Separation of Spermatogenic Cell Types Using STA-PUT Velocity Sedimentation

Jessica M Bryant; Mirella L Meyer-Ficca; Vanessa M Dang; Shelley L Berger; Ralph G Meyer

doi:10.3791/50648

A separação de tipos de células espermatogênicas Usando STA-PUT velocidade de sedimentação

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Biology

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Separation of Spermatogenic Cell Types Using STA-PUT Velocity Sedimentation

A separação de tipos de células espermatogênicas Usando STA-PUT velocidade de sedimentação

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October 9, 2013

DOI: 10.3791/50648-v

Jessica M Bryant^1,2, Mirella L Meyer-Ficca³, Vanessa M Dang¹, Shelley L Berger^1,4,5, Ralph G Meyer³

¹Department of Cell and Developmental Biology,University of Pennsylvania, ²Biomedical Graduate Studies,University of Pennsylvania, ³Department of Animal Biology and Center for Animal Transgenesis and Germ Cell Research,University of Pennsylvania, ⁴Department of Genetics,University of Pennsylvania, ⁵Department of Biology,University of Pennsylvania

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O método STA-PUT permite a separação das diferentes populações de células espermatogénicas com base no tamanho e densidade.

O objetivo geral deste procedimento é separar os diferentes tipos de células encontradas nos testículos. Primeiro, colha uma população mista de células do camundongo. Os testículos carregam as células e o gradiente BSA no aparelho de permanência.

Agora permita que as células sedimentem através do gradiente BSA. Em seguida, colete as frações e combine-as com base na composição celular. Em última análise, a sedimentação de velocidade com a permanência é usada para separar diferentes tipos de células dos testículos com base nas diferenças de tamanho e densidade.

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