Compensatória Limb Uso e Avaliação Comportamental de Habilidade Aprendizagem Motora Após Lesão Sensorimotor Cortex em um modelo do rato de Acidente Vascular Cerebral Isquêmico

O objetivo geral deste procedimento é avaliar os efeitos comportamentais do uso compensatório de membros e um modelo de AVC em camundongos. Isso é feito determinando primeiro o membro de alcance preferido, permitindo que os camundongos alcancem qualquer um dos membros durante os procedimentos de modelagem. O segundo passo é estabelecer a habilidade motora treinando apenas o membro de alcance preferido na tarefa de alcance da matriz de massa.

Em seguida, o uso compensatório do membro é ensinado treinando camundongos para usar o membro menos afetado na matriz de macarrão. Tarefa de alcance iniciada quatro dias após lesão isquêmica unilateral contralateral ao membro preferido. A etapa final é avaliar o efeito do treinamento do membro menos afetado no resultado funcional do membro afetado pelo AVC.

Em última análise, o resultado funcional prejudicado do membro afetado é demonstrado por uma diminuição no número de alcances bem-sucedidos ao longo de vários dias de teste. Esse método pode ajudar a responder a perguntas-chave na pesquisa básica de AVC, incluindo quais são as implicações das intervenções comportamentais no resultado funcional. Geralmente, os indivíduos novos nesse método terão dificuldades por causa do tempo e dos pacientes necessários para ensinar aos ratos essa tarefa altamente qualificada.

O benefício é que a sensibilidade deste teste excede a de outros testes sensório-motores. Em camundongos. Comece o procedimento cortando pedaços de massa CAPI crus usando uma lâmina de barbear.

Em seguida, coloque os pedaços de massa na matriz de massa. Habitue um camundongo à câmara de teste por três sessões de cinco a 10 minutos cada, com uma matriz de massa completa colocada na frente e vários pedaços de massa na parte inferior para comer para moldar o alcance. Coloque o mouse na câmara de teste com uma matriz de massa completa na frente dele, como no treinamento de habitação.

Registre o número de trechos com cada membro e denote o número de trechos com o membro direito e esquerdo. Separadamente. Defina um alcance como a extensão de um membro através da abertura de alcance, de modo que o pulso quebre o plano da câmara, tornando as quatro patas visíveis fora da câmara. Não é necessário que o alcance seja direcionado ou entre em contato com a massa durante as sessões de modelagem.

Limite o mouse a um máximo de 10 alcances ou 10 minutos de tempo na câmara, o que ocorrer. Primeiro, para encorajar o mouse a alcançar. Segure vários pedaços de massa dentro da câmara através da abertura de alcance.

Desenhe os pedaços de massa quando o rato mostrar interesse, como cheirar ou morder, incentivando-os a alcançar os pedaços de massa em retirada. Se os ratos não mostrarem interesse na massa seca, o que as pontas da massa pedem em um pequeno copo de água morna para torná-las mais palatáveis. Sessões de modelagem também são usadas para determinar a preferência do membro.

Quando um camundongo exibe um mínimo de 70% de seus alcances diários com um único membro, esse membro quatro é definido como o membro preferido. Coloque um mouse na câmara de teste com uma matriz meio cheia na frente. Treine o mouse para alcançar apenas com seu membro preferido, preenchendo apenas o sinal da matriz contralateral ao membro preferido.

Durante esta fase do treinamento, deixe a porção da matriz correspondente ao membro menos afetado não preenchida para desencorajar tentativas de alcance com este membro. Administre uma vez ao dia, 15 minutos ou 100 sessões de treinamento de alcance para ajudar o camundongo a aprender com sucesso a direcionar e quebrar os pedaços de massa. Durante as primeiras sessões de treinamento, coloque uma pequena quantidade de pressão sobre os pedaços de massa enquanto eles estão na matriz, segurando outro pedaço de massa levemente, atrás e perpendicular ao alvo pretendido.

Essa pequena quantidade de suporte ajuda a estabilizar a massa fina e é mais fácil para o mouse segurar. Alcances bem-sucedidos exigem que o mouse alcance através da abertura. Pegue um pedaço de macarrão, quebre o pedaço de macarrão e retire-o da matriz.

Registre o número total de alcances até um máximo de 100 e o número e a localização dos pedaços de massa quebrados com sucesso. Neste procedimento. Treine o membro menos afetado começando quatro dias após o insulto isquêmico ao córtex motor contralateral ao membro de alcance preferido.

Assim como no treinamento de alcance pré-operatório, administre uma vez ao dia, 15 minutos ou 100 sessões de treinamento de alcance. Remova a primeira coluna de macarrão para a primeira semana de treinamento de membros menos afetados. Para garantir que as primeiras tentativas de alcance com o membro afetado não sejam bem-sucedidas, coloque o mouse na câmara de alcance com a matriz meio preenchida na frente.

Certifique-se de que a metade preenchida da matriz esteja oposta à metade preenchida pré-operatória, o que forçará o mouse a alcançar um membro menos afetado. Incentive o alcance com o membro menos afetado, reforçando a extensão desse membro através da abertura de alcance para fazê-lo. Quando o camundongo estender o membro menos afetado nos primeiros dias de treinamento, coloque um pequeno pedaço de macarrão no chão da câmara de alcance.

Independentemente de o alcance ser bem-sucedido ou não, conte apenas os alcances feitos com o membro menos afetado em direção ao total de 100 alcances. Não conte as tentativas furtivas com o membro afetado para o número total de trechos. Em seguida, retorne a coluna vertical mais medial da massa para a matriz após os primeiros sete dias de treinamento do membro menos afetado, registre o número total de trechos e o número e a localização dos pedaços de massa quebrados com sucesso para determinar o impacto do uso compensatório do membro menos afetado na recuperação funcional do membro afetado pelo AVC.

Teste o desempenho do membro afetado no PMRT. Após o treinamento de membros menos afetados. Colocar a matriz em frente à câmara orientada de forma idêntica aos procedimentos de treino pré-operatórios.

Isso forçará os camundongos a alcançar agora com seu registro de membro afetado por AVC, o número total de alcances e o número e localização de pedaços de massa quebrados com sucesso para comparar com os níveis de desempenho pré-AVC. Aqui são mostrados os padrões de alcance representativos com o membro afetado de camundongos antes e depois do insulto isquêmico unilateral do córtex motor sensorial oposto ao membro preferido. Anterior denota pedaços de massa localizados cada vez mais à frente do rato, enquanto lateral denota pedaços de massa localizados cada vez mais ao lado do rato.

As mudanças representativas do padrão do membro afetado ao longo dos dias de treinamento pós-operatório são mostradas aqui. Este gráfico mostra um exemplo representativo de como o treinamento de membros menos afetados afeta o desempenho do membro afetado no treinamento de PMRT do membro menos afetado por 15 dias após o insulto isquêmico unilateral do córtex sensório-motor prejudica o resultado funcional do membro afetado e prejudica a recuperação bem-sucedida ao tentar este procedimento. É importante lembrar de evitar treinar demais os ratos durante a fase de modelagem, deixando-os alcançar muitas vezes.

Caso contrário, a curva de aprendizado não refletirá com precisão o estágio inicial de aprendizado neste teste. Seguindo este procedimento. Outros métodos, incluindo imuno-histoquímica, mapeamento cortical e imagens in vivo, podem ser usados para investigar outras questões relacionadas ao impacto das intervenções comportamentais na neuroanatomia.