Os modelos de mouse para Arteriosclerose Graft

O objetivo geral do experimento a seguir é transplantar um vaso doador para a aorta abdominal de um receptor. O primeiro passo é dissecar a aorta torácica do camundongo doador. Os próximos locais de anastomose são criados na aorta abdominal do camundongo receptor.

O vaso doador é então implantado na aorta abdominal do receptor. Em última análise, o transplante bem-sucedido pode ser acessado pela função motora intacta do membro posterior do camundongo receptor. Portanto, este modelo vai nos ajudar a entender a patogênese da esclerose arterial do enxerto.

E é tecnicamente um desafio, o que requer muita prática prática e o paciente para ser perfeito. Portanto, demonstrando o procedimento será o Dr. Chen e o assistente de Louanne. Para começar, confirme a profundidade adequada da anestesia no camundongo doador.

Uma vez anestesiado, coloque o mouse em decúbito dorsal em uma bandeja sob um microscópio cirúrgico. Limpe o tórax com esfregões repetidos de iodo e álcool depois de expor o coração e lavá-lo com solução salina, remova o coração e os pulmões para expor todo o comprimento da aorta torácica. Uma vez visualizado, comece a dissecar cuidadosamente a aorta torácica longe do tecido circundante.

Quando os ramos lombares forem alcançados, ligue-os perto da aorta com sutura de seda antes de cortá-los. Quando liberado do tecido circundante, excise toda a aorta torácica. Uma vez isolada, lave a aorta doadora com soro fisiológico heparinizado e armazene-a nesta solução em gelo até o transplante.

Depois de garantir a anestesia adequada no camundongo receptor, raspe o pelo da região abdominal anterior. Cubra os olhos com pomada oftálmica e limpe a área como visto anteriormente. Quando estiver pronto, coloque o mouse em decúbito dorsal em uma bandeja sob um microscópio cirúrgico.

Incise a parede abdominal na linha média do xifóide ao púbis e, em seguida, use um afastador para separar a parede e expor a cavidade abdominal Uma vez exposto, envolva os intestinos em gaze umedecida com solução salina e empurre-os para cima e para longe da cavidade abdominal. Use mais gaze umedecida com solução salina para envolver as áreas abdominais restantes e use-a para retrair o reto para o lado direito do abdômen. Em seguida, mova os órgãos reprodutivos inferiormente.

Lembre-se de manter os tecidos expostos úmidos aplicando solução salina. Identifique regularmente a aorta infrarrenal localizada proximal ao vaso renal e distal à bifurcação aórtica romba. Disseque-o cuidadosamente para separá-lo da veia inferior cva.

Identifique o ligante e corte todos os pequenos ramos originários deste segmento da aorta. Uma vez isolado o segmento aórtico, coloque uma pinça vascular em cada extremidade com aproximadamente cinco milímetros de distância. Em seguida, crie os locais da anastomose seccionando a aorta abdominal entre os grampos.

Usando uma microtesoura afiada, ressece um pequeno segmento da aorta de uma extremidade cortada para acomodar o enxerto aórtico do doador. Lave os segmentos aórticos entre os grampos usando solução salina heparinizada para remover o sangue residual. Lembre-se de irrigar periodicamente ambas as amostras aórticas com solução salina heparinizada durante todo o procedimento.

Em seguida, transeccione ambos os lados da aorta doadora para criar um enxerto de segmento de 2,5 milímetros de comprimento para transplante. Coloque o enxerto aórtico do doador na posição alinhando as extremidades proximal e distal para suturas contínuas. Coloque as suturas de suporte nas posições de três e nove horas de ambas as extremidades primeiro.

Em seguida, junte as bordas cortadas com três a quatro suturas contínuas e amarre as suturas contínuas às suturas de suporte com um nó duplo para suturas interrompidas. Construa quatro locais de anastomose nas posições de três e nove horas de ambos os lados do enxerto. Primeiro. Em seguida, junte as bordas cortadas com três a quatro pontos colocados entre cada um desses locais.

Uma vez que as suturas estejam no lugar, solte o grampo distal para permitir o fluxo retrógrado para o enxerto. Identifique quaisquer locais de sangramento e faça pontos adicionais em três minutos. Quando a hemostasia satisfatória for alcançada, solte o amplificador de pinça proximal.

A perviedade dos enxertos pode ser confirmada pela presença de pulsação vigorosa. Se a pulsação diminuir, injete heparina no vaso para evitar trombose. Quando estiver pronto, retorne os intestinos para a cavidade abdominal e suture as camadas muscular e cutânea fechadas.

Coloque o camundongo receptor em uma gaiola quente e limpa e monitore por uma a duas horas até que a consciência retorne. Avalie a função motora do camundongo após a recuperação e, novamente, no segundo dia, uma cirurgia de transplante é bem-sucedida se nenhuma disfunção dos membros posteriores for observada. A análise histológica dos enxertos arteriais realizados quatro semanas após a cirurgia revelou um aumento da espessura da parede do vaso em receptoras de doador masculino.

No entanto, nenhuma arteriosclerose do enxerto foi observada no grupo masculino para masculino. Neste exemplo, a artéria torácica de um doador masculino foi transplantada para um camundongo nocaute de interferon gama, a expressão de interferon gama foi então induzida no camundongo receptor. Antes de as amostras serem coletadas.

Algumas semanas depois, a análise histológica dos enxertos arteriais mostrou que não foi observada arteriosclerose do enxerto no grupo tratado. Agora você sabe como fazer essa cirurgia. Continue tentando.