Name: Avaliação da função muscular do músculo extensor longo dos dedos Ex vivo E músculo tibial anterior Em situ Em Ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-02-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 36 s
Description: Aprenda a avaliar propriedades mecânicas de músculos de membros de camundongos, incluindo o extensor digitorum longus e o tibialis anterior, usando técnicas ex vivo e in situ para estudos de fisiologia muscular.

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Este trabalho foi financiado por subvenções dos Institutos Nacionais de Saúde (AR-49419, DD), Associação de Distrofia Muscular (DD), e treinamento NIH concessão T90DK70105 (CH).

1. Avaliação das propriedades contráteis e passiva da EDL vivo Muscle Ex As propriedades contráteis e passiva do músculo EDL são medidos ex vivo utilizando o Scientific Aurora in vitro sistema de teste muscular. Consulte a Tabela 1 para materiais e equipamentos. 1.1 Preparação Equipment <ol><li> Montar o banho de tecido de órgãos, assegurando o oxytube ao banho de tecidos da água da camisa. Anexar o banho montadas para o aparelho de montagem de músculo. Conecte a linha de gás para o oxytube. Fixar as linhas de circulação de água para o banho de tecido de jaqueta de água e colocar a válvula de agulha no interior do banho de drenagem. </li><li> Ligar o banho de água circulante e ajustar a temperatura a 30 ° C 7. Permitir 5 PSI (libras por polegada quadrada) de 95% de O 2 -5% CO 2 a fluir através do oxytube. Encha a banheira com tampão de Ringer. Equilibre a memória intermédia para, pelo menos,10 min, com um fluxo de gás constante, ajustando a válvula de oxytube. </li><li> Ligue os instrumentos (estimulador, de modo duplo sistema de alavanca, e interface de sinal). Carregue a dinâmica muscular controlo de software (DMC) de acordo com as instruções do fabricante. </li></ol> 1,2 dissecção músculo EDL Todos os estudos com animais devem ser aprovados pelo Animal Care Institucional e Comitê de uso. <ol><li> Anestesiar o rato com injeção intraperitoneal de 2,5 ul / g de peso corporal do coquetel anestésico (consulte a seção de materiais). Durante todo o procedimento cirúrgico, a profundidade de sedação foi verificada através da realização de um aperto do dedo do pé. Um suplemento de 10% da dose inicial do anestésico é administrado quando necessário para manter o animal sob anestesia. Raspar o membro posterior. Manter a temperatura interna do corpo a 37 ° C antes do procedimento de dissecção colocando o rato sobre uma almofada de aquecimento. A temperatura do corpo é monitorizada por medição da temperat constante rectalure utilizando uma sonda térmica. </li><li> Posicione o mouse sobre a supina bordo dissecção (Figura 1). Retire a pele da perna para expor os músculos dos membros posteriores. Fixar a perna no bloco Sylgard usando dois pinos costureira, uma em pé e outra no músculo gracilis. Coloque uma lâmpada de calor acima do corpo do rato para manter a temperatura corporal a 37 ° C. Constantemente superfuse todos os músculos expostos com tampão de Ringer. Drenar o excesso de tampão por meio de uma linha de vácuo. </li><li> Expor o tendão distal TA eo ligamento extensor sob estereomicroscópio dissecando a pele para o pé. Remova cuidadosamente a fáscia que cobre o músculo TA. Cortar o ligamento extensor para liberar o tendão distal TA. </li><li> Cortar o tendão distal TA e usá-lo para descolar do músculo TA. Remova cuidadosamente o músculo TA em seu anexo proximal. Coloque um pedaço fino de algodão embebido em tampão de Ringer ao lado do músculo EDL para absorver hemorragia causada pela ruptura da vasculatura do músculo TA. Utilizar a linha de vácuo para remover o excesso de tampão e sangue. </li><li> Atar um nó duplo quadrados seguido de um nó do laço usando uma sutura de seda de pão na junção tendão do músculo (MTJ) do músculo EDL distal (Figura 2). Fazer uma incisão na porção distal do músculo biceps femoris para expor o músculo EDL proximal. Repetir o mesmo conjunto de nós (Figura 2) na MTJ do tendão proximal EDL. Prenda o gancho do braço de alavanca para tanto o proximal ou os nós distais com um nó duplo quadrado usando a mesma linha de sutura. Cortar a linha de sutura restante. </li><li> Cortar o tendão proximal EDL superior ao nó de sutura proximal. Levantar-se o músculo EDL com o gancho e cortar a vasculatura por baixo do músculo. Cortar o tendão distal EDL inferior para o nó de sutura distal para remover o músculo EDL a partir do membro posterior. Cobrir o membro exposto posterior com um pedaço de algodão Ringer tampão encharcado. </li><li> Prenda o gancho ao braço de alavanca. Alinhar o músculo verticalmenteentre dois eletrodos. Fixe a linha de sutura distal ao posto fixo. Levante o banho de tecido para submergir o músculo em tampão de Ringer. Ajustar a tensão de repouso de 1,0 g utilizando o estágio de translação dupla grossa / fina e permitir que o músculo se equilibrar durante pelo menos 10 min. </li></ol> 1,3 medir as propriedades contráteis e passiva do músculo EDL Use a Tabela 2 para configurar os parâmetros no software DMC para cada uma das medidas a seguir. Analisar os dados usando a análise muscular dinâmica (DMA) de software. 1.3.1 A medição das propriedades contráteis do músculo EDL <ol><li> Estimular o músculo EDL três vezes a 150 Hz com 60 seg para além de estabilizar a musculatura 8. </li><li> Estimular o músculo EDL com diferentes tensões de repouso para determinar o comprimento óptimo (Lo). O comprimento ideal é o comprimento no qual o músculo desenvolve tensão contração máxima. Permitir que o músculorelaxar durante 2 minutos. </li><li> Ajuste a tensão de repouso para Lo. Medir a força muscular em contração estimulação única. Determinar a força de contracção absoluta (Pt), tempo para o pico de tensão (TPT) e tempo de semi-relaxamento (½ RT) do Pt. Permitir que o músculo para relaxar durante 2 minutos. </li><li> Ajuste a tensão de repouso para Lo. Medir a força muscular tetânica gerado em diferentes frequências de estimulação (50, 80, 100, 120, 150 e 200 Hz). Determine a força muscular absoluta tetânica máxima (Po), onde a força muscular atinge o máximo. Meça a TPT e ½ RT do Pó 9. </li><li> Permitir a relaxar o músculo durante 5 min. Ajuste a tensão de repouso para Lo. Aplicar 10 ciclos de contrações excêntricas com 2 min de repouso entre os ciclos. Calcular a perda de força relativa do Po após cada ciclo de contração excêntrica. </li><li> Separe o músculo EDL do aparelho e cortar os tendões no local da sutura. Determinar o peso do músculo molhado e calcular a área transversal muscular seccional (CSA)6,10. </li></ol> 1.3.2 A medição das propriedades passivas do músculo EDL <ol><li> Dissecar o músculo contralateral EDL e anexá-lo ao aparelho, como descrito na Seção 1.2, as etapas de 2 a 7. </li><li> Submeter o músculo EDL com um protocolo de seis passos de alongamento em que o músculo é esticado em 160% Lo com um incremento de 10% Lo. Analisar o perfil 6 tensão-deformação. </li><li> Avaliar a propriedade viscoso do músculo EDL através da medição da taxa de relaxação de tensão (SRR) nos seguintes intervalos de tempo após o alongamento e segurando o músculo em Lo de 10%: de pico-a-pico de 0,1 s de pós-(pp), de 0,1 a 0,2 s pp, de 0,2 a 0,5 s pp, de 0,5 a 1s pp e de 1 a 1,5 s pp </li><li> No final do estudo, a eutanásia por deslocamento cervical do rato e / ou a decapitação, enquanto o rato é ainda sob anestesia. Separe o músculo EDL do aparelho e cortar os tendões no local da sutura. Determinar o peso do músculo molhado e calcular o músculo cruz sectional área (CSA) 6, 10. </li></ol> 2. Avaliação das Propriedades contrátil do músculo TA in situ As propriedades contráteis do músculo TA são mensurados usando a Scientific Aurora no sistema músculo situ teste. Consulte a Tabela 1 para materiais e equipamentos. 2.1 Preparação de Equipamento <ol><li> Aquece-se a fase de termo-controlado dos animais a 37 ° C usando a água circulante banho. </li><li> Ligue os instrumentos (estimulador, de modo duplo sistema de alavanca, e interface de sinal). Carregue o software DMC de acordo com as instruções do fabricante. </li></ol> 2.2 Preparação do músculo TA na medição de força situ <ol><li> Anestesiar o rato, fazer a barba do membro posterior e expor o músculo TA, como descrito nos passos 1 a 3 na Seção 1.2. </li><li> Dê um nó duplo quadrado ao redor da patela ligamento using de uma sutura de seda de pão. Dê um nó duplo quadrado seguido por um nó do laço no MTJ do músculo TA distal (Figura 2), amarrar outro nó duplo quadrado deixando um laço ~ 10 mm a partir do nó distal TA tendão utilizando a mesma linha de sutura. Coloque o nó duplo segundo quadrado no lado do circuito. </li><li> Remova os pinos do membro posterior e posicionar o animal de bruços. Expor o músculo bíceps femoral. Faça uma incisão na linha média para revelar o nervo ciático. Dê um nó duplo quadrado ao redor da extremidade proximal do nervo ciático. Aparar um dos lados das linhas de sutura e cortar o nervo superior ao nó. Delicadamente, puxe o nervo ciático em direção ao joelho usando a linha de sutura e limpar o tecido conectivo a livre ~ 5 mm do seu comprimento. Não esticar o nervo durante este procedimento e constantemente superfuse o nervo com tampão de campainha. </li><li> Prepare o músculo TA contralateral como descrito nos passos 1 a 3. Cobrir um do membro posterior exposta com um pedaço de Ringer tampão de algodão embebido. Constantemente superfuse ambos os membros posteriores com pré-aquecido (37 ° C) de tampão de Ringer. Remover o excesso de tampão por meio de uma linha de vácuo. </li><li> Posicione o animal propenso na plataforma animal. Instale o suporte de fixação do joelho para a plataforma animal e proteger os joelhos para o pino de metal com o dobro nós quadrados usando as linhas de sutura do ligamento patelar. Pin os dois pés sobre o bloco Sylgard usando pinos costureira. Fixe a plataforma de animais no palco termo-controlada. Posicionar a lâmpada de aquecimento para manter a temperatura corporal central de animais, a 37 ° C. </li><li> Fixar o suporte de eléctrodo para a plataforma de animais e colocar o nervo ciático no eléctrodo utilizando a linha de sutura. Manter o eléctrodo de distância dos músculos dos membros posteriores. Cortar o tendão TA distal do membro posterior descoberta no local da sutura MTJ. Fixe a distal TA laço de sutura do tendão ao gancho do braço de alavanca. Cubra o músculo do membro exposto posterior com um algodão Ringer quente de tampão encharcado. </li></ol><ol><li> Use a Tabela 2 para definir os parâmetros no software DMC. Siga o mesmo protocolo descrito na Seção 1.3.1 para determinar as propriedades contráteis do músculo TA. Analisar os dados usando o software DMA. </li><li> Após a medição propriedade contrátil, retire a distal TA laço de sutura do tendão do gancho braço nivelador. Retire o músculo TA. Determinar o peso do músculo molhado e calcular o CSA 10. </li><li> Medir as propriedades contrácteis do músculo TA contralateral acordo com os passos 1-3 descritos acima. Eutanásia do rato de acordo com directrizes institucionais, no final do estudo. </li></ol>

<ol><li>Huijing, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+as+a+collagen+fiber+reinforced+composite%3A+a+review+of+force+transmission+in+muscle+and+whole+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomech%22%5BJournal%5D)">Muscle as a collagen fiber reinforced composite: a review of force transmission in muscle and whole limb.</a> J. Biomech. 32, 329-345 (1999).</li>
<li>Moss, R. L., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elastic+and+viscous+properties+of+resting+frog+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys.+J%22%5BJournal%5D)">Elastic and viscous properties of resting frog skeletal muscle.</a> Biophys. J. 17, 213-228 (1977).</li>
<li>Hoffman, E. P., Brown, R. H., Kunkel, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrophin%3A+the+protein+product+of+the+Duchenne+muscular+dystrophy+locus%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Dystrophin: the protein product of the Duchenne muscular dystrophy locus.</a> Cell. 51, 919-928 (1987).</li>
<li>Petrof, B. J., Shrager, J. B., Stedman, H. H., Kelly, A. M., Sweeney, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dystrophin+protects+the+sarcolemma+from+stresses+developed+during+muscle+contraction%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Dystrophin protects the sarcolemma from stresses developed during muscle contraction.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90, 3710-3714 (1993).</li>
<li>Pastoret, C., Sebille, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mdx+mice+show+progressive+weakness+and+muscle+deterioration+with+age%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurol.+Sci%22%5BJournal%5D)">mdx mice show progressive weakness and muscle deterioration with age.</a> J. Neurol. Sci. 129, 97-105 (1995).</li>
<li>Hakim, C. H., Grange, R. W., Duan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+passive+mechanical+properties+of+the+extensor+digitorum+longus+muscle+are+compromised+in+2-+to+20-mo-old+mdx+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">The passive mechanical properties of the extensor digitorum longus muscle are compromised in 2- to 20-mo-old mdx mice.</a> J. Appl. Physiol. 110, 1656-1663 (2011).</li>
<li>Segal, S. S., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-dependent+physiological+stability+of+rat+skeletal+muscle+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Temperature-dependent physiological stability of rat skeletal muscle in vitro.</a> Am. J. Physiol. 248, 265-270 (1985).</li>
<li>Grange, R. W., Gainer, T. G., Marschner, K. M., Talmadge, R. J., Stull, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast-twitch+skeletal+muscles+of+dystrophic+mouse+pups+are+resistant+to+injury+from+acute+mechanical+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Fast-twitch skeletal muscles of dystrophic mouse pups are resistant to injury from acute mechanical stress.</a> Am. J. Physiol. Cell Physiol. 283, 1090-1101 (2002).</li>
<li>Hakim, C. H., Duan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+differences+in+contractile+and+passive+properties+of+mdx+extensor+digitorum+longus+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Gender differences in contractile and passive properties of mdx extensor digitorum longus muscle.</a> Muscle Nerve. 45, 250-256 (2012).</li>
<li>Hakim, C. H., Li, D., Duan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+murine+skeletal+muscle+function+for+muscle+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Monitoring murine skeletal muscle function for muscle gene therapy.</a> Methods Mol. Biol. 709, 75-89 (2011).</li>
</ol>

Não há conflitos de interesse declarados.

Neste protocolo, que ilustramos ensaios fisiológicos para medir as propriedades contráteis e passiva músculo EDL e as propriedades contráteis do músculo TA. Uma grande preocupação em estudos de fisiologia do músculo é a oxigenação do músculo alvo. Para grandes músculos (tais como o músculo TA), o na abordagem in situ é a preferida porque a difusão de oxigénio a partir de tampão de Ringer não pode atingir o centro do músculo em um ensaio in vitro. Na abordagem situ não perturbe suprimento de sangue normal e hipóxia associada efeitos artificiais são evitados. O músculo EDL é um dos músculos mais comumente utilizado no estudo da fisiologia. Oxigenação adequada do músculo inteiro pode ser conseguida em um sistema in vitro devido à pequena dimensão do músculo. Além disso, o sistema in vitro fornece um ambiente fechado para manipular a concentração de iões (Ca 2 +, Na + e K +) e chemicals (ATP e glicose), que são necessárias para a produção óptima força muscular. Isto oferece uma grande oportunidade para estudar o efeito dessas variáveis ​​na produção de força. Uma medição precisa das propriedades contrácteis e passiva do músculo do membro é crítica para estudar a função do músculo esquelético. Alterações características dessas propriedades são muitas vezes consideradas como as características de várias doenças musculares. As mudanças nestes parâmetros também são indicadores importantes para determinar se uma terapia experimental é eficaz ou não.

<table border="1"><tbody><tr><td> Material </td><td> Fabricante </td><td></td><td> Especificações e comentários </td></tr><tr><td> Tecido do órgão-banho </td><td> Radnoti LLC, CA, EUA </td><td></td><td> De jaqueta de água banho de tecido (Cat # 158351-LL), tubo de oxigênio dispersor (Cat # 160192), válvula Luer (Cat # 120722) </td></tr><tr><td> Circulando banho de água </td><td> Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Mistura de gases </td><td> Airgas Nacional, Charlotte, NC, EUA </td><td></td><td> 95% O 2 e 5% CO 2 </td></tr><tr><td> In vitro aparelho de ensaio da função muscular </td><td> Aurora Científica, Aurora, ON, Canadá </td><td></td><td> O sistema consiste de um estimulador (Modelo # 701A), um sistema de alavanca de modo duplo (Modelo # 300C ou 305C), uma interface de sinal (Modelo # 604B) e um teste aplhos (Modelo # 800A) para montar verticalmente banho de órgãos de tecidos </td></tr><tr><td> No ensaio in vitro de software da função muscular </td><td></td><td></td><td> Dinâmica muscular controle de software (DMC) e dinâmica muscular controle de análise de dados (DMA), software </td></tr><tr><td> Cocktail rato anestesia misturados em NaCl a 0,9% </td><td> Consulte as diretrizes institucionais </td><td></td><td> De cetamina (25 mg / ml), xilazina (2,5 mg / ml) e acepromazina (0,5 mg / ml). Durante todo o procedimento cirúrgico, um suplemento de 10% da dose inicial pode ser necessário para manter animais sob anestesia. </td></tr><tr><td> Sylgard </td><td> Instrumento de precisão mundo </td><td> Cat # SYLG184 </td><td></td></tr><tr><td> A custom-made bordo dissecção Plexiglas </td><td> Na casa projetada </td><td></td><td> Consulte a Figura 1 </td></tr><tr><td> Lâmpada de aquecimento </td><td> Tensor Companhia Luz,Boston, MA, EUA </td><td></td><td> 15 Watt lâmpada para manter o aquecimento do mouse durante a dissecção </td></tr><tr><td> Tampão de Ringer </td><td> Os produtos químicos são adquiridos de Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA </td><td></td><td> Composição em mM: 1,2 NaH 2 PO 4 (Cat # S369), 1 MgSO4 (Cat # M63), 4,83 KCl (Cat # P217), 137 NaCl (Cat # 217), 24 NaHCO 3 (Cat # S233), 2 CaCl 2 (Cat # C79) e 10 de glucose (Cat # D16). Dissolver e misturar os produtos químicos individualmente na ordem listada acima. Armazenar a 4 ° C. </td></tr><tr><td> Microscópio de dissecação estéreo </td><td> Nikon, Melville, NY, EUA </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Instrumentos de dissecação </td><td> Belas Ferramentas ciência, Foster City, CA, EUA </td><td></td><td> Fórceps, tesoura grosseiros grosseiros, pinças finas (reto e ângulo de 45 °) </td></tr><tr><td> Trançado fio de seda # 4-0 </td><td> SofSilk USSC Suturas, Norwalk, CT, EUA </td><td> Cat # SP116 </td><td></td></tr><tr><td> A custom-made gancho de aço inoxidável </td><td> Peças pequenas, Inc. </td><td></td><td> 2&#39;&#39; de comprimento S / S 304V (0,18&#39;&#39; de diâmetro) para transdutor de força 305C ou 2,5&#39;&#39; de comprimento S / S 304V (0,012&#39;&#39; de diâmetro) para o transdutor 300C (Cat # ASTM A313) </td></tr><tr><td> No sistema de ensaio in situ da função muscular </td><td> Aurora Científica, Aurora, ON, Canadá </td><td></td><td> O sistema (809B, num aparelho de rato in situ) são constituídos de um estimulador (modelo # 701B), um sistema de alavanca de modo duplo (Modelo # 305C), uma interface de sinal (Modelo # 604A) e um aparelho de termo-platina controlada (Modelo # 809A ) </td></tr><tr><td> No ensaio in vitro de software da função muscular </td><td> Aurora Científica, Aurora, ON, Canadá </td><td></td><td> Dinâmica muscular controle de software (DMC) e dinâmica muscular controle de análise de dados (DMA), software </td></tr><tr><td> A custom-made TA plataforma de animais de ensaio </td><td> Na casa projetada </td><td></td><td> Consulte a Figura 2 </td></tr><tr><td> A custom-made gancho de aço inoxidável </td><td> Peças pequenas, Inc. </td><td> Cat # ASTM A313 </td><td> 0,5&#39;&#39; de comprimento S / S 304V (0,18&#39;&#39; de diâmetro) </td></tr><tr><td> Custom-made 25G eletrodos de platina </td><td> Chalgren Enterprises, Gilroy, CA </td><td></td><td> Solda dois 0,016&#39;&#39; grossos fios de platina para dois 24G fios elétricos </td></tr></tbody></table> Tabela 1. Materiais e equipamento.

avaliação da função muscular do músculo extensor longo dos dedos<em&gt; ex vivo</em&gt; e músculo tibial anterior<em&gt; em situ</em&gt; em ratos

Evaluation of Muscle Function of the Extensor Digitorum Longus Muscle Ex vivo and Tibialis Anterior Muscle In situ in Mice

Os movimentos do corpo são fornecidos principalmente por função mecânica do músculo esquelético. O músculo esquelético é composta de feixes de numerosos miofibras que são revestidos por tecidos conjuntivos intramusculares. Cada fibra muscular contém muitas miofibrilas que correm longitudinalmente ao longo do comprimento da fibra muscular. Miofibrilas são o aparato contrátil do músculo e que são compostos de unidades repetidas contrácteis conhecidos como sarcômeros. Uma unidade sarcômero contém filamentos de actina e miosina que estão espaçados pelos discos Z e proteína titina. A função mecânica do músculo esquelético é definido pelas propriedades contrácteis e passiva do músculo. As propriedades contrácteis são utilizadas para caracterizar a quantidade de força gerada durante a contracção do músculo, o tempo de geração de força e do tempo de relaxamento muscular. Qualquer fator que afeta a contração muscular (como a interação entre filamentos de actina e miosina, homeostase do cálcio, ATP / ADP relação, etc) influencia a prope contrátilrties. As propriedades passivas referem-se às propriedades elásticas e viscosas (rigidez e viscosidade) do músculo, na ausência de contracção. Estas propriedades são determinadas pela extracelular e os componentes estruturais intracelulares (tais como titina) e tecido conjuntivo (principalmente colagénio) 1-2. As propriedades contráteis e passiva são dois aspectos inseparáveis ​​da função muscular. Por exemplo, a flexão do cotovelo é conseguida pela contracção dos músculos do compartimento anterior do braço superior e estiramento passivo dos músculos no compartimento posterior da parte superior do braço. Para compreender verdadeiramente a função muscular, ambas as propriedades contráteis e passiva deve ser estudado. As propriedades contráteis e / ou passiva mecânicas do músculo são muitas vezes comprometida em doenças musculares. Um bom exemplo é distrofia muscular de Duchenne (DMD), um músculo desperdiçando grave doença causada por deficiência de distrofina 3. Distrofina é uma prote cytoskeletalna medida em que estabiliza a membrana celular do músculo (sarcolema) durante 4 contracção muscular. Na ausência de distrofina, o sarcolema é danificado pela força de corte geradas durante a transmissão da força. Esta membrana rasgando inicia uma reacção em cadeia que leva à morte da célula muscular e perda de maquinaria contráctil. Como consequência, a força muscular é reduzida e miofibras mortas são substituídos pelos tecidos fibróticos 5. Esta alteração posterior aumenta rigidez muscular 6. A medição precisa destas mudanças fornece guia importante para avaliar a progressão da doença e para determinar a eficácia terapêutica do novo gene / célula / intervenções farmacológicas. Aqui, apresentamos dois métodos para avaliar as propriedades contráteis e passiva mecânicas do extensor longo dos dedos (EDL) muscular e as propriedades contráteis do músculo tibial anterior (TA).

Os resultados seguintes são uma representação dos seus relatórios anteriores 6,9. Os dados são apresentados como média ± erro padrão da média. A Tabela 3 mostra as propriedades morfométricas do músculo EDL em BL10 normais e deficientes em distrofina (mdx) ratos em 4 a 6 meses de idade. Figura 4 mostra representativos propriedades contrácteis e passiva do músculo EDL de BL10 e mdx ratos. As propriedades contrácteis do músculo EDL são descritos pelos termos seguintes, incluindo o (força absoluta dividida pela CSA) específico força twitch (Figura 4A), a força tetânica específica máxima (Figura 4B), TPT e ½ RT da força máxima absoluta tetânica (Figura 4C e D). O TPT e ½ RT também pode ser calcular a força de contração absoluta. O perfil de tensão-deformação (Figura 4E) e SRR (Figura 4F) umre utilizado para descrever as propriedades passivas do músculo EDL. Ausência de distrofina tem um impacto significativo sobre as propriedades contráteis e passiva do músculo EDL 6,9. Twitch específico e as forças tetânica são reduzidos significativamente no músculo EDL mdx. O TPT é significativamente mais rápido, enquanto o ½ RT é significativamente mais lenta no músculo EDL mdx. O perfil de tensão-deformação sugere que a rigidez é aumentada significativamente no músculo EDL mdx. O mdx músculo EDL também produz uma força de resistência significativamente muito maior (stress passiva) antes de chegar ao pico de tensão, enquanto as tensões pós-pico declinar muito mais rápido. Além disso, o SRR foi significativamente mais elevada no músculo EDL mdx em comparação com a do músculo EDL BL10. A análise estatística Significância estatística entre os dois grupos é analisada pelo teste t de Student. Para ssignificado tatistical entre vários grupos, de uma forma ou de duas vias análise de variância, seguido de análise post hoc Bonferroni é recomendada a utilização do software SAS (SAS Institute Inc., Cary, NC). Diferença é considerado significativo quando p &lt;0,05. Tabela 1. Materiais e equipamento. <table border="1"><tbody><tr><td class="jove_content_small"> Experiência </td><td class="jove_content_small"> A tensão de repouso (grama) </td><td class="jove_content_small"> Pulso de freqüência (Hz) </td><td class="jove_content_small"> Largura de pulso (ms) </td><td class="jove_content_small"> Duração da estimulação (ms) </td><td class="jove_content_small"> Comprimento trecho </td><td class="jove_content_small"> Estiramento duração (ms) </td><td class="jove_content_small"> Taxa de alongamento </td><td class="jove_content_small"> Comentários </td></tr><tr><td colspan="9"> 1. A avaliação das propriedades contráteis e passiva do músculo EDL vivo ex </td></tr><tr><td colspan="9"> 1.3.1 A medição das propriedades contráteis do músculo EDL </td></tr><tr><td> 1. Aqueça-se </td><td> 1,0 </td><td> 150 </td><td> 0,2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> Descansar o músculo por 60 segundos entre cada estímulo. Essas contrações tetânicas preliminares estabilizar o músculo para medições posteriores. </td></tr><tr><td> 2. Comprimento muscular ótimo (Lo) </td><td> 0,5, 1,0, 1,5 e 2,0 </td><td> 1 </td><td> 0,2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> Permitir que o músculo a relaxar por 30 segundos entre cada estímulo. Meça o comprimento muscular ótimo utilizando um paquímetro digital. </td></tr><tr><td> 3. Twi únicotch vigor (Pt) </td><td> Ajuste a tensão de repouso para Lo </td><td> 1 </td><td> 0,2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 4. Força muscular tetânica </td><td> Ajuste a tensão de repouso para Lo </td><td> 50, 80, 100, 120, 150 e 200 </td><td> 0,2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> Permitir que o músculo a relaxar por 1 min entre cada estímulo. Determinar a freqüência que geram a máxima absoluta força tetânica (Po). </td></tr><tr><td> 5. Contração excêntrica </td><td> Ajuste a tensão de repouso para Lo </td><td> Use a freqüência que gera a força tetânica máxima (Po) </td><td> 0,2 </td><td> 700 </td><td> Lo 10% </td><td> últimos 200 ms da duração estimulação </td><td> 0,5 Lo / seg </td><td> Repita a contração excêntrica por 10 ciclos com 2 min de repouso entre os ciclos. </td></tr><tr><td> 6. CSA do músculo EDL </td&gt; <td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td> CSA = (massa muscular (g) / [1,06 g / cm 3 x (Lo x 0,44)]. 1,06 g / cm 3 de densidade é o músculo e 0,44 é o comprimento da fibra muscular EDL em Lo ratio. </td></tr><tr><td colspan="9"> 1.3.2 A medição das propriedades passivas do músculo EDL </td></tr><tr><td> 1. Seis passo protocolo de alongamento </td><td> Ajuste a tensão de repouso para Lo </td><td></td><td></td><td></td><td> Lo 10% </td><td></td><td> 2 cm / seg </td><td> Repita o protocolo de alongamento com um incremento de 10% até 160 Lo Lo% é atingido. Alow 1,5 segundos entre os ciclos de alongamento. </td></tr><tr><td> 2. SRR </td><td> Ajuste a tensão de repouso para Lo </td><td></td><td></td><td></td><td> Lo 10% </td><td></td><td> 2 cm / seg </td><td> SSR é calculado dividindo-se a diferença de o stress com o time decorrido entre dois momentos em um espaço de tempo. </td></tr><tr><td colspan="9"> 2,3 medição das propriedades contráteis do músculo TA </td></tr><tr><td> 1. Aqueça-se </td><td> 4,0 </td><td> 150 </td><td> 0,2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> Descansar o músculo por 60 segundos entre cada estímulo. </td></tr><tr><td> 2. Comprimento muscular ótimo (Lo) </td><td> 3.0, 4.0, 5.0, 6.0 e 7.0 </td><td> 1 </td><td> 0,2 </td><td> 300 </td><td></td><td></td><td></td><td> Permitir que o músculo a relaxar por 30 segundos entre cada estímulo. Meça o comprimento muscular ótimo utilizando um paquímetro digital. </td></tr><tr><td> 3. CSA do músculo TA </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td> CSA = (massa muscular (g) / [1,06 g / cm 3 x (Lo x 0,6)]. 0,6 é o comprimento da fibra muscular TA para Lo ratio. </td></tr></tbody></table> Tabela 2. Parâmetros para a avaliação das propriedades mecânicas dos músculos EDL e TA. <table border="1"><tbody><tr><td> Tensão </td><td> Idade (meses) </td><td> Peso corporal (g) </td><td> EDL peso (mg) </td><td> EDL Lo (mm) </td><td> EDL CSA (mm 2) </td></tr><tr><td> BL10 </td><td> 6 </td><td> 32,03 ± 0,57 </td><td> 13,90 ± 0,77 </td><td> 14,09 ± 0,04 </td><td> 2,12 ± 0,12 </td></tr><tr><td> mdx </td><td> 6 </td><td> 35,44 ± 0,42 * </td><td> 16,73 ± 0,42 * </td><td> 13,93 ± 0,05 * </td><td> 2,57 ± 0,07 * </td></tr></tbody></table> Tabela 3. Propriedades morfométricas do músculo EDL. *, O valor em mdratinhos x é significativamente diferente do da mesma idade BL10 ratos. <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig1.jpg" alt="Figura 1" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig1highres.jpg" fo:content-width="5.5in"/> Figura 1. Um diagrama esquemático da placa de dissecção custom-made mouse. Dissecção A placa é feita de um acrílico ½ polegada de espessura e foi fabricado na loja institucional. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50183/50183fig1large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver maior figura</a> . <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig2.jpg" alt="Figura 2" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig2highres.jpg" fo:content-width="4in"/> /&gt; Figura 2. Uma série de imagens digitais que mostram os passos de atar um nó duplo quadrada seguido por um nó laço na MTJ. Asterisk, oMúsculo EDL; Arrow, do tendão distai do músculo EDL. <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig3.jpg" alt="Figura 3" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig3highres.jpg" fo:content-width="6in"/> /&gt; Figura 3. Um diagrama esquemático da plataforma feito por medida para ensaio in situ da função muscular TA. A plataforma animais plexiglass e do titular do joelho de aço inoxidável foram concebidos para a montagem sobre o aparelho 809B de rato in situ. *, Haste de aço inoxidável (Cat # MPR-2.0 , Siskiyou, Grants Pass, OR); #, porta-eletrodo Universal (Cat # MXB, Siskiyou, Grants Pass, OR) §, haste de fixação do eletrodo (Cat # MPR-3.0, Siskiyou, Grants Pass, OR); ** Sylgard bloco. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50183/50183fig3large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver maior figura</a> . <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page = &quot;always&quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/50183/50183fig4.jpg" alt="Figura 4" fo:src="/files/ftp_upload/50183/50183fig4highres.jpg" fo:content-width="4in"/> /&gt; Figura 4. Os resultados representativos para as propriedades contráteis e passiva do músculo EDL. Contráteis do músculo EDL caracterizam-se por a força de contração específica (A), a força tetânica específica (B), o tempo para o pico de tensão (C) e o tempo de relaxação da metade (D). As propriedades passivas do músculo EDL são avaliados pelo perfil de tensão de esforço (E) e o SSR. *, Camundongos mdx são significativamente diferentes de mesma idade BL10 ratos.

Mudanças nos membros musculares contráteis e passiva propriedades mecânicas são biomarcadores importantes para doenças musculares. Este manuscrito descreve ensaios fisiológicos para medir estas propriedades no longus murino extensores dos dedos e tibial anterior.

Avaliação da função muscular do músculo extensor longo dos dedos<em&gt; Ex vivo</em&gt; E músculo tibial anterior<em&gt; Em situ</em&gt; Em Ratos

Body  movements are mainly provided by mechanical function of skeletal muscle. Skeletal  muscle is composed of numerous bundles of myofibers that are ...

O objetivo geral deste procedimento é determinar com precisão as propriedades mecânicas dos músculos dos membros do camundongo. Isso é feito medindo as propriedades contráteis e passivas do músculo extensor longo dos dedos ex evo, ou medindo as propriedades contráteis do músculo tibial anterior in situ, em última análise, podem ser obtidos resultados que permitem uma melhor compreensão das alterações fisiológicas em várias doenças musculares e se as intervenções experimentais melhoram a função muscular. Este método fornece uma avaliação completa da propriedade contrátil e passiva do músculo esquelético, que são dois aspectos inseparáveis da função mecânica do músculo esquelético necessários para o movimento corporal.Portanto, a demonstração visual do procedimento de dissecção muscular é fundamental, pois requer muitas habilidades e manipulação. Além disso, a principal vantagem da avaliação NC dois da propriedade contrátil dos grandes músculos sobre os métodos existentes, como o SA in vitro, é que a abordagem do instituto não perturba o fluxo sanguíneo normal e a oxigenação. Uma grande preocupação no estudo da fisiologia muscular é a oxigenação do músculo alvo.Em um SA in vitro para músculos grandes, como o músculo TA, a difusão de oxigênio pode não atingir o centro do músculo. As implicações dessa técnica se estendem a uma terapia de doenças musculares porque a medição precisa da função mecânica do músculo esquelético também pode ser usada para avaliar a progressão de doenças musculares e determinar a eficácia terapêutica de novas células gênicas e intervenções farmacológicas. Todos os procedimentos com animais apresentados aqui foram aprovados pelo comitê institucional induzido por cuidados com animais.Esta é uma cirurgia de não sobrevivência para configurar o sistema de teste muscular para os experimentos ex vivo. Comece montando o banho de tecido prendendo o tubo oxi ao banho de tecido da camisa de água. Conecte o banho montado ao aparelho de montagem muscular e coloque a válvula de agulha na drenagem do banho.Conecte a linha de gás e as linhas de circulação de água ao banho. Deixe a água circular a 30 graus Celsius na câmara da camisa e cinco PSI de gás fluam através do tubo de oxi. Encha o banho com tampão de campainha e equilibre-o com um fluxo de gás constante.Ligue os instrumentos e carregue o software DMC para dissecar o arter muscular EDL arter anestesiando e colocando o mouse em uma almofada de aquecimento. Raspe o membro posterior e verifique se há sedação beliscando o dedo do pé. Posicione o mouse na placa de dissecação e retire a pele da perna.Use dois alfinetes de costureira para prender o membro posterior no pé e no músculo grácil. Coloque uma lâmpada de aquecimento acima do mouse para manter a temperatura corporal central em 37 graus Celsius e continuamente funda todos os músculos expostos com tampão de toque quente sob um microscópio estéreo, disseque a pele para expor o tendão distal do TA e o ligamento extensor e remova suavemente a fáscia que cobre o músculo TA. Corte o ligamento extensor para liberar o tendão distal do TA.Corte o tendão distal do TA e use-o para remover o músculo TA com um pedaço fino de algodão embebido em tampão de ringer. Pare o sangramento causado pela ruptura da vasculatura do músculo TA. Em seguida, usando uma sutura de seda de pão, amarre um nó quadrado duplo seguido por um nó de laço na junção do tendão do músculo distal do músculo EDL.Em seguida, faça uma incisão no músculo bíceps feminino para expor o tendão proximal e amarre o mesmo conjunto de nós na junção do tendão do músculo proximal. Use a mesma linha de sutura para fazer um nó quadrado duplo. Para prender o gancho do braço de alavanca aos nós proximais ou distais.Para dissecar suavemente o músculo EDL do membro posterior. Primeiro, corte o tendão proximal superior aos nós de sutura e corte a vasculatura abaixo do músculo. Em seguida, corte o tendão distal inferior ao nó de sutura.Cubra o membro posterior exposto com um pedaço de algodão embebido em argolas. Por fim, prenda o gancho ao braço da alavanca e alinhe os músculos verticalmente entre os eletrodos. Prenda a linha de sutura distal ao pino fixo.Mergulhe o músculo no tampão de ringer e ajuste a tensão de repouso para 1,0 gramas. Deixe o músculo se equilibrar por pelo menos 10 minutos. Para medir as propriedades contráteis do músculo EDL, defina os parâmetros para cada um dos seguintes protocolos no software DMC, conforme apresentado aqui.Para o primeiro protocolo, estabilize o músculo EDL estimulando-o três vezes a 150 hertz com um 62º descanso entre as estimulações. Para o segundo protocolo, deixe os músculos relaxarem por dois minutos e, em seguida, determine o comprimento ideal ou NL estimulando o músculo EDL em diferentes tensões de repouso. Use o paquímetro digital para medir o comprimento ideal do músculo entre os nós distal e proximal.Deixe o músculo relaxar por dois minutos. Para o protocolo três, ajuste a tensão de repouso para L zero e meça a força muscular na estimulação de contração única. Determine a tensão do Twitch ou pt, o tempo para o pico de tensão ou TPT e o tempo de meio relaxamento do pt.Deixe o músculo relaxar por dois minutos. Para realizar o quarto protocolo, ajustar a tensão de repouso para NL e medir a força muscular testética gerada em diferentes frequências de estimulação. Meça o P NAUGH onde a Força Muscular atinge a força titânica máxima.Meça o tempo até o pico de tensão e metade do tempo de relaxamento para o p-naugh. Comece o protocolo cinco permitindo que o músculo relaxe por cinco minutos, ajuste a tensão de repouso para L Naugh e aplique 10 ciclos de contrações excêntricas com dois minutos de descanso entre os ciclos. Calcule a perda de força relativa do PN após cada ciclo de contração excêntrica.Por fim, retire o músculo EDL do aparelho e corte os tendões no local da sutura. Determine o peso úmido do músculo e calcule a área da seção transversal do músculo. Para medir as propriedades passivas do músculo EDL, disseque o músculo EDL contralateral e conecte-o ao aparelho conforme demonstrado anteriormente.Neste vídeo, submeta o músculo a um protocolo de alongamento de seis etapas, onde o músculo é forçado a 160% L zero em incrementos de 10%. Analise o perfil de tensão de estresse para avaliar a propriedade viscosa do alongamento muscular EDL e mantenha o músculo em 10% L zero e meça a taxa de relaxamento de estresse nos seguintes prazos. Comece aquecendo o estágio animal termocontrolado a 37 graus Celsius com água circulatória.Ligue o e carregue o software DMC. Depois de expor o músculo TA no membro posterior do camundongo anestesiado, use uma sutura de seda de pão para dar um nó quadrado duplo ao redor do ligamento da patela. Em seguida, dê um nó quadrado duplo seguido de um nó de laço na junção do tendão muscular ou MTJ do tendão distal.Use a mesma sutura para fazer um laço de aproximadamente 10 milímetros. Posicione o animal de bruços e exponha o músculo bíceps fems. Exponha o nervo ciático e dê um nó quadrado duplo em torno de sua extremidade proximal.Corte o nervo superior ao nó e disseque cuidadosamente cerca de cinco milímetros de seu comprimento em direção ao joelho. Não estique ou danifique o nervo. Prepare o músculo ta contralateral, conforme demonstrado anteriormente neste vídeo, e cubra um dos membros posteriores com um pedaço de algodão embebido em tampão de ringer.Em seguida, posicione o animal de bruços na plataforma do animal e use as linhas de sutura do ligamento da patela ao redor do pino do joelho para dar um nó quadrado duplo para prender o joelho. Em seguida, depois de prender os pés no bloco de proteção SIL, prenda a plataforma do animal no estágio termocontrolado e posicione a lâmpada de calor para manter a temperatura corporal do núcleo do animal em 37 graus Celsius. Depois de prender o eletrodo à plataforma, conecte o nervo ciático ao eletrodo, corte o tendão TA do membro posterior descoberto distal ao nó distal e prenda a alça de sutura ao gancho do braço de alavanca.Cubra o músculo exposto do membro posterior com algodão embebido em tampão de toque quente para registrar as medidas contráteis do músculo TA. Use os parâmetros e o protocolo no software DMC demonstrado anteriormente neste vídeo para o músculo EDL e use o software para analisar os dados. Depois de fazer as medições do músculo TA, retire a alça de sutura do tendão distal do TA do gancho do braço de alavanca e meça as propriedades contráteis do músculo TA contralateral, conforme demonstrado Após a eutanásia do animal, remova os músculos TA e determine seu peso úmido.Para calcular a área da seção transversal, esta tabela mostra as propriedades morfométricas do músculo EDL em camundongos pretos normais 10 e deficientes em distrofina ou MDX aos quatro a seis meses de idade. Mostramos aqui uma representação das propriedades contráteis e passivas do músculo EDL de camundongos pretos 10 e MDX, incluindo o tempo de força titânica máxima específica da força Twitch até o pico de tensão e o tempo de meio relaxamento da força titânica máxima absoluta. O tempo para atingir o pico de tensão e o tempo de meio relaxamento também podem ser calculados a partir da força de contração absoluta.O perfil de tensão e a taxa de relaxamento de tensão são usados para descrever as propriedades passivas do músculo EDL. A ausência de distrofina tem um impacto significativo nas propriedades contráteis e passivas do músculo EDL. As forças específicas do Twitch e do Titanic são significativamente reduzidas no músculo M-D-X-E-D-L.Por exemplo, o tempo para atingir o pico de tensão é significativamente mais rápido, enquanto o tempo de meio relaxamento é significativamente mais lento no músculo MDXEDL. Além disso, o perfil de tensão de tensão sugere que a rigidez é significativamente aumentada no músculo M-D-X-E-D-L. O músculo M-D-X-E-D-L também produz uma força de resistência significativamente maior antes de atingir o pico de estresse, enquanto os pós-pico diminuem muito mais rápido.Além disso, a taxa de relaxamento do estresse foi significativamente maior no músculo M-D-X-E-D-L em comparação com a do músculo preto 10 EDL. Uma vez dominado o procedimento de dissecção, a análise ex vivo da propriedade contrátil e passiva do músculo EDL pode ser feita em 40 minutos. E a avaliação in situ da propriedade contrátil de ambos os músculos TA pode ser feita em 60 minutos após seu desenvolvimento.Essa técnica abriu caminho para os pesquisadores avaliarem as propriedades contráteis e passivas do músculo esquelético no campo da doença muscular para ajudar a determinar a eficiência do tratamento após este procedimento. Outro método, como a análise histopatológica do músculo esquelético, pode ser realizado para responder a perguntas adicionais. Por exemplo, o efeito do tratamento experimental na histopatologia do músculo esquelético.

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Nós descrevemos um método para medir diretamente a força muscular, a força muscular, a cinética contráteis e fatigabilidade de músculos esqueléticos isolados em...

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As medições da função do músculo contribui para a avaliação de potenciais agentes terapêuticos para o músculo patologia, bem como para a determinação dos mecanismos subjacentes à fisiologia desse tecido. Vamos demonstrar a preparação do extensor longo dos dedos e músculos do diafragma para testes funcionais. Protocolos para contrações isométricas e excêntricas será mostrado, bem como as diferenças de resultados entre os músculos distróficos, representando um estado patológico, e os músculos de...

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Muscle neurônios sensoriais estão envolvidos na sinalização proprioceptor e também informar sobre eventos estaduais e lesão relacionada com o metabolismo. Nós descrevemos um rato adulto em preparação músculo-nervo vitro para estudos sobre músculos aferentes ativado por estiramento.

Um In Vitro Adulto mouse para estudar as propriedades de queima de músculos aferentes

Descrevemos um protocolo in vivo para medir a dorsiflexão do pé após estimulação do nervo fibular e contração do compartimento crural anterior do membro posterior do rato. Essas medições são uma ferramenta translacional indispensável para avaliar a patologia do músculo esquelético e as abordagens de engenharia de tecidos para reparo e regeneração muscular.

aplicações de<em&gt; In Vivo</em&gt; Teste Funcional do Rato tibial anterior para a Avaliação da engenharia de tecidos Repair Músculo Esquelético

Medição da função contrátil de músculo esquelético de roedores é uma ferramenta útil que pode ser usada para controlar a progressão da doença, bem como a eficácia da intervenção terapêutica. Descrevemos aqui a avaliação não-invasiva, na vivo dos músculos levantadores que podem ser repetidos ao longo do tempo no mouse mesmo.

Avaliação não-invasiva da função de músculos levantadores em ratos

A regulação intacta da absorção de glicose muscular é importante para manter a homeostase de glicose corporal inteira. Este protocolo apresenta avaliação da absorção de glicose estimulada pela insulina e contração em músculo esquelético maduro isolado e incubado ao delinear o impacto de várias intervenções fisiológicas em todo o metabolismo da glicose corporal.

Medição da absorção de glicose estimulada por insulina e contração em músculo esquelético maduro isolado e incubado de camundongos

A quantificação da força máxima do extensor do joelho é imprescindível para entender adaptações funcionais ao envelhecimento, doença, lesão e reabilitação. Apresentamos um novo método para medir repetidamente o torque isométrico de extensão do joelho in vivo.

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Este protocolo descreve um método para análise morfométrica de junções neuromusculares por microscopia confocal combinada e STED que é usado para quantificar alterações patológicas em modelos de camundongos de SMA e CMS relacionada ao ColQ.

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Este artigo detalha a metodologia para emular a produção de força muscular in vivo durante experimentos de loop de trabalho ex vivo usando um músculo "avatar" de um roedor de laboratório para avaliar as contribuições dos transientes de tensão e ativação para a resposta da força muscular.

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Descrevemos um protocolo para obtenção de fibras enzimaticamente dissociadas de diferentes comprimentos e tipos de seis músculos de camundongos adultos: três deles já descritos (flexor curto dos dedos, extensor longo dos dedos, sóleo) e três deles dissociados com sucesso pela primeira vez (extensor longo do hálux, fibular longo, fibular dos dígitos).

Fibras musculares esqueléticas curtas, intermediárias e longas intactas obtidas por dissociação enzimática de seis músculos dos membros posteriores de camundongos: além do flexor curto dos dedos

Aprenda a avaliar propriedades mecânicas de músculos de membros de camundongos, incluindo o extensor digitorum longus e o tibialis anterior, usando técnicas ex vivo e in situ para estudos de fisiologia muscular.

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