Contextual e Cued Medo Condicionado Teste Usando um sistema de análise de vídeo em Ratos

O teste de condicionamento contextual e agudo ao medo é um teste comportamental amplamente utilizado para avaliar a capacidade de Lawrence de aprender. Lembre-se de associações entre uma experiência agressiva e pistas ambientais. No entanto, neste teste existem algumas diferenças metodológicas entre o local de trabalho, o que pode resultar na dificuldade de comparação de dados e na duplicação de resultados.

Para obter dados mais estáveis e tivos, é importante padronizar o protocolo de teste o máximo possível. Nele demonstramos o protocolo do teste de campo. O teste de funcionamento do medo é um teste simples, sensível e confiável para avaliar sua memória.

Este teste é frequentemente usado para entender o mecanismo neurológico e molecular e subjacente ao aprendizado e à memória, e também para avaliar a função cognitiva de potenciais modelos de camundongos de transtornos psiquiátricos, como transtorno pós-estresse e esquizofrenia. No teste de comportamento voltado, que é medido como um índice de aprendizagem e memória é pontuado pela ização de observadores humanos, foram alguns sistemas automatizados para analisar o comportamento de uso automaticamente. Desenvolvemos um sistema de análise de imagem usando o programa de software baseado em imagem FG e imagem A.

Estamos distribuindo esse programa de software e ele pode ser baixado gratuitamente neste endereço. Neste, apresentamos nosso protocolo de teste e o sistema de análise automatizado. Primeiro, mostramos como proteger o operador do aplicativo como imagem do programa de software.

Em segundo lugar, demonstramos os protocolos detalhados do teste, incluindo teste de contexto de condicionamento e teste Q para dispositivo usando o sistema. Finalmente, apresentamos os resultados atuais que indicam que o sistema FD de imagem N pode produzir resultados altamente confiáveis. Agora vamos começar.

Comece no teste de condicionamento do medo rapidamente. Um rato é colocado em uma câmara com piso de grau. O OID é apresentado como um auditor.

Fila do auditor por 30 segundos. Depois disso, um choque de código elétrico é fornecido. Esse emparelhamento de uma fila de auditores e o choque no pé é dado três vezes para aumentar a associação entre a fila de auditores e o choque elétrico.

Durante o teste, o comportamento de congelamento é medido como um índice de aprendizado associado e memória injusta. Em segundo lugar, após 24 horas, o camundongo é colocado na mesma câmara de condicionamento e é pontuado pelo comportamento de pulga. Para medir contextualmente o medo de controle, o camundongo é então transferido para G de formato diferente sem qualquer fila auditiva e, posteriormente, a fila auditiva é apresentada.

Neste teste, o comportamento de congelamento é usado como um índice de memória de medo agudo. Durante o teste, o comportamento do mouse é registrado por meio de uma câmera conectada a um computador. O comportamento é julgado como congelamento ou não congelamento.

Pelo programa de software de imagem, o programa pode calcular a porcentagem de tempo de congelamento e tráfego de distância. Aqui, por exemplo, a análise de imagem é demonstrada durante o teste. As imagens ao vivo são capturadas em um comprimento por segundo.

A imagem do cria uma imagem binária de cada imagem ao vivo para cada par. Com chamas sucessivas, a quantidade de área pela qual o mouse se moveu é calculada pela imagem do programa. Quando a área está abaixo de um certo limite, o comportamento é considerado congelamento, que geralmente é definido como uma ausência completa de qualquer movimento, exceto para respiração e difícil de bater.

O comportamento de congelamento que dura menos do que o limite de tempo definido não é considerado congelante. O valor limite deve ser definido previamente para que produza o melhor ajuste entre os tempos de congelamento medidos pela imagem Z e as observações humanas. Quando a quantidade de área é igual ao limite ou X três Z, o comportamento é considerado não congelante.

Aqui demonstramos nosso protocolo de teste em camundongos usando este sistema de análise de vídeo. Neste protocolo, os operadores são construtivos em uma câmara quadrada de grade com grades de metal e descobertos com uma imagem de chumbo transparente. O FD pode distinguir o assunto escuro de um fundo branco em cada imagem de vídeo capturada.

Mas esse processo nos permite analisar o comportamento de congelamento do sujeito que a câmara precisa ser colocada em um piso branco para analisar o comportamento de camundongos pretos, bons ou pretos diretos. O comportamento de congelamento de camundongos de alumínio também pode ser analisado pela imagem D usando grades de metal preto Sob uma regra preta, luzes de diodo emissor de luz são presas à vela acima do aparelho. A regra da grade é iluminada em 100 telhados pelas luzes LED.

Um alto-falante conectado ao gerador de tom de ruído branco é montado na vela acima da tampa. Um ruído branco 55 é apresentado como uma fila auditiva. As grades são conectadas a um gerador de choque para fornecer choque elétrico de alimentos.

O teste de vento de choque é definido em 0,3 milhão de pares antes do início do teste. A intensidade da corrente na grade deve ser verificada por um metal porque o teste de choque pode ser diminuído por um acúmulo de fe e urina nos camundongos, a câmara de teste é colocada em tear à prova de som para minimizar o ruído externo. Durante o teste, a apelação está localizada em um som diferente daquele em que os testes de cone e contexto são realizados.

É composto por uma câmara que possui propriedades diferentes da câmara de cone. Fornecendo um contexto normal, é necessário alterar os códigos sensoriais o máximo possível para que o mouse perceba o contexto do Nobel como não relacionado à câmara de conting. Neste protocolo, o aparelho é uma câmara triangular acri com uma régua acri plana e o eletrodo transparente.

Um alto-falante é montado na vela acima da liderança para apresentar em ou três filas. Essa fila é a mesma sugestão que foi fornecida aos ratos no hawing. O nível de iluminação do piso é definido para estudar a aparência.

Cada câmara é um cubo com uma cabine de carga montada em vela, câmera de dispositivo para monitorar o comportamento do mouse. Antes do início de cada teste, as paredes e pisos de acrílico são limpos com uma lingueta, de modo que em água bruta super alta e as grades são limpas com etanol 70%. Para evitar um viés baseado no corte olfativo, as grades são limpas com Ethan em vez de água bruta super hype para prejudicar que as grades não deduzem sua condutividade elétrica devido aos últimos dois a quatro camundongos, Um pacote de casa em uma sala de espera com temperatura controlada para reduzir os possíveis aumentos de transporte de gaiola no comportamento e para adaptar os camundongos ao ambiente experimental.

A gaiola contendo os camundongos foi transferida para uma sala de espera à prova de som pelo menos 30 minutos antes do início de cada teste. Todos os experimentos devem ser realizados durante o mesmo período de tempo para minimizar as variações de comportamento que podem ser produzidas por testes em momentos diferentes. Os camundongos de cada grupo devem ser testados em contrapeso para reduzir os efeitos potenciais do tempo experimental.

Sob a ordem de teste do sujeito sobre o desempenho comportamental, a imagem D pode controlar um máximo de quatro aparelhos de teste de camundongos simultaneamente enquanto o pesquisador economiza tempo e digital para dedução nos efeitos potenciais do procedimento experimental no comportamento do camundongo. Antes do início da sessão contínua, execute o software aplicativo A FD. Selecione o menu de plugue FD referente a e FD online e defina os valores dos parâmetros definidos por passo da seguinte forma.

Etapa um, o ID do projeto especifica a pasta onde deseja armazenar a data dos arquivos. Etapa dois, tipo de nome da sessão. Qualquer palavra na caixa da sessão é a data experimental e o texto da referência a file em que a hora de início e a duração do ruído branco e do choque alimentar estão escritos na caixa de referência.

O texto de deferência para arquivo deve ser preparado na pasta de deferência na imagem, a pasta de antemão. Etapa três configurações de parâmetros. Insira os valores de parâmetro, como duração, tempo e critérios de congelamento, conforme mostrado no filme.

Etapa quatro, ID do assunto. Insira a identificação do assunto. Etapa cinco, as configurações da câmera contrastam o brilho e o contraste da imagem capturada.

Etapa seis, configurações de limite. Primeiro, para medir a distância percorrida a partir das imagens consecutivas, ajuste o valor principal do limite do programa, que é definido para segmentar as imagens em partículas pretas e fundo branco. A distância percorrida é calculada entre cada conjunto com coordenadas XY para o centro de gravidade com a partícula nas imagens consecutivas.

Do segundo ao principal comportamento das imagens consecutivas, apenas assumindo o valor extra x do programa que está definido para segmentar as imagens em partículas pretas sob o fundo e, em seguida, calcular a quantidade de área de regiões não sobrepostas entre partículas de qual par de janela de entrada de imagem consecutiva a região não sobreposta é mostrada. Altere os meios expressos para o valor na quantidade de valor da região deve estar abaixo do valor do grito ING quando o mouse mostrar o comportamento. Esses valores devem ser ajustados para que os dados por fadiga de imagem correspondam ao próprio esquadrão por humano.

Etapa sete, defina como campo de captura especificado o campo, qual câmara você deseja capturar depois de clicar com o botão retângulo na caixa de ferramentas para retangular ao redor do chão dela. Câmara na janela de imagem ao vivo. Em seguida, selecione o romance de câmara e clique no botão definir para finalmente clicar no botão completo.

Após a definição das configurações dos parâmetros, o teste preparatório deve ser feito usando mouses de prática antes do primeiro teste da data para determinar se o sistema de análise de imagem e quais geradores de choque de ruído funcionam com os problemas mova a gaiola de pente contém os mouses de prática para a escuridão de teste de som da escuridão adjacente à espera e coloque cada mouse na câmara de condicionamento imediatamente após colocar os mouses na câmara, clique na parte inferior inicial da imagem de Z.Os ratos podem explorar totalmente a câmara por 120 segundos. Depois. Um ruído branco como uma fila auditiva é apresentado por 30 segundos e durante os últimos dois segundos do som, um choque alimentar é dado aos ratos. Este procedimento é repetido três vezes na sessão para fortalecer a associação entre a fila e o choque alimentar.

As máscaras são deixadas com a câmara por 90 segundos após o último emparelhamento. Estabelecer ainda mais a associação entre o contexto da câmara e a experiência passiva. Após 480 segundos, o mouse é devolvido à gaiola inicial e a gaiola é devolvida à prateleira da sala de espera.

Após cada teste, limpe as câmaras e a grade com cuidado. Em seguida, clique no próximo botão de análise e repita a sessão nos mouses de teste. Aproximadamente 24 horas após o movimento preocupante, a gaiola continua para os ratos para uma sala de tear à prova de som.

O tear de espera pelo menos 30 minutos antes do início de cada teste. Imagem longa do e defina os valores dos parâmetros do software da mesma maneira que no condicionamento. No entanto, defina o tempo de duração para até 300 segundos e selecione 35 textos para arquivar para o teste contextual.

35 texto para arquivo está em branco. Coloque o mouse na câmara de condicionamento e clique na parte inferior inicial. Os camundongos podem explorar completamente a câmara por 300 segundos sem nenhuma apresentação de estímulo.

Após 300 segundos, colocou os ratos em sua gaiola doméstica e limpou as câmaras. Em seguida, clique na próxima análise inferior e repita o procedimento na imagem longa dos ratos de teste de D e defina os valores dos parâmetros da mesma maneira que no texto de referência contínua para arquivar para este teste e definir o tempo de duração de até 360 segundos. Este é um texto de referência a ser arquivado para este teste.

Coloque cada mouse na câmara triangular e clique no botão Iniciar da imagem Z.Os mouses devem explorar a câmara nos primeiros três minutos. Nem ruído branco nem choque no pé são apresentados. Esta câmara tem propriedades diferentes que fornecem um novo contexto e relacionadas à câmara contínua.

Nesta câmara normalmente deve se movimentar muito e não mostrar comportamento. No final dos primeiros três minutos, o ruído branco que é apresentado no Concho é fornecido aos ratos por três minutos. Durante a apresentação do auditor, o auditor enfileira os ratos ou exibe o comportamento escrito após 360 segundos de erupção, devolve os ratos à gaiola de casa e retorna a gaiola à prateleira da sala de espera.

Após o teste, limpe as câmaras com cuidado. Em seguida, clique na parte inferior da próxima análise e repita o procedimento usando os mouses de teste. Este vídeo mostra que a passagem do congelamento analisada pela imagem do sistema parece estar mais intimamente relacionada ao pensamento medido por um observador humano.

A observação foi confirmada pelos detalhes que mostraram que a porcentagem de locação medida por imagens físicas em cada teste foi altamente correlacionada ou pontuação de pensamento pelo observador humano. Além disso, este número demonstra que as diferenças entre as porcentagens de congelamento medidas por observações humanas e a imagem do sistema em sua imagem foram as menores. Esses resultados indicaram que a porcentagem de congelamento medida pela imagem do sistema foi semelhante às obtidas pela observação humana e que a precisão de medir a quantidade de razão pela imagem Z é alta. Okey.

Como você gostou? Como você pode ver no teste, a análise comportamental padrão pode ser realizada facilmente. Existem algumas dicas e pontos importantes para usar a imagem do sistema, então deixe-me perguntar a ika sobre isso. Okey.

Primeiro, como você se sentiu sobre o procedimento de teste da imagem do sistema? Acho que nosso procedimento de teste é muito simples e a imagem do sistema é uma ferramenta útil para medir a razão, o comportamento com precisão e rapidez. Qualquer pessoa pode facilmente usar um programa de software com um treinamento prévio Como resultado, este sistema pode ser usado para avaliar sua memória em muitos meses em um curto espaço de tempo, o que nos economizará tempo e mais tarde.

Entendo. Então, há algo que devemos ter cuidado ao realizar o teste? Sim, porque o operador que afirma que é importante obter a imagem mais nítida para medir com o comportamento com precisão, e por isso você deve ajustar o comprimento da câmera e as coisas de escrita belo.

Também no estudo do programa, você precisa definir os valores sexuais e os critérios de razão cuidadosamente para julgar se o comportamento pode ou não ser considerado como razão. É importante que o resultado tenha sido imediato, o programa como com o pensamento deles pela observação humana, como mostrado no presente resultado. Okey. Como você pode ver, este pode ser um artigo, forneça informações detalhadas sobre o procedimento de teste e o uso do programa de software.

Esperamos que este possa ser um artigo. Promova sua compreensão do teste e contribua para a padronização do protocolo.