Name: O uso do Ex Vivo Chandler Circuito Aparelho para avaliar a biocompatibilidade de Modificados Condutas sangue Poliméricos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-20T16:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 15 s
Description: Aprenda a avaliar a biocompatibilidade de polímeros modificados com CD47 recombinante usando o modelo Chandler Loop de perfusão sanguínea ex vivo. Este método reduz a reação de corpo estrangeiro em implantes.

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1. Modificando poliméricos Superfícies com recCD47 NOTA:. O protocolo é resumido esquematicamente na Figura 1 A Figura 1A ilustra a geração de superfícies poliméricas tiol-reactivo Figura 1B ilustra a geração de recCD47 reactivo com tiol.. <ol><li> Dia 1 <ol><li> Prepara-se uma solução de PDT-BzPh (1 mg / ml) e bicarbonato de potássio (KHCO3) (0,7 mg / ml) em água estéril. Agita-se durante a noite a 4 ° C (protegido da luz). </li></ol></li><li> Dia 2 <ol><li> Cortar tubo polimérico em 40 centímetros de comprimento (o tempo suficiente para caber em torno de rodas rotativas). </li><li> Soak tubos em uma solução aquosa a 0,1% de hexacylpyridinium durante 90 minutos à temperatura ambiente num agitador ou em loop Aparelho Chandler. Lavar os tubos com 3x de água estéril após a 90 min de molho. </li><li> Acidifica-se a solução de PDT-BzPh do Dia 1 por adição de 15% de potássio monobásico aquoso (KH 2 </sub&gt; PO 4). Adicionar 50 ul de KH 2 PO 4 por ml de PDT-BzPh, formando uma solução micelar turvo. </li><li> Embeber os tubos na solução PDT-BzPh acidificada durante 40 minutos à temperatura ambiente num agitador ou no aparelho. </li><li> Lavar os tubos com ácido acético diluído (1: 1000), uma vez. </li><li> Expor os tubos a irradiação UV durante um período total de 60 minutos. Gire tubos de ¼ de volta a cada 15 min para irradiar toda a superfície. </li><li> Embeber os tubos com uma solução de 20 mg / ml de bicarbonato de potássio (KHCO3), durante 20 minutos à temperatura ambiente num agitador ou no aparelho. </li><li> Lavar os tubos com 3x de água estéril e armazenar a 4 ° C em água estéril. </li></ol></li><li> Dia 3 <ol><li> Dissolver 5 mg Sulfo- SMCC em 200 mL dimetilformamida (DMF) (Atenção: Realize em hotte). </li><li> Adicionar 50 ul da solução de Sulfo-SMCC, preparado no passo 1 a 0,1 mg / ml de solução de poli-lisina recCD47, e agita-se durante 60 min a rotemperatura om. </li><li> Durante 60 min de agitação, degas estéril Tampão fosfato de Dulbecco (DPBS) e reserve. </li><li> Purificar Sulfo- SMCC reagiu recCD47 usando um corte de coluna de dessalinização rotação 7K peso molecular por instruções do fabricante. Recolha de escoamento final (de alta qualidade tiol-reactivo recCD47) e diluir até ao volume necessário para revestir o interior do tubo com DPBS. </li><li> Lavar os tubos a partir do dia 2 com estéril, desgaseificadas DPBS 3x. </li><li> Reagir a superfície modificada dos tubos com uma solução de 20 mg / ml com tampão de tris (2-carboxietil) fosfina (TCEP) em DPBS desgaseificados durante menos de 2 minutos. Lavar os tubos com estéril desgaseificadas DPBS 4x. </li><li> Adicionar o recCD47 Sulfo-SMCC-reagido para os tubos e incubar durante a noite a 4 ° C num agitador ou em aparelhos. </li></ol></li></ol> 2 Imuno Quantificação de recCD47 em Superfícies Modificadas <ol><li> Lavar tubos adaptados para ser quantificado a partir do dia 3 sagacidadeh DPBS 3x. Tubos loja não utilizado para a quantificação em DPBS a 4 ° C. </li><li> Use uma biópsia por punção de 4 mm a fazer duplicados de amostras de tubo e colocar punções em poços de uma placa de 96 poços. </li><li> Preparar um controle negativo constituído por um tubo de amostra não modificada não tratados com o anticorpo de detecção. Preparar um anticorpo de controlo que consiste de um tubo de amostra não modificada tratados com o anticorpo de detecção. Preparar as amostras para ensaio de tubagem modificados tratados com o anticorpo de detecção. </li><li> Amostras do bloco com 0,4% de albumina de soro bovino (BSA) em DPBS durante 60 minutos à temperatura ambiente num agitador. </li><li> Após o bloqueio, aspirado BSA e enxágüe com Tris salina acrescida de 1% (TBST) 3x-20 Tween, 10 min cada um em uma coqueteleira. </li><li> Prepara-se uma diluição de trabalho de anticorpo em 0,4% de BSA de acordo com a diluição recomendada pelo fabricante para os imunoensaios. Diluir anticorpo CD47 humano B6H12-FITC a 1: 100 em 0,4% de BSA. </li><li> Adicionar 200 ul da diluição do anticorpo aos poços apropriados. Incubacontrolos negativos te com 0,4% de BSA. Incubar à temperatura ambiente durante 60 min, num agitador (proteger da luz). </li><li> Enxaguar com TBST 3x, 10 min cada um em uma coqueteleira. Aspirar o último enxágüe TBST e adicionar 200 DPBS ul para poços de amostra do tubo. </li><li> Recolhe-se o fluxo de passagem final, que é de alta qualidade tiol reactivos CD47 recombinante e diluir até ao volume necessário para revestir o interior dos tubos com DPBS. </li><li> Leia intensidade do sinal FITC utilizando um leitor de microplacas com FITC excitação (485 nm) e emissão (538 nm) configurações. </li><li> Calcular recCD47 ligado à superfície polimérica com base em valores de referência, correspondendo a autofluorescência e ligação não específica a partir da amostra de controlo sem anticorpo. </li></ol> 3. Chandler Circuito Aparelho Protocolo Procure Institutional Review Board (IRB) aprovação do protocolo de coleta de sangue e informado consentimento papelada antes do início da recolha de amostras de sangue humano. Obter informaçõesconfirmada através consentimento de um doador de sangue humano. NOTA: Um diagrama que representa o aparelho é mostrado na Figura 2. <ol><li> Encha banho de água com água destilada até aproximadamente 1/2 do diâmetro das rodas estão submersas. Adicionar branqueador suficiente para o banho de água para fazer uma solução de lixívia a 10%. Definir banho de água a 37 ° C e deixar equilibrar à temperatura. </li><li> Reunir placas de metal (mostrados na Figura 1B), tubos não modificada e modificada tubagem, e montar em torno de rodas de aparelhos, como mostrado na Figura 1C. Certifique-se de que os tubos se encaixa confortavelmente em torno da roda com a placa de metal no local. </li><li> Obter 30 ml de amostra de sangue utilizando um protocolo IRB-aprovado, em um frasco pré-cheio com 2 ml de citrato ou outro anticoagulante, e misturar por inversão para evitar a coagulação, uma vez que a amostra tenha sido recolhida. </li><li> Adicionar cerca de 10 ml de sangue para cada tubo, utilizando a válvula e uma seringa de metal, deixando um pouco de ar no tubo. Fixe a tampa da válvula e rotate durante 3 horas. </li><li> Drenar o sangue em um copo de resíduos tratados com uma solução de água sanitária a 10% (ou conforme exigido pela política institucional). </li><li> Gentilmente lavar interior tubulação com DPBS para remover todos os vestígios de sangue. Recolha de escoamento no copo de resíduos. Descarte de sangue em conformidade com a política institucional. </li><li> Desinfectar o aparelho e qualquer contato com sangue superfícies usando uma solução de água sanitária a 10% ou de acordo com a política institucional. </li><li> Amostras de processo para a microscopia eletrônica de varredura ou microscópio fluorescente, conforme descrito abaixo. </li></ol> 4. Microscopia fluorescente e contando celular <ol><li> Prepare uma solução de paraformaldeído 4% (PFA) (Atenção: Realize em hotte). </li><li> Incubar tubagem numa solução PFA a 4% durante a noite a 4 ° C. </li><li> Após incubação durante a noite, retire PFA 4% e enxaguar filmes muito suavemente com DPBS. </li><li> Corte o tubo em seções para expor a superfície do lúmen para a coloração. </li><li> Stainuma secção do tubo com algumas gotas de meios de montagem com o 4 &#39;, 6-diamidino-2-fenilindole (DAPI), durante 30 min à temperatura ambiente (proteger da luz). Após a coloração, lavar a tubulação muito suavemente com DPBS para reduzir o sinal DAPI fundo. </li><li> Imagem usando um microscópio de fluorescência equipado com um filtro de DAPI e câmara digital para contar o número de células em 9 campos cegamente seleccionados de vista sob uma ampliação de 200X. </li><li> Célula registro contagens por campo de visão e realizar análises estatísticas apropriadas para determinar a significância estatística dos resultados. </li></ol> 5. Microscopia Eletrônica de Varredura <ol><li> Prepare uma solução de glutaraldeído 2% (Atenção: Realize em hotte). </li><li> Incubar tubagem numa solução de glutaraldeído a 2% durante a noite a 4 ° C. </li><li> Após incubação durante a noite, lavar cuidadosamente o tubo de 3x com DPBS. </li><li> Prepare uma solução de 1% de tetróxido de ósmio (Cuidado: perigo de inalação grave! Use em hotte). </li><li> Incubar a tubagem para uma solução a 1% de tetróxido de ósmio durante 15 minutos à temperatura ambiente. </li><li> Lave o tubo de 3x com DPBS. </li><li> Prepara-se uma série de concentrações de etanol (25%, 50%, 75%, 95%, e 100% de etanol). </li><li> Desidratar a tubagem por incubação em série de concentrações de etanol. Incubar em 25%, 50%, 75%, e etanol a 95% durante 20 min cada. Incubar em etanol a 100% durante 30 min. </li><li> Ponto supercrítico secar a tubulação com CO 2 por 45 min para remover toda a umidade. </li><li> Secções tubulares montar em um esboço espécime com pasta de prata ou grafite. </li><li> Secções tubulares de revestimento com 12,5 nm de ouro-paládio. </li><li> Analisar em um microscópio eletrônico de varredura. </li></ol>

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</ol>

A pesquisa relatada nesta publicação foi apoiada pelo Instituto Nacional de Imagem Biomédica e Bioengenharia, sob o número prêmio R21 EB015612 (SJS), e do National Heart, Lung, and Blood Institute, sob o número prêmio T32 HL007915 (JBS e RJL), da National Institute of Health.

A química fotoativação (resumidos na Figura 1) permite a modificação de praticamente qualquer superfície de polímero que tem hidrocarbonetos suficientes para facilitar PDT-BzPh apego e irradiação UV subseqüente ao photo-ativar o PDT-BzPh. Funcionalização da superfície polimérica com grupos tiol reactivos permite a subsequente ligação de uma série de moléculas de interesse testáveis. Em nossos estudos específicos que escolhemos recombinante CD47 11-13. A conjugação química particular que utili...

Muitos procedimentos clínicos, tais como a circulação extracorpórea e diálise renal, requerem o uso de condutos de sangue poliméricas e são frequentemente associados com complicações pós-procedimento 1. Quando perfundido com sangue, estes polímeros ilícito a reação de corpo estranho (FBR), resultando na adsorção de proteínas do sangue e plaquetas, a adesão de monócitos / macrófagos e liberação de citocinas pró-inflamatórias, o que contribui para complicações pós-procedimento e / ou 2,3 falha do dispositivo. Assim, estratégias para abordar esta questão continuar a ser uma área importante e contínuo de pesquisas em biomateriais. Os pesquisadores têm tentado resolver este problema modificando sangue entrar em contato com as superfícies com bioativos ou bio-inerte moléculas 4-6. A investigação no nosso laboratório tem-se centrado em acrescentando CD47 recombinante (recCD47) a biomateriais poliméricos como uma estratégia para mitigar o FBR e aumentar a eficácia destes materiais. CD47 é uma transmembr expressa ubiquamenteane proteína com um papel conhecido na evasão da resposta imune, conferindo status de &quot;self&quot; em cima de expressar as células 7-10 e mostra a promessa de conferir biocompatibilidade quando anexado a superfícies poliméricas 11-13. Sinal-alfa proteína reguladora (SIRPα), o receptor cognato para o CD47, e um membro do motivo inibidor de imunorreceptores baseado em tirosina (ITIM) molecular contendo família de proteínas transmembranares, é expresso em células de origem mielóide 14. Nós já anteriormente demonstrado que a CD47, por meio de sinalização celular mediada SIRPα, sub-regula as respostas imunitárias a de poliuretano (PU) e de cloreto de polivinilo (PVC) em in vitro, ex vivo e in vivo em modelos de 11-13. Central de nossas investigações é uma relativamente nova química fotoactivação, aqui descrito, em que os grupos tiol reactivos quimicamente são covalentemente anexado ao tubo polimérico fazendo reagir o tubo com um polímero multifuncional (PDT-BzPh), composto de 2-piridilditio (PDT), a benzofenona fotoreactivo (BzPh) e uma polialilamina modificado por carboxi 11-13. A redução dos grupos PDT covalentemente anexas com tris (2-carboxietil) fosfina (TCEP) 11 produz uma superfície que pode ser tiolado subsequentemente reagido com porções terapêuticas. Aqui e anteriormente detalhada 12,13, recCD47, adicionalmente modificado com a adição de uma cauda poli-lisina C-terminal de 12,13, é feito reagir com sulfossuccinimidil-4-[N -maleimidomethyl] ciclo-hexano-1-carboxilato (sulfo-SMCC) durante 1 h para gerar grupos tiol-reactivo, que permite a formação da ligação entre o tubo monossulfureto e recCD47 11. A capacidade anti-inflamatória das superfícies funcionalizadas CD47 foi testado, ex viv o, utilizando o Aparelho de Chandler loop com sangue humano total, que foi inicialmente descrita em 1958 como um modelo in vitro da coagulação trombótica 15. O aparelho baseia-se numasistema de tubos fechado parcialmente cheio com ar e um motor rotativo para fazer circular o sangue através da tubagem 15. Este modelo experimental, proporciona a oportunidade de estudar o efeito da exposição a sangue sobre superfícies modificadas e não modificadas, bem como o efeito destas modificações de superfície sobre a fisiologia das células do sangue. recCD47 pode ser anexado a uma variedade de superfícies de polímeros, utilizando química de fotoactivação este, e a sua capacidade anti-inflamatória pode ser avaliada utilizando um modelo clinicamente relevante ex vivo imitando perfusão do sangue sobre as superfícies poliméricas 11,12. Condutas de sangue grau clínico modificados com recCD47 mostram significativamente menos de plaquetas e ligação de células inflamatórias, em comparação com os polímeros não modificados quando expostos a sangue humano no dispositivo. Uma descrição passo-a-passo do presente processo de modificação é detalhado abaixo.

<table><tbody><tr><td>16% Paraformaldeído (PFA)</td><td>Thermo Scientific</td><td>58906</td><td>Atenção! Uso em capela</td></tr><tr><td>de exaustão 25% Glutaraldeído</td><td>VWR</td><td>AAA17876-AP&nbsp;</td><td>cuidado! Uso em capela de exaustão</td></tr><tr><td>2-piridilditio, benzofenona (PDT-BzPH)</td> <td>Sintetizado em laboratório</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Albumina de soro bovino (BSA)</td> <td>Sigma</td><td>A3059-100G</td><td></td></tr><tr><td>Citrato</td><td>Sigma</td><td>S5770-50ML</td><td></td></tr><tr><td>Câmera digital</td><td>Leica</td><td>DC500</td><td>Fora de produção</td></tr><tr><td>Dimetilformamida (DMF)</td> <td>Sigma</td><td>270547-100ML</td><td>Atenção! Uso em capela</td></tr><tr><td>de exaustão Dulbecco' s Phosphate Buffered Saline (DPBS)</td><td>Gibco/Life Technologies</td><td>14190-136</td><td></td></tr><tr><td>Microscópio Fluorescente</td><td>Nikon</td><td>TE300</td><td></td></tr><tr><td>Ácido Acético Glacial</td><td>Fisher Scientific</td><td>A38-212</td><td>Cuidado! Use em capela de exaustão</td></tr><tr><td>Humana CD47 (B6H12) - Biotecnologia Santa Cruz do anticorpo de FITC</td><td></td><td>SC-12730</td><td></td></tr><tr><td>Osmium Tetroxide</td><td>Acros Organics</td><td>197450050</td><td>Cuidado! Uso em capela de exaustão</td></tr><tr><td>Bicarbonato de potássio (KHCO3)</td><td>Sigma</td><td>237205-100G</td><td></td></tr><tr><td>Fosfato de potássio monobásico (KH2PO4)</td>Tubo de PVC <td>Sigma</td><td>P5655-100G</td><td></td></tr><tr><td>(Kit de Procedimento Cardiovascular)</td><td>Terumo Cardiovascular Systems</td><td>60050</td><td>A maioria dos tubos de grau clínico funcionará</td></tr><tr><td>Elétron de varredura Microscópio</td><td>JEOL</td><td>JSM-T330A</td><td></td></tr><tr><td>Cloreto de Sódio (NaCl)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP358-212</td><td></td></tr><tr><td>Leitor de Microplacas</td><td>Molecular Devices</td><td>Spectramax Gemini EM&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Sulfo-SMCC</td><td>Sigma</td><td>M6035-10MG</td><td>Sensível à Umidade!</td></tr><tr><td>tris (2-carboxietil) fosfina (TCEP-HCl)</td><td>Thermo Scientific</td><td>20491</td><td></td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Bio-Rad</td><td>170-6531</td><td></td></tr><tr><td>Vectashield com DAPI</td><td>Fisher Scientific</td><td>H-1200</td><td>Sensível à luz!</td></tr><tr><td>Colunas de Dessalinização Zeba Spin &ndash; 7 K MWCO</td><td>Thermo Scientific</td><td>89891</td><td></td></tr></tbody></table>

o uso do ex vivo chandler circuito aparelho para avaliar a biocompatibilidade de modificados condutas sangue poliméricos

The Use of the Ex Vivo Chandler Loop Apparatus to Assess the Biocompatibility of Modified Polymeric Blood Conduits

A reacção de corpo estranho ocorre quando uma superfície sintética é introduzida no corpo. Caracteriza-se por adsorção de proteínas do sangue e a subsequente ligação e activação de plaquetas, monócitos / macrófagos de adesão, e os eventos de sinalização celular inflamatório, levando a complicações pós-procedimento. O Aparelho Chandler laço é um sistema experimental que permite aos investigadores a estudar as interacções celulares e moleculares que ocorrem quando grandes volumes de sangue são perfundidos sobre condutas poliméricos. Para esse efeito, o aparelho tem sido utilizado como um modelo ex vivo, permitindo que a avaliação das propriedades anti-inflamatórias de várias modificações da superfície do polímero. Nosso laboratório mostrou que condutas de sangue, covalentemente modificadas via química fotoativação com CD47 recombinante, pode conferir biocompatibilidade de superfícies poliméricas. Acrescentando CD47 para superfícies poliméricas pode ser um meio eficaz para promover a eficácia das condutas de sangue poliméricos. Seuein é a metodologia que detalha a química fotoativação usado para acrescentar CD47 recombinante para condutas de sangue poliméricos clinicamente relevantes e com o uso do laço Chandler como um modelo experimental ex vivo para examinar interações sangue com a CD47 modificado e controle de condutas.

Gerando superfícies poliméricas tiol-reactivo por meio do uso de PDT-BzPh e TCEP juntamente com tiol-reactivo recCD47 poli-lisina usando SMCC permite a fixação de recCD47 a superfícies poliméricas. O processo de modificação é resumida esquematicamente na Figura 1. A conveniência deste processo de modificação é que ele pode ser aplicado a muitas proteínas diferentes e as diversas superfícies poliméricas diferentes, assumindo que a proteína pode ser modificado com grupos quimicamente reactivos, tais como ...

A exposição do sangue a condutos sanguíneos poliméricos inicia a reação de corpo estranho que tem sido implicada em complicações clínicas. Aqui, o Chandler Loop Apparatus, uma ferramenta experimental que imita a perfusão sanguínea através desses condutos, é descrito. O apêndice do CD47 recombinante resulta em diminuição da evidência da reação de corpo estranho nesses condutos.

O uso do Ex Vivo Chandler Circuito Aparelho para avaliar a biocompatibilidade de Modificados Condutas sangue Poliméricos

The foreign body reaction occurs when a synthetic surface is introduced to the body. It is characterized by adsorption of blood proteins and the ...

O objetivo geral do experimento a seguir é avaliar a biocompatibilidade de polímeros modificados com CD 47 recombinante usando o modelo Chandler Loop de profusão de sangue. Isso é conseguido modificando primeiro os polímeros com CD 47 recombinante. Usando a química de fotoativação como uma segunda etapa, polímeros modificados são expostos ao sangue humano no Chandler Loop para imitar a perfusão sanguínea sobre os materiais implantados.Em seguida, as células anexadas são fixadas e coradas para contar o número de células aderidas como medida de biocompatibilidade. Os resultados mostram que o CD 47 recombinante promove a biocompatibilidade dos polímeros e diminui a rejeição de corpo estranho com base na observação de que significativamente menos células aderem aos polímeros modificados com CD 47 recombinante em comparação com os polímeros não modificados. Este método pode responder a questões-chave no campo dos biomateriais, como evitar a rejeição de dispositivos médicos implantados.As implicações desta técnica se estendem para a prevenção de falhas do dispositivo implantável porque o CD 47 recombinante se mostra promissor na promoção da biocompatibilidade e na prevenção da resposta d

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioengenharia

Um método para semeadura de titânio de sangue entrar em contato com biomateriais com células autólogas e biocompatibilidade teste é descrito. Este método utiliza células progenitoras endoteliais e tubos de titânio, semeadas em poucos minutos de implante cirúrgico em suínos as cavas. Esta técnica é adaptável a muitas outras implantáveis ​​dispositivos biomédicos.

Autólogas progenitoras endoteliais Cell Technology Semear e Teste de biocompatibilidade para dispositivos Cardiovascular em Modelo Animal Grande

Um método para a cultura de uma monocamada de células endoteliais em toda a superfície interior 3D inteiro de um dispositivo micro com microvascular de tamanho canais (= 30 mm) é descrito.

A microfluídica Endothelialized para estudo das interacções microvasculares em Doenças Hematológicas

Câmaras de fluxo microfluídicos gravados por fotolitografia e fabricada a partir de PDMS são aplicados para sondar os resultados funcionais associados com disfunção CE e inflamação. Numa experiência representativa, a capacidade de tensão de cisalhamento diferencial para modular a adesão celular monocítica a citocina activado CE monocamadas é demonstrada.

On-Chip fenotipagem endotelial Inflamatória

O dispositivo de câmara de fluxo tridimensional é a...

Um dispositivo de câmara de fluxo tridimensional Novel para estudar Chemokine dirigido extravasamento de células circulantes fisiológicos sob condições de fluxo

Aqui, nós apresentamos um protocolo que permite ao investigador para avaliar a dinâmica de recrutamento de leucócitos ex vivo, ligando uma câmara revestida com moléculas de adesão endoteliais derivados de para o sistema circulatório de um rato. Este método oferece vantagens significativas, uma vez que permite a avaliação de leucócitos em condições biológicas relativos.

Avaliando interação leucócito-endotélio em condições de fluxo em um Ex Vivo Autoperfused Microflow Câmara Assay

Apresentamos um modelo in vitro que permite o estudo e a análise de coagulação em inteiro, sangue não anticoagulado. Anticoagulação no sistema depende do efeito anticoagulante natural das células endoteliais saudáveis e ativação de células endoteliais resultará na coagulação.

Avaliação das propriedades das células endoteliais utilizando cultura de células 3D e sangue não anticoagulado anticoagulantes e anti-inflamatório

Descrevemos um in-house projetado em vitro fluxo modelo de câmara, que permite a investigação de adesão bacteriana ao enxerto de tecidos.

Um modelo In Vitro de um sistema de perfusão paralelo-placa para estudar a aderência bacteriana para enxertar tecidos

Este protocolo descreve uma avaliação abrangente da hemocompatibilidade de dispositivos de contato com o sangue usando implantes neurovasculares cortados a laser. Um modelo de loop de fluxo com sangue humano fresco e heparinizado é aplicado para imitar o fluxo sanguíneo. Após a perfusão, vários marcadores hematológicos são analisados e comparados aos valores obtidos diretamente após a coleta de sangue para avaliação da hemocompatibilidade dos dispositivos testados.

Teste de hemocompatibilidade de implantes de contato com o sangue em um modelo de loop de fluxo imitando o fluxo sanguíneo humano

Apresentado aqui é um protocolo para um modelo de loop hemodinâmico in vitro padronizado. Este modelo permite testar a hemocompatibilidade de tubos de perfusão ou stents vasculares de acordo com a norma ISO (Organização Internacional para Padronização) 10993-4.

Um modelo de loop hemodinâmico in vitro para investigar a hemocitocompatibilidade e ativação celular hospedeira de dispositivos médicos vasculares

O objetivo deste protocolo é executar uma co-cultura dinâmica de macrófagos humanos e miofibroblasts em andaimes eletroscarados tubulares para investigar a regeneração de tecidos conduzidos por materiais, usando um bioreator que permite o desacoplamento do estresse da tesoura e do estiramento cíclico.

Um Bioreator multi-cue para avaliar a capacidade inflamatória e regenerativa de biomateriais sob fluxo e estiramento

Este protocolo permite a quantificação in vivo da complacência venosa e da distensibilidade usando cateterismo e angiografia 3D como procedimento de sobrevida, permitindo uma variedade de aplicações potenciais.

Quantificando a complacência e a distensibilidade da veia cava inferior em um modelo ovino in vivo usando angiografia 3D

Aprenda a avaliar a biocompatibilidade de polímeros modificados com CD47 recombinante usando o modelo Chandler Loop de perfusão sanguínea ex vivo. Este método reduz a reação de corpo estrangeiro em implantes.

O uso do Ex Vivo Chandler Circuito Aparelho para avaliar a biocompatibilidade de Modificados Condutas sangue Poliméricos

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