Sanderson, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PKR-like+endoplasmic+reticulum+kinase+%28PERK%29+activation+following+brain+ischemia+is+independent+of+unfolded+nascent+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">PKR-like endoplasmic reticulum kinase (PERK) activation following brain ischemia is independent of unfolded nascent proteins.</a> Neuroscience. 169, 1307-1314 (2010).</li>
<li>Hazelton, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperoxic+reperfusion+after+global+cerebral+ischemia+promotes+inflammation+and+long-term+hippocampal+neuronal+death%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Hyperoxic reperfusion after global cerebral ischemia promotes inflammation and long-term hippocampal neuronal death.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 753-762 (2010).</li>
<li>Lloyd-Jones, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics--2010+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics--2010 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 121, e46-e215 (2010).</li>
<li>Krause, G. S., Kumar, K., White, B. C., Aust, S. D., Wiegenstein, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia%2C+resuscitation%2C+and+reperfusion%3A+mechanisms+of+tissue+injury+and+prospects+for+protection%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia, resuscitation, and reperfusion: mechanisms of tissue injury and prospects for protection.</a> American Heart Journal. 111, 768-780 (1986).</li>
<li>Krause, G. S., White, B. C., Aust, S. D., Nayini, N. R., Kumar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+cell+death+following+ischemia+and+reperfusion%3A+a+proposed+biochemical+sequence%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Brain cell death following ischemia and reperfusion: a proposed biochemical sequence.</a> Critical Care Medicine. 16, 714-726 (1988).</li>
<li>Bloom, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+survival+after+successful+inhospital+cardiac+arrest+resuscitation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Long-term survival after successful inhospital cardiac arrest resuscitation.</a> American Heart Journal. 153, 831-836 (2007).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 84-91 (1989).</li>
<li>Uluc, K., Miranpuri, A., Kujoth, G. C., Akture, E., Baskaya, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Focal+cerebral+ischemia+model+by+endovascular+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat.</a> J. Vis. Exp. (48), e1978(2011).</li>
<li>Neumar, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calpain+mediates+eukaryotic+initiation+factor+4G+degradation+during+global+brain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Calpain mediates eukaryotic initiation factor 4G degradation during global brain ischemia.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 18, 876-881 (1998).</li>
<li>Paine, M. G., Che, D., Li, L., Neumar, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebellar+Purkinje+Cell+Neurodegeneration+After+Cardiac+Arrest%3A+Effect+of+Therapeutic+Hypothermia%5BTitle%5D)+AND+%22Resuscitation%22%5BJournal%5D)">Cerebellar Purkinje Cell Neurodegeneration After Cardiac Arrest: Effect of Therapeutic Hypothermia.</a> Resuscitation. , (2012).</li>
<li>Pulsinelli, W. A., Brierley, J. B., Plum, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+profile+of+neuronal+damage+in+a+model+of+transient+forebrain+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia.</a> Annals of Neurology. 11, 491-498 (1982).</li>
<li>Edinger, A. L., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Death+by+design%3A+apoptosis%2C+necrosis+and+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Death by design: apoptosis, necrosis and autophagy.</a> Current Opinion in Cell Biology. 16, 663-669 (2004).</li>
<li>Kirino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+neuronal+death+in+the+gerbil+hippocampus+following+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia.</a> Brain Research. 239, 57-69 (1982).</li>
<li>Yager, J. Y., Brucklacher, R. M., Vannucci, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+energy+metabolism+during+hypoxia-ischemia+and+early+recovery+in+immature+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Cerebral energy metabolism during hypoxia-ischemia and early recovery in immature rats.</a> The American Journal of Physiology. 262, 672-677 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., Fujimura, M., Morita-Fujimura, Y., Kawase, M., Chan, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+release+of+cytochrome+c+corresponds+to+the+selective+vulnerability+of+hippocampal+CA1+neurons+in+rats+after+transient+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial release of cytochrome c corresponds to the selective vulnerability of hippocampal CA1 neurons in rats after transient global cerebral ischemia.</a> J. Neurosci. 19, RC39(1999).</li>
<li>Nishino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiological+process+after+transient+ischemia+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Pathophysiological process after transient ischemia of the middle cerebral artery in the rat.</a> Brain Research Bulletin. 35, 51-56 (1994).</li>
<li>Ross, D. T., Ebner, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thalamic+retrograde+degeneration+following+cortical+injury%3A+an+excitotoxic+process%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Thalamic retrograde degeneration following cortical injury: an excitotoxic process.</a> Neuroscience. 35, 525-550 (1990).</li>
<li>Soriano, M. A., Ferrer, I., Rodriguez-Farre, E., Planas, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+and+c-Jun+in+the+thalamus+of+the+rat+following+cortical+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroreport%22%5BJournal%5D)">Apoptosis and c-Jun in the thalamus of the rat following cortical infarction.</a> Neuroreport. 7, 425-428 (1996).</li>
<li>Watanabe, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protein+synthesis+inhibitor+transiently+reduces+neuronal+death+in+the+thalamus+of+spontaneously+hypertensive+rats+following+cortical+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Protein synthesis inhibitor transiently reduces neuronal death in the thalamus of spontaneously hypertensive rats following cortical infarction.</a> Neuroscience Letters. 233, 25-28 (1997).</li>
<li>Wei, L., Ying, D. J., Cui, L., Langsdorf, J., Yu, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrosis%2C+apoptosis+and+hybrid+death+in+the+cortex+and+thalamus+after+barrel+cortex+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Necrosis, apoptosis and hybrid death in the cortex and thalamus after barrel cortex ischemia in rats.</a> Brain Research. 1022, 54-61 (2004).</li>
<li>Zong, W. X., Thompson, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrotic+death+as+a+cell+fate%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+%26+Development%22%5BJournal%5D)">Necrotic death as a cell fate.</a> Genes & Development. 20, 1-15 (2006).</li>
<li>Ito, U., Spatz, M., Walker, J. T., Klatzo, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+cerebral+ischemia+in+mongolian+gerbils.+I.+Light+microscopic+observations%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica%22%5BJournal%5D)">Experimental cerebral ischemia in mongolian gerbils. I. Light microscopic observations.</a> Acta Neuropathologica. 32, 209-223 (1975).</li>
<li>Saver, J. L., Albers, G. W., Dunn, B., Johnston, K. C., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stroke+Therapy+Academic+Industry+Roundtable+%28STAIR%29+recommendations+for+extended+window+acute+stroke+therapy+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">Stroke Therapy Academic Industry Roundtable (STAIR) recommendations for extended window acute stroke therapy trials.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 40, 2594-2600 (2009).</li>
<li>Busto, R., Dietrich, W. D., Globus, M. Y., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+brain+temperature+in+cerebral+ischemic+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">The importance of brain temperature in cerebral ischemic injury.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 20, 1113-1114 (1989).</li>
<li>Voll, C. L., Auer, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postischemic+seizures+and+necrotizing+ischemic+brain+damage%3A+neuroprotective+effect+of+postischemic+diazepam+and+insulin%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Postischemic seizures and necrotizing ischemic brain damage: neuroprotective effect of postischemic diazepam and insulin.</a> Neurology. 41, 423-428 (1991).</li>
<li>Yamaguchi, M., Calvert, J. W., Kusaka, G., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One-stage+anterior+approach+for+four-vessel+occlusion+in+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%3B+a+Journal+of+Cerebral+Circulation%22%5BJournal%5D)">One-stage anterior approach for four-vessel occlusion in rat.</a> Stroke; a Journal of Cerebral Circulation. 36, 2212-2214 (2005).</li>
<li>Gionet, T. X., Warner, D. S., Verhaegen, M., Thomas, J. D., Todd, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+intra-ischemic+blood+pressure+on+outcome+from+2-vessel+occlusion+forebrain+ischemia+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of intra-ischemic blood pressure on outcome from 2-vessel occlusion forebrain ischemia in the rat.</a> Brain Research. 586, 188-194 (1992).</li>
<li>Sugawara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypotension+severity+on+hippocampal+CA1+neurons+in+a+rat+global+ischemia+model%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of hypotension severity on hippocampal CA1 neurons in a rat global ischemia model.</a> Brain Research. 877, 281-287 (2000).</li>
</ol>

Os autores não têm conflitos de interesses financeiros.

O modelo descrito aqui produz um insulto isquémico no cérebro que pode ocorrer como resultado de paragem cardíaca e ressuscitação, proporcionando uma lesão similar à encontrada nos seres humanos. Este método para a produção de isquemia cerebral global é um de vários protocolos. Nós utilizamos esse protocolo mais importante para a sua comparativamente baixa taxa de mortalidade, uma rápida recuperação e reprodutibilidade dos resultados. O modelo de prisão / ressuscitação cardíaca é sem dúvida o modelo mais clinicamente re...

Dano cerebral em conseqüência de parada cardíaca e acidente vascular cerebral é a principal causa de morte e incapacidade a longo prazo. Enquanto ressuscitação cardiopulmonar para vítimas de parada cardíaca consegue restaurar a circulação espontânea em cerca de 70 mil pacientes por ano em os EUA 7,8 pelo menos 60% desses pacientes morrem posteriormente no hospital, como resultado de extensa lesão cerebral e apenas 3-10% dos pacientes reanimados pode retomar seus antigos estilos de vida 9,10. Claramente, a compreensão dos mecanismos que levam a danos cerebrais após isquemia cerebral global e planejamento de intervenções terapêuticas para minimizar o trauma neurológico é de importância crítica. A isquemia cerebral pode ser modelado utilizando vários métodos. Mais vulgarmente, a isquemia cerebral é produzida no roedor, ocluindo um grande vaso sanguíneo no cérebro, a artéria cerebral média, produzindo, assim, um acidente vascular cerebral isquémico focal 11,12. Embora clinicamente importante,isquemia cerebral focal não é um método preciso para estudar danos cerebrais produzidos pela prisão / reanimação cardíaca. Para modelar este paradigma clínico todo o cérebro deve ser feita isquêmica seguido de reintrodução do fluxo sanguíneo. Para imitar de perto esta apresentação clínica, os investigadores experimentalmente induzir parada cardíaca seguida de reanimação com CPR e desfibrilação 13,14. Este modelo é clinicamente relevante, os tempos de ressuscitação entanto imprevisíveis podem aumentar a variabilidade e análise dos dados pode tornar difícil de interpretar. Além disso, este modelo está associado a uma taxa de mortalidade elevada, aumentando ainda mais o número necessário para testar uma hipótese animal. Investigação da resposta a isquemia cerebral global e / ou reperfusão num insulto mais reprodutível, consistente e sobrevivência podem ser preferidos. Isquemia global pode ser induzida no cérebro enquanto preserva alguma circulação sanguínea sistémica. Isto reduz a mortalidade, enquanto permite Investigation dos mecanismos de danos nos tecidos no cérebro 2. Para produzir a isquemia global do cérebro, que é necessário para interromper ou limitar o fluxo grandemente em todos os quatro vasos que alimentam o cérebro, as artérias carótida interna e artérias vertebrais. Estas embarcações abastecer o cérebro com o fluxo de sangue através de uma estrutura vascular chamado Círculo de Willis, que faz um loop anastomose. Esta arquitectura permite que o cérebro vascular para manter a perfusão no caso de oclusão vascular proximal. Portanto, para induzir isquemia completo do cérebro, o fluxo de sangue através dos vasos contributivo deve ocorrer. A oclusão da artéria carótida interna pode ser realizada utilizando um pescoço ventral minimamente invasivo de corte para baixo e de aplicação de clipes aneurisma durante um período desejado. A interrupção do fluxo de sangue através das artérias vertebrais, pode ser difícil, uma vez que são encaixada no forame transversal da coluna vertebral. Investigadores têm abordado este por electrocauterizing as artérias vertebrais 24-48 h antes da carótidaoclusão e isquemia cerebral (modelo 4VO) 15. Em contraste com esta abordagem, Smith et ai. Desenvolveu um método de indução de isquemia cerebral global reduzindo a pressão arterial média (PAM) sistemicamente a 40 mmHg, para reduzir a perfusão através das artérias vertebrais, para um ponto onde o fluxo de sangue é perdido muito reduzida ou dois . Quando combinada com a oclusão da carótida, este método produz ao longo da isquemia do prosencéfalo, resultando num padrão de dano cerebral que imita o de sobreviventes de paragem cardíaca. Num outro aperfeiçoamento deste método, o modelo que aqui apresentamos requer regulação apertada MAP em 30 mmHg ± 1mHg durante toda a 8 minutos de isquemia. Encontramos esta alteração melhora a reprodutibilidade de dano cerebral induzido por este modelo, preservando a baixa taxa de mortalidade da técnica original desenhado por Smith et al. O fenótipo precisa da morte celular e da extensão total do dano tecidual causado pelao modelo apresentado aqui são diretamente dependentes da duração isquêmica 16. Após 8 minutos de isquemia, neurónios CA1 exibem retardada de morte celular, sugerindo que existe uma janela temporal para a intervenção terapêutica, durante a fase de reperfusão 15,17. No início da reperfusão, os neurónios rapidamente recuperar a função de morte celular e não é detectável 18 imediato. No entanto, este insulto provoca indução de cascatas de morte celular (apoptose) que culminam na liberação de proteínas apoptogénica de mitocôndrias, incluindo o citocromo c, entre 4-6 horas de reperfusão 3,19. Entre 6 e 24 horas de reperfusão, os neurônios CA1 do hipocampo se comprometeram a morte celular, eo programa de morte celular por apoptose é executado 19. Deve notar-se que o fenótipo de morte celular responsável pela lesão isquémica é altamente controversa. Estudos anteriores sugeriram que a necrose é a morte celular primário fenótipo 20,21, enquanto outros outros relatam apoptosis como o principal mecanismo 22,23. No total, as evidências atuais sugerem que as células morrem de um espectro de fenótipos de morte celular que variam de apoptose clássico à necrose. O modo específico de morte de células está dependente de muitos factores, com o grau de contribuição de cada fenótipo dependendo da gravidade da lesão, entre outros factores 24,25. Por 24 horas de reperfusão, as células morrem possuem núcleos picnóticos, citoplasma condensado com clara evidência de conteúdo celular agregados e perda de morfologia mitocondrial funcional. As células mortas são subdivididas, tragado por células do sistema imunológico, como os macrófagos e / ou micróglia e limpa da região CA1 do hipocampo. Por 4-7 dias de reperfusão, as células mortas são removidas, e tudo o que resta são as células inflamatórias e ativado células gliais 17,26. Portanto, 7 dias de reperfusão representa um momento ideal CA1 do hipocampo, onde a morte neuronal pode ser quantificado usando, manchas de células não-específicos simples eminclusive violeta Cresyl ou hemotoxilina-eosina e contou com base em critérios de inclusão morfológicas. As células remanescentes no final deste intervalo de reperfusão pode ser contado como células sobreviventes, proporcionando assim um índice de danos cerebrais. Se este modelo é para ser utilizado para testar intervenções terapêuticas, sugere-se que o projeto experimental seguir critérios Stair (Curso Terapia Indústria Acadêmico Roundtable) 27. Essas diretrizes devem ser seguidas na concepção e realização de um estudo, no entanto, não são discutidos aqui.

<table><tbody><tr><td colspan="4">Nome do Material</td></tr><tr><td>5-0 Sutura VICRYL, corte reverso </td><td>Bisturi Ethicon</td><td>J391H</td><td></td></tr><tr><td>, No.10</td><td>Swann-Morton</td><td>6601</td><td></td></tr><tr><td>Esponjas de Gaze</td><td>Fisher</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>18G x 1 &frac12; na agulha</td><td>BD</td><td>305201</td><td></td></tr><tr><td>23G x 1 na agulha</td><td>BD</td><td>305145</td><td></td></tr><tr><td>26 G x 3/8 pol agulha</td><td>BD</td><td>305110</td><td></td></tr><tr><td>18 G x 1 &#188; cateter</td><td>EXEL</td><td>26735</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 1 ml</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 10 ml</td><td>BD</td><td>309604</td><td></td></tr><tr><td>Seringa de 60 ml</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>Surgilube</td><td>Henry Schein</td><td>1152666,9</td><td></td></tr><tr><td>% Solução salina, plástico IV bolsa</td><td>Henry Schein</td><td>1537468</td><td></td></tr><tr><td>Sutura 3-0 Seda</td><td>Henry Schein</td><td>1007842</td><td></td></tr><tr><td>Pomada Oftálmica Puralube</td><td>Henry Schein</td><td>3390017</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Henry Schein</td><td>6903564</td><td></td></tr> Campo <tr><td>Toalha Estéril Tubo</td> de Polietileno <td>Moore Medical</td><td>14170</td><td></td></tr><tr><td>, 50</td><td>427411</td><td></td> <td>Intramédico</td></tr><tr><td>Torneira, 3 vias</td><td>Smiths medical</td><td>MX9311L</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Nome do medicamento</td></tr><tr><td>AERRANE (isoflurano)</td><td>Henry Schein</td><td>2091966</td><td></td></tr><tr><td>Mapap Liquid (Tylenol)</td><td>Major Pharmaceuticals</td><td>1556</td><td></td></tr><tr><td>Kedavet (cetamina)</td><td>Ketathesia Butney</td><td>NDC 50989-996-06</td><td></td></tr><tr><td>Butorphic (butorfanol)</td><td>Lloyd Labs</td><td>4881</td><td></td></tr><tr><td>Heparina</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>504011</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Nome Químico </td></tr><tr><td>Paraformaldeído prills</td><td>Elecron Microscopy Sci.</td><td>19202</td><td></td></tr><tr><td>2-metilbutano</td><td>Sigma</td><td>270342</td><td></td></tr><tr><td>acetato violeta Cresyl</td><td>Sigma</td><td>C5042</td><td></td></tr><tr><td>sacarose</td><td>Sigma</td><td>S9378</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Software</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

2-oclusão do vaso / hipotensão: um modelo de rato de isquemia cerebral

2-Vessel Occlusion/Hypotension: A Rat Model of Global Brain Ischemia

Parada cardíaca seguido de reposição muitas vezes resulta em danos cerebrais dramática causada por isquemia e reperfusão posterior do cérebro. Isquemia cerebral global produz dano para regiões específicas do cérebro revelaram estar altamente sensíveis à isquemia 1. Neurónios do hipocampo têm maior sensibilidade a insultos isquémicos em comparação a outras populações de células, e, especificamente, na região CA1 do hipocampo, é particularmente vulnerável a lesão de isquemia / reperfusão 2. O desenho das intervenções terapêuticas, ou estudo dos mecanismos envolvidos nos danos cerebrais, exige um modelo que produz danos similares aos do estado clínico e de uma forma reproduzível. Oclusão do vaso carótida bilateral com hipotensão (2VOH) é um modelo que produz isquemia do prosencéfalo reversível, emulando os eventos cerebrais que podem ocorrer durante a parada cardíaca e ressuscitação. Descrevemos aqui um modelo modificado de Smith et ai. (1984) 2, Como apresentado pela primeira vez em sua forma atual em Sanderson et al. (2008) 3, que gera lesão reprodutível para seletivamente regiões cerebrais vulneráveis ​​3-6. A confiabilidade deste modelo é ditada pelo controle preciso da pressão arterial sistêmica durante hipotensão aplicada, o tempo de isquemia, controle de temperatura perto, um regime de anestesia específico, e diligente cuidados pós-operatórios. Um insulto isquémico 8 minutos produz a morte celular dos neurónios CA1 do hipocampo, que progride ao longo de 6 a 24 horas de reperfusão, enquanto que as regiões do cérebro menos vulneráveis ​​são poupados. Esta morte celular progressiva é facilmente quantificada após 7-14 dias após reperfusão, com uma perda quase total de neurónios CA1 é evidente nesta altura. Em adição a este modelo de lesão cerebral, apresentamos um método para quantificação de dano CA1 usando um método simples, mas completa, a metodologia. Importante, a quantificação pode ser realizada utilizando um microscópio de câmara simples montado, umada livre ImageJ (NIH) plug-in de software, eliminando a necessidade de programas de software estereologia custo proibitivo e um palco motorizado microscópica para avaliação dos danos.

O 2VOH modelo de isquemia cerebral global / reperfusão provoca a morte neuronal na região CA1 do hipocampo. Figura 2 representa a lesão produzida por 8 min de isquemia cerebral global, processada 14 dias após a reperfusão. Figuras 2A e 2B comparar os hipocampos de engodo e cérebros pós-isquêmica, corados com violeta Cresyl. figura 2A mostra um hipocampo de um rato sham-operado que apresenta morfologia normal, incluindo um CA1 intacta. figura 2B<...

Oclusão carotídea bilateral juntamente com hipotensão sistêmica produz isquemia cerebral em ratos, resultando em danos ao hipocampo com gravidade reproduzível. Assuntos animais são prejudicados com padrões previsíveis de danos cerebrais, eles se recuperam expediente, e as taxas de mortalidade são comparativamente baixas.

Cardiac arrest followed by resuscitation often results in dramatic brain damage caused by ischemia and subsequent reperfusion of the brain. Global brain ...

O objetivo geral é induzir um episódio isquêmico transitório no cérebro para simular o insulto cerebral causado pela parada cardíaca e reanimação. Primeiro, a hipotensão sistêmica é induzida pela retirada de sangue da artéria femoral. Em seguida, as artérias carótidas são ocluídas para restringir o fluxo sanguíneo ao cérebro.O cérebro é mantido em estado isquêmico por oito minutos por meio do controle rigoroso da pressão sanguínea sistêmica. Por fim, os clipes são removidos e o sangue retirado é reintroduzido. Em última análise, os danos neuronais podem ser quantificados em diferentes momentos após a isquemia.A principal vantagem dessa técnica em relação a métodos existentes, como parada cardíaca e reanimação, é que o evento isquêmico cerebral pode ser simulado sem a mortalidade e comorbidades associadas à isquemia sistêmica. A demonstração visual dessa cirurgia permite enfatizar a importância de particularidades específicas do procedimento para garantir a reprodutibilidade. Comece confeccionando um cateter vascular. Para isso, corte um segmento de oito polegadas de tubo de polietileno 50 e insira uma agulha romba de calibre 23 em uma das extremidades.Fixe esta agulha em uma das po

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Research

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Medicine

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Indução cirúrgica de uma lesão cerebral isquêmico no rato é um modelo amplamente utilizado para a pesquisa acidente vascular cerebral. Aqui nós demonstram a indução de isquemia cerebral focal por oclusão da artéria cerebral média. Visualização do infarto resultantes de coloração histológica e ressonância magnética também é mostrada.

Modelo de isquemia focal cerebral por oclusão Suture Endovascular da artéria cerebral média no Rat

Este vídeo demonstra o procedimento de realização da oclusão permanente da artéria cerebral média distal, ou MCAO, com a artéria carótida comum, ou ligadura CCA, em ratos idosos para modelar o AVC isquêmico. Isso bloqueia o fluxo sanguíneo para o cérebro, levando à morte neuronal e gerando um modelo para estudar os mecanismos do AVC e possíveis tratamentos.

Induzindo isquemia via oclusão do cérebro médio e da artéria carótida comum em um modelo de rato

Fonte: Larpthaveesarp, A., et. al. Modelo transitório de oclusão da artéria cerebral média de acidente vascular cerebral neonatal em ratos P10. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o estabelecimento do modelo de oclusão da artéria cerebral média em um filhote de rato. A artéria carótida interna (ACI) é exposta e uma ligadura é fixada para restringir a inundação do sangue. Um ocluído é inserido através da ACI para atingir a Artéria Cerebral Média. O filhote é então autorizado a se recuperar...

Gerando uma oclusão da artéria cerebral média em um filhote de rato para induzir isquemia cerebral local

Nós descrevemos um método altamente reprodutível para a oclusão permanente de um roedor grande vaso sanguíneo cerebral. Esta técnica pode ser realizado com muito pouco dano periférica, a perda de sangue mínima, uma elevada taxa de sobrevivência a longo prazo, e o volume de enfarte consistente comensurável com a população de clínica humana.

Permanente oclusão vascular cerebral<em&gt; Via</em&gt; Dupla ligadura e transecção

Os modelos de AVC tromboembólico são ferramentas vitais para otimizar a terapia de recanalização. Aqui relatamos um modelo de AVC trombótico murino baseado em insulto hipóxico-isquêmico cerebral transitório (tHI), que desencadeia trombose e infarto e responde favoravelmente à fibrinólise mediada pelo ativador de plasminogênio tecidual (tPA) em uma janela terapêutica semelhante à de pacientes com AVC.

Um Modelo de acidente vascular cerebral trombótico Baseado em Transient isquemia-hipoxia cerebral

O objetivo geral deste procedimento é fornecer uma técnica altamente reprodutível para avaliação na vivo do rompimento da barreira hemato - encefálica em modelos do rato de acidente vascular cerebral isquêmico.

Uma avaliação In Vivo do rompimento da barreira hemato - encefálica em um modelo do rato de acidente vascular cerebral isquêmico

Para investigar a fisiopatologia do AVC, é criado um modelo do rato de isquémia-reperfusão cerebral. Nós distalmente ligate da artéria cerebral média direita e artéria carótida comum direita e restaurar o fluxo sanguíneo após 10 ou 40 min de isquemia.

Modelo de Mouse de dois vasos oclusão de isquémia-reperfusão Cerebral

O protocolo atual descreve um modelo de oclusão/reperfusão da artéria cerebral média em ratos que preserva a estrutura anatômica dos vasos cerebrais sem causar danos.

Um modelo de rato de oclusão/reperfusão da artéria cerebral média sem danificar a estrutura anatômica dos vasos cerebrais

Este protocolo descreve o processo de indução de um modelo de coma isquêmico cerebral usando um método modificado de oclusão de quatro vasos.

Modelo de Coma Isquêmico Cerebral Induzido por Oclusão Modificada de Quatro Vasos

Modelos in vivo de ratos são ferramentas indispensáveis para investigar os mecanismos patológicos e alvos terapêuticos do AVC isquêmico. Este trabalho descreverá a realização de coloração por imunofluorescência em fatias de cérebro infartadas após oclusão da artéria cerebral média (MCAO) em ratos.

Avaliação da sinalização de morte celular por imunofluorescência em um modelo de rato de AVC isquêmico

Aprenda a induzir isquemia cerebral global em ratos por oclusão carotídea bilateral e hipotensão sistêmica. Este modelo simula insulto cerebral pós-parada cardíaca com baixa mortalidade e danos previsíveis no hipocampo.

2-oclusão do vaso / hipotensão: um modelo de rato de isquemia cerebral

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