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DOI: 10.3791/51609-v
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This article presents a defined protocol for generating neural crest progenitor cells from human pluripotent stem cells. The method allows for the study of neural crest-related diseases and further differentiation into progeny cells.
O objetivo geral deste procedimento é gerar células progenitoras da crista neural a partir de células-tronco pluripotentes humanas em um protocolo curto, reprodutível e definido. Essas células podem então ser usadas para o estudo de doenças relacionadas à crista neural in vitro ou para a diferenciação contínua dessas células em células de progênie. Isso é feito primeiro colocando uma alta densidade de células-tronco pluripotentes humanas em uma monocamada no matrigel.
O segundo passo é diferenciar as células em células neuroepiteliais usando uma sequência definida e uma combinação de pequenas moléculas que afetam as principais vias de sinalização. Em seguida, as células neuroepiteliais são replaqueadas e ainda mais diferenciadas em células progenitoras da crista neural. A etapa final é isolar as células da crista neuro usando a classificação de células ativadas por fluorescência.
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