16 de outubro de 2013
Ao longo dos últimos anos, novas endoscópios geração surgiram como importantes auxiliares de pesquisa de diagnóstico para a avaliação de colite murina e tumores colorectais. Apresentamos aqui um protocolo detalhado para a avaliação endoscópica de inflamação e tumores colo-rectal em ratos, bem como um novo sistema de pontuação que utiliza identificadores decimais para documentar a gravidade endoscópico de colite e tumores colorectais.
Olá, sou Tomohiro Kani, um visitante pH da Nintendo University em Tóquio, e sou Fabio Elli, diretor do Centro de Pesquisa em Saúde Digestiva, um caso Western Reserve University School of Medicine. Neste vídeo, descreveremos nossa metodologia para realizar colonoscopia em camundongos. Destaque a importância de se familiarizar com a anatomia endoscópica normal.
Descreva como solucionar problemas de forma eficaz durante a endoscopia para minimizar traumas e artefatos de imagem. E, finalmente, descreva nosso sistema de pontuação para a avaliação da inflamação intestinal no modelo mu eye de colite e câncer associado à colite. Obrigado pela vossa atenção.
Primeiro, configure o sistema de endoscopia para anexar o osciloscópio ao centro do sistema de vídeo e à fonte de luz. Esterilize o endoscópio e coloque uma seringa para insuflação de ar. Em seguida, ligue o sistema e ajuste O balanço de branco com o animal.
Devidamente anestesiado e contido, inicie o exame endoscópico. Amostras de biópsia podem ser obtidas conforme necessário. Após o escopo, aqueça o mouse com uma luz para recuperação no final.
O sistema de pontuação para avaliação da inflamação do cólon e do câncer de cólon associado ao cólon é explicado. Configurando o sistema de endoscopia. O sistema de endoscopia inclui o centro do sistema de vídeo, uma fonte de luz de xenônio e um gravador de vídeo.
Usamos um ureteroscópio humano para colonoscopia em camundongos. Nosso osciloscópio URFV é um osciloscópio de vídeo flexível que usa um sensor CCD. O diâmetro externo do tubo de inserção é de 3,3 milímetros e a extremidade distal é de 2,8 milímetros de diâmetro.
Para começar, conecte o osciloscópio ao centro do sistema de vídeo e à fonte de luz. Em seguida, esterilize o escopo e a superfície da lente com 70% de etanol. Em seguida, conecte uma seringa de três milímetros ao canal de trabalho.
Isso é usado para regular a quantidade de ar intraluminal com insuflação ou aspiração. Ligue o interruptor principal e configure o balanço de branco. Além disso, não se esqueça de configurar no modo NBI Dois, anestesiando o mouse.
Primeiro, demonstrarei a anestesia inalatória Usando isof flúor, usamos quatro a 5% de isof flúor para indução. Depois que o mouse parar de se mover, reduza a concentração para a dose de manutenção de um a 2% Contenha o mouse na mesa prendendo a cauda e as extremidades inferiores. A fita adesiva é especialmente importante para manter o mouse parado durante o escopo.
Além disso, injeção intraperitoneal de tribromo. O etanol pode ser usado para a anestesia. Três. Endoscopia As lesões perianais não fazem parte da avaliação endoscópica, mas são um achado importante e devem ser observadas antes da inserção e não devem ser confundidas com sangramento traumático.
Antes de inserir o revestimento do osciloscópio com lubrificante cirúrgico, certifique-se de não revestir o sensor CCD. Insira o escopo através do ânus. Essa inserção inicial deve ser o mais suave possível, pois a inserção cega pode danificar a mucosa colônica do cólon.
Acenda a luz e comece a gravar. Empurre a seringa de ar lenta e cuidadosamente para obter um campo de visão. Muita insuflação de ar pode matar a boca.
A presença de sangramento espontâneo deve ser avaliada quando o endoscópio é inserido no ângulo do reto ou do cólon. O manuseio ajusta a visão verticalmente e o controle de torque é para ajuste horizontal. A coordenação entre estes dois controlos é muito importante.
Observe a transparência. No cólon normal, a parede é transparente com vascularização normal e sem qualquer espessura. A transparência é definida como uma visibilidade transmural dos vasos ou órgãos extramuros.
O movimento repetitivo de inserção e retirada auxilia na avaliação no cólon normal. Vasos pequenos e grandes são visíveis durante o exame. Você pode tirar fotos ou amostras de biópsia conforme necessário.
Verifique a presença de sangramento de contato. Ao retirar o endoscópio, não é necessário raspar a mucosa intencionalmente. O modo de imagem de banda estreita enfatiza as estruturas finas dos vasos nas membranas mucosas.
O reto é cercado por músculos, enquanto o cólon não é fixado pelos tecidos circundantes. Devido a essa diferença anatômica, as vísceras extramurais não são visíveis no reto. Pelotas fecais Às vezes, estão presentes perto do ânus.
Eles podem ser removidos com insuflação de ar, no entanto, às vezes podem persistir e obstruir a visão endoscópica. Nesses casos, usaremos até um mil de enema PBS para lavar as fezes. As fezes geralmente são excretadas após alguns minutos.
A visão embaçada causada pela presença de manchas na lente também é um problema comum, especialmente no caso de colite ou sangramento. Nessa situação, tentamos limpar a lente com insuflação de ar. Este procedimento pode ser bem-sucedido na limpeza da lente sem a retirada do escopo.
O movimento peristáltico é uma das atividades fisiológicas normais do intestino. Como a insuflação de ar não é bem-sucedida na dilatação do lúmen durante o peristaltismo, você deve esperar até que a onda peristáltica passe. Número quatro, as amostras de biópsia de biópsia são obtidas usando uma pinça de biópsia flexível.
Os copos são abertos e fechados pela alça. Insira a pinça no canal de trabalho. Tenha cuidado para não perfurar o intestino.
Abra os copos em um tamanho adequado e coloque a ponta na área de interesse. Feche suavemente as xícaras e puxe com firmeza. Remova a amostra lavando com a solução adequada.
Número cinco, recuperação. Após o exame, aqueça o mouse até que ele se recupere. Usamos uma luz elétrica para aquecer seis pontos para inflamação do cólon.
Nosso sistema de pontuação consiste em quatro parâmetros, uma lesão perianal, dois, transparência da parede colônica, três sangramento intestinal e quatro lesões focais. Cada parâmetro pode ser pontuado de zero a três. A pontuação total máxima é 12.
Além disso, incluímos uma escala de unidades decimais que pode ser usada para destacar achados endoscópicos específicos. A descrição detalhada de cada parâmetro está disponível no manuscrito anexo. Aqui está um resumo número um, lesão perianal.
Esse achado deve ser observado antes da introdução do endoscópio no reto. Isso evita confusão com sangramento traumático. Uma pontuação de zero é normal.
A segunda pontuação é para secreção sanguinolenta. O escore três é para tecido de granulação ou prolapso retal. Dois.Transparência. Isso representa a capacidade de visualizar os vasos sanguíneos na parede do cólon e nas vísceras circundantes.
Uma pontuação de zero indica que os vasos sanguíneos são claramente visíveis. Marque um. Os pequenos vasos são parcialmente invisíveis, mas os grandes vasos são visíveis.
Marque dois. Pequenos vasos são invisíveis geralmente e mesmo grandes vasos não são claros. Pontuação três igual à pontuação dois e aparência espessa do cólon. Três.
Sangramento espontâneo deve ser diferenciado do sangramento de contato. Julgue de acordo. O escore um indica que o sangramento de contato é induzido pelo procedimento de escopo padrão suave, escore três.
Aviso de sangramento espontâneo ao entrar no cólon. Número quatro, lesão focal. Esses achados refletem condições locais que geralmente acompanham a inflamação.
Marque um. A placa é uma elevação plana coberta por mucosa aparentemente normal. Marque dois.
As erosões da área da extremidade vermelha marcam três. Ulceração erosões cobertas por material semelhante à fibrina. O NBI é útil para reconhecer isso.
Descritores decimais. Adicionamos três parâmetros adicionais e demos a eles pontuações decimais.0.1. Para escore de estenose 0,2 para ruptura intestinal ou escore de perfuração 0,5 para apresentação de caso de lesão tumoral caso um.
Rato com infecção por clostridium difficile. Tem transparência normal, mas erosão precoce. Pequena erosão é vista, mas a mucosa de fundo é normal.
Após observação cuidadosa, um leve edema ao redor dessa lesão é revelado. Também. Em outras partes, não há achados indicando a presença de inflamação. Caso dois.
Camundongo com colite induzida por DSS em uma dieta rica em gordura. Não transparência, sangramento espontâneo e estenose são observados neste caso. No início, o sangramento é visto.
É espontâneo. Aqui está uma restrição. Não é dilatado por insuflação de ar e o endoscópio não pode passar.
A mucosa de fundo está avermelhada e espessada. Além disso, o espancamento de contato ocorre aqui e ali. Indica a fragilidade do caso do cólon. Três.
Camundongo com colite DSS crônica, não transparência, espessura da parede e saliências semelhantes a tumores são vistos. Geralmente, a espessura da parede de colarinho branco é vista e a parede não é transparente. Esta é uma ulceração ao redor das saliências dos flexores esplênicos são notáveis.
Caso quatro. Camundongo com câncer associado à colite induzido com azoximetano e DSS. Tem múltiplos tumores e ulceração.
Uma grande lesão protrusa do tipo achatado está na parede direita e em uma área um pouco mais proximal, outra lesão do tipo plana inferior é vista. A estrutura da superfície é aparentemente diferente da mucosa normal. O NBI é útil para a detecção e diagnóstico em tal lesão.
Há uma grande ulceração geográfica coberta por material fibroso no reto. Obrigado por assistir.
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Este artigo apresenta um protocolo detalhado para realizar colonoscopia em camundongos, com foco na avaliação da inflamação intestinal e tumores colorretais. Os autores introduzem um sistema de pontuação inovador para documentar a gravidade da colite e dos tumores utilizando identificadores decimais.
A pontuação endoscópica validada em modelos murinos permite avaliação reprodutível e quantitativa da gravidade da colite e de tumores colorretais, apoiando diretamente a validação de alvos e a redução de riscos mecanicistas na pesquisa de doenças gastrointestinais. A integração da avaliação de inflamação e tumores em um único fluxo de trabalho aumenta a confiança preditiva e a continuidade translacional desde a descoberta inicial até estudos pré-clínicos. Sistemas padronizados de pontuação facilitam a comparabilidade entre estudos e a tomada de decisões em nível de portfólio na pesquisa e desenvolvimento de biofármacos.
Este sistema validado de pontuação endoscópica insere-se na continuidade entre descoberta e pré-clínico, permitindo testes de hipóteses, avaliação de compostos promissores e otimização de modelos translacionais na pesquisa de doenças gastrointestinais.