Tratáveis ​​mamíferos Infecções celulares com Protozoário-condicionadas Bactérias

O objetivo geral deste procedimento é colher e quantificar bactérias tratáveis fluorescentemente de um hospedeiro intermediário para infecção subsequente de células hospedeiras de mamíferos. Aqui, Legionella mala expressando GFP é usada para infectar o protozoário natural da ameba acan, monocamadas de castellani. Os el mala são então colhidos por lise seletiva e a concentração de bactérias é então calculada usando uma fórmula baseada na diluição da emissão de fluorescência do protozoário.

Bactérias preparadas são então usadas para infectar monocamadas de células de mamíferos. Finalmente, o número de bactérias infecciosas nas células de mamíferos é determinado usando uma combinação de microscopia de fluorescência, citometria de fluxo e lisados de plaqueamento para recuperar unidades formadoras de colônias. Os dados resultantes demonstram uma vantagem patogênica obtida para as bactérias que foram cultivadas em células de protozoários no estágio de priming quando comparadas à mesma cepa que foi cultivada em meio artificial.