Aorta ascendente constrição em ratos para a criação de sobrecarga de pressão Cardíaca Hipertrofia Modelo

Olá, sou Aji Kumar Gs da Divisão de Biologia de Doenças Cardiovasculares Raj Gandhi, centro de Biotecnologia da Índia. Estou trabalhando sob a orientação do processo karta e neste vídeo demonstraremos um procedimento passo a passo para a construção ascendente I OTE em ratos. Em nosso laboratório, utilizamos esse modelo anual para estudar a fisiopatologia e os mecanismos moleculares subjacentes na hipertrofia cardíaca e na insuficiência cardíaca progressiva.

Também usamos esse modelo para estudar a hipertensão pulmonar associada à esquerda à insuficiência cardíaca. Então vamos começar E estetizar o animal e mantê-lo em decúbito dorsal. Realize a intubação endotraqueal fazendo uma incisão na metade do caminho entre dois anéis traqueais e inserindo a cânula traqueal, que por sua vez está conectada a um ventilador de roedores.

Em seguida, faça uma incisão na pele de cerca de dois centímetros de comprimento na região esquerda do tórax, entre a segunda e a terceira costelas, e separe as camadas musculares. Para visualizar a constrição iota da porção ascendente do iota deve ser realizada usando um clipe de titânio de tamanho pequeno com um aplicador, opor-se às costelas e, em seguida, suturar as camadas musculares e a pele em um padrão interrompido. Após a retirada do tubo endotraqueal, feche o músculo traqueal, as camadas e a pele e permita que o animal se recupere.

O procedimento foi feito após a aprovação do comitê institucional de ética animal. Antes da cirurgia, desinfete o campo cirúrgico com álcool 70% e mantenha a almofada de aquecimento assepticamente. Mantenha o ventilador de roedores e a unidade de anestesia prontos para a cirurgia.

Esterilize os instrumentos cirúrgicos em autoclavagem. As principais ferramentas cirúrgicas para constrição I ótica ascendente são luvas estéreis, pinças de polegar, tesouras, lâminas cirúrgicas, clipes de titânio de tamanho pequeno e pinças de artéria aplicadora com gaze em caso de sangramento, um material de sutura de prolina porta-agulha, sutura de seda trançada e agulha. Mantenha o rato sob um guarda-chuva antibiótico por 24 horas e estetize os ratos em uma câmara de indução com flúor ISO 3% misturado com cem por cento de oxigênio.

Retire o pelo do decote e da região do peito esquerdo do rato e mantenha o animal no topo. Uma almofada de aquecimento. Mantenha a anestesia com 1,5% ISO de flúor para verificar o reflexo do pedal para a confirmação do sucesso da anestesia.

Desinfetar a área cirúrgica com solução de iodopovidona seguida de álcool a 70%. Repita o procedimento três vezes. Coloque uma cortina estéril sobre o animal, expondo apenas o local da cirurgia.

Faça uma incisão na pele paralela à traqueia e separe o tecido subjacente. Para expor a traqueia. Aplique um laço de fio de seda embaixo da traqueia e levante-o suavemente.

Faça uma incisão na metade do caminho entre dois anéis de cartilagem e insira a cânula traqueal. Conecte a cânula traqueal a um ventilador de roedores. O ventilador deve ser ajustado para uma frequência respiratória de 50 respirações por minuto.

Volume corrente 1,7 ml e inspiração vezes 0,6 segundos. Faça uma incisão na região esquerda do tórax entre a segunda e a terceira costelas. Os músculos intercostais devem ser separados camada por camada.

Deve-se tomar cuidado para evitar qualquer lesão nos pulmões ao fazer a incisão entre as costelas. Depois de retrair as costelas, localize cuidadosamente a porção ascendente do iota, manipulando suavemente o tecido adiposo. A seta indica a porção ascendente do iota.

Coloque um clipe de titânio de tamanho pequeno ao redor da iota ascendente com a ajuda de um aplicador, contraindo assim a iota de 50 a 60% do diâmetro original. Após a constrição ótica, reposicione o coração e aproxime as costelas com sutura de prolina Pause simultaneamente o ventilador por cerca de dois a quatro segundos para reinflar os pulmões. Publique os músculos em camadas com prolina, seguidos de pele com suturas de seda em um padrão de sutura interrompido.

Reduza gradualmente a frequência respiratória definida no ventilador e observe a respiração espontânea do animal. Remova a cânula traqueal assim que a respiração espontânea e regular for restabelecida. Agora a anestesia é mantida através do cone do nariz.

Feche a abertura entre os anéis traqueais com suturas de prolina. Feche as camadas musculares e a pele com suturas de prolina e seda, respectivamente. Aplique a solução de iodopovidona sobre a área cirúrgica como injeção de analgesia pós-operatória.

A solução salina intraperitoneal de Tremadol pode ser administrada intraperitoneal. Se os sinais de desidratação aparecerem gradualmente, diminua a anestesia para a posição desligada após a recuperação do animal, deslocado para a gaiola e administrado amoxicilina por via oral misturada com água potável por sete dias. A intensidade da sobrecarga de pressão produzida pela constrição da iota ascendente pode ser determinada observando o gradiente de pressão através do local de constrição I ótica por ecocardiografia bidimensional.

O painel esquerdo da figura mostra o eco Doppler de um rato contraído aórtico com um gradiente de pressão de 63 mm de mercúrio. E o painel direito representa um rato controlado por simulação sem gradiente de pressão significativo através do iota. O painel superior mostra a ecocardiografia do ventrículo esquerdo em modo M em ratos, oito semanas após a cirurgia, e o painel inferior representa o controle simulado, a espessura do septo interventricular e a espessura da parede posterior do ventrículo esquerdo foram significativamente aumentadas, enquanto o diâmetro interno do ventrículo esquerdo foi significativamente reduzido em ratos submetidos à constrição I ótica.

Em comparação com os grupos de controle operados de forma simulada, uma hipertrofia cardíaca significativa é observada em ratos submetidos a constrição I ótica ascendente após oito semanas de cirurgia em comparação com os grupos de controle operados de forma simulada. Olá, eu sou Raj. Aqui explicamos o procedimento para constrição de iota ascendente em ratos.

A principal vantagem desse modelo é o desenvolvimento gradual de hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca. Semelhante à situação clínica na hipertensão crônica nesta mãe, deve-se tomar cuidado na aplicação do clipe Titanic para constrição do iota. O mais importante é que a aplicação do clipe Titanic deve ser suficiente para produzir constrição crítica para o estresse esquerdo de 20 anos, mas não grave o suficiente para produzir insuficiência eletrônica aguda e edema pulmonar e deve-se tomar cuidado para evitar qualquer lesão nos pulmões ao fazer a incisão entre as costelas.

Os ventiladores devem ser colocados por três a quatro segundos em oposição às costelas, a fim de reinflar os pulmões. Então, obrigado por assistir a este vídeo e boa sorte com seus experimentos.