Name: Preparação tecido doador de córnea para Membrana de Descemet endotelial Keratoplasty (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Aprenda a preparar tecido endotelial de DMEK para ceratoplastia endotelial com dissecção manual controlada. Este método seguro e reprodutível separa a membrana de Descemet do estroma corneano doador.

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1 Configuração de Estéril Campo <ol><li> Don traje adequado incluindo boné e máscara. Use óculos de proteção quando na sala de processamento. </li><li> Prepare a área de processamento. Quando se utiliza um local de tratamento, manter o funcionamento contínuo do ventilador para criar uma pressão positiva no quarto. </li><li> Reúna todos os suprimentos. Verifique as datas de validade, integridade da embalagem, e indicador de esterilização. </li><li> Lavar as mãos e vestir luvas não esterilizadas. </li><li> Abra os kits estéreis para estabelecer um campo estéril. Ao utilizar uma sala de processamento, colocar os kits em cima da mesa e assepticamente abrir os wraps. Não utilizar os exteriores 1 ½ polegadas do envoltório como parte do campo estéril como este segmento é considerado não esterilizado. </li><li> Utilizando uma técnica asséptica, aberto e soltar itens estéreis sobre campo estéril, a menos que já fazem parte do pacote premade. </li><li> Mover microscópio de modo que seja acima do campo estéril, ligar fonte de luz de microscópio, e ajustar oculares como necessário. </li><li> OBTtecido da córnea ain a ser desmontado (em meio de preservação) e coloque ao lado da área de processamento estéril preparado. Solte a tampa da câmara de visionamento e deixe descansar em cima de ver a base da câmara sem fios envolvidos. Descarte as luvas não esterilizadas. </li><li> Abra um par de luvas estéreis e bata esterilizada com uma toalha. </li><li> Realize paramentação. Revesti-vos de avental estéril, em seguida, luvas estéreis. </li><li> Caixas de instrumento aberto para que todos os suprimentos são acessíveis. Abrir humidade cortina impermeável para criar a área de trabalho. </li><li> Anexar agulha para uma seringa de 5 cc. Utilizando uma tesoura cirúrgica, preparar a agulha G 30, por colocação de uma curva a 1 mm do bisel, e outra curva a 1 mm da base (de modo a formar uma forma de &quot;S&quot;). </li><li> Montar a seringa de vidro para o corante azul de tripano, colocando o êmbolo para dentro da seringa e o dedo de aperto do êmbolo. Anexar cânula. </li><li> Fixe a cânula ao frasco de solução salina balanceada (BSS). </li><li> Separe o soco trephine do bloco de vácuoe reserve. O centro do bloco de vácuo no interior do campo de visão do microscópio. </li><li> Traga o bloco de vácuo em foco, ajustando as configurações de microscópio. </li></ol> 2 Processo de Preparação tecido do doador <ol><li> Levante a tampa da câmara de visualização utilizando quadrado folha como uma barreira. Com a mão oposta e usando uma pinça, segure suavemente córnea, esclera rim para remover córnea. Recoloque a tampa da câmara de visualização. </li><li> Completamente deprimir a seringa de sucção, em seguida, coloque o lado epitelial da córnea para baixo no bloco de vácuo e garantir que ele está centrado. (Figura 1) </li><li> Gentilmente menor Lugares para o bloco de vácuo com as mensagens de orientação. Envolver-se vácuo, liberando lentamente pistão da seringa de sucção. Remova o anel de estar e reserve. (Figura 2). </li><li> Realize uma trepanação parcial para marcar através da membrana de Descemet. </li><li> Ajuste o zoom e focagem do microscópio de modo que o tecido é bem visualizado. </li><li&gt; Inclinação do bloco de vácuo e usar uma lança colocada zaragatoa estéril no limbo para remover o excesso de meio. (Figura 3) </li><li> Coloque mancha suficiente no limbo para corar a borda da membrana de Descemet marcados. Permitir que a mancha de permanecer no endotélio de 60-90 seg. (Figura 4) </li><li> Remover manchas: <ol><li> Inclinação do bloco de vácuo para verter a mancha da córnea e na almofada de gaze. </li><li> Use as lanças cirúrgicas para remover o excesso de corante da área do limbo da córnea, tomando cuidado para não tocar no endotélio. (Figura 5) </li></ol></li><li> Use algumas gotas de BSS para enxaguar a córnea de solução de coloração, e lanças swab estéril para remover o excesso de BSS. (Figura 6) </li><li> Colocar 1-2 gotas de BSS no aro esclerótica para impedir o tecido de secagem. Repita conforme necessário durante todo o procedimento. </li><li> Realize dissecação parcial da membrana de Descemet: <ol><li> Começando onde a tubulação se conectars para o bloco de vácuo, com a pinça aberta, colocar uma ponta na extremidade da marca de pontuação e membrana e endotélio suavemente separado de Descemet longe do estroma. (Figura 7). </li><li> Membrana separado de Descemet e endotélio não superior a 1 mm da margem marcou e continuar a dissecção de 360 ​​° ao redor. (Figura 8). </li><li> Nota localização de quaisquer rasgos micro colocando um ponto no bloco de vácuo, com o marcador de pele. NOTA: Se a trefina não penetrar completamente através da membrana de Descemet, utilizar a borda chanfrada da agulha G 30 preparado para completar o marcador através da membrana de Descemet, quando necessário, seguida de uma segunda aplicação de coloração conforme a necessidade. Se adesividade da membrana de Descemet está impedindo o esvaziamento parcial, remova o endotélio fora da área trepanação, conforme necessário. </li></ol></li><li> Use uma pinça para remover quaisquer etiquetas endoteliais que se sobrepõem a marca de pontuação. </li> &lt;li&gt; Considere o local de micro lágrimas marcadas anteriormente e girar o bloco de vácuo para que o maior é às 6 horas. Isso vai se tornar a dobradiça da tampa. </li><li> Usando a pinça, segure membrana de Descemet em 12 horas. Suavemente separar a membrana de Descemet do estroma por raspagem para a dobradiça. Criar a dobradiça parando a separação 2 mm da marca de pontuação. NOTA: bordas periféricas de retalho vai começar a rolar durante a separação. (Figura 9). </li><li> Cuidadosamente, coloque a tampa de volta no lugar no estroma. Use BSS e swab lanças para unscroll o endotélio e devolvê-lo à sua posição original. (Figura 10A-C) </li><li> Remover líquido residual entre a membrana de Descemet eo estroma com lanças swab estéril de modo a aba fica na posição. (Figura 11) </li><li> Use lanças swab estéril para absorver o excesso de umidade da esclera perto da dobradiça. Use o marcador pele para desenhar uman arrowhead na esclera aro que aponta para o centro da articulação, remover o excesso de tinta usando uma lança zaragatoa estéril. (Figura 12) </li><li> Soltar vácuo pressionando o êmbolo da seringa ligado ao bloco de vácuo. Enquanto o vácuo é desengatada, fórceps para remover a córnea a partir do bloco de vácuo. </li><li> Levante a tampa da câmara de visualização utilizando quadrado folha como uma barreira. Coloque a córnea na câmara de visualização, lado endotelial, e substituir a tampa da câmara de visualização. </li><li> Repita os passos acima de procedimento com o companheiro de córnea, se for o caso. Use gaze para limpar o bloco de vácuo, antes de processar o segundo tecido. </li><li> Apertar a tampa (s) da câmara de visualização e remover o tecido da área de processamento. </li><li> Quebrar o campo estéril pela eliminação de itens de acordo com o Plano de Gerenciamento de Resíduos de Risco Biológico. Retire as luvas contaminadas e vestido. Lavar as mãos e vestir luvas não esterilizadas. </li><li> Realizar pós-corte de avaliação com lâmpada de fenda e microscopia especular da córnea (s)e registrar os resultados. </li></ol>

<ol><li>Fernandez, M., Afshari, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Keratoplasty%3A+From+DLEK+to+DMEK%5BTitle%5D)+AND+%22Middle+East+African+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Keratoplasty: From DLEK to DMEK.</a> Middle East African Journal of Ophthalmology. 17 (1), 5-8 (2010).</li>
<li>Kruse, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Stepwise+Approach+to+Donor+Preparation+and+Insertion+Increases+Safety+and+Outcome+of+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">A Stepwise Approach to Donor Preparation and Insertion Increases Safety and Outcome of Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li>
<li>Dapena, I., Moutsouris, K., Droutsas, K., Ham, L., van Dijk, K., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+%27No-Touch%27+Technique+for+Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Standardized 'No-Touch' Technique for Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty.</a> Archives of Ophthalmology. 129, 88-94 (2011).</li>
<li>Tourtas, T., Laaser, K., Bachmann, B., Cursiefen, C., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet+Membrane+Endothelial+Keratoplasty+versus+Descemet+Stripping+Automated+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Descemet Membrane Endothelial Keratoplasty versus Descemet Stripping Automated Endothelial Keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 153 (6), 1082-1090 (2012).</li>
<li>Guerra, F., Anshu, A., Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Keratoplasty%3A+fellow+eyes+comparison+of+Descemet+stripping+automated+endothelial+keratoplasty+and+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Endothelial Keratoplasty: fellow eyes comparison of Descemet stripping automated endothelial keratoplasty and Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (12), 1382-1386 (2011).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%222012+Eye+Banking+Statistical+Report%3A+Surgical+Use+and+Indications+for+Corneal+Transplant+Statistical+Report+Analysis%22">2012 Eye Banking Statistical Report: Surgical Use and Indications for Corneal Transplant Statistical Report Analysis</a>. , Eye-Bank Association of America. (2012).</li>
<li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet%27s+stripping+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Descemet's stripping endothelial keratoplasty.</a> Current Opinion Ophthalmology. 18 (4), 290-294 (2007).</li>
<li>Woodward, M., Titus, M., Mavin, K., Shtein, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+Donor+Tissue+Preparation+for+Endothelial+Keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Corneal Donor Tissue Preparation for Endothelial Keratoplasty.</a> Journal of Visualized Experiments. (64), e3847(2012).</li>
<li>Price, M., Price, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet%27s+membrane+endothelial+keratoplasty+surgery%3A+update+on+the+evidence+and+hurdles+to+acceptance%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Descemet's membrane endothelial keratoplasty surgery: update on the evidence and hurdles to acceptance.</a> Current Opinion Ophthalmology. 24 (4), 329-335 (2013).</li>
<li>Venzano, D., Pagani, P., Randazzo, N., Cabiddu, F., Traverrso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Descemet+Membrane+air-bubble+separation+in+donor+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cataract+and+Refractive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Descemet Membrane air-bubble separation in donor cornea.</a> Journal of Cataract and Refractive Surgery. 36 (12), 2022-2027 (2010).</li>
<li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPrice%2C+F+%22DSEK%3A+What+you+need+to+know+about+endothelial+keratoplasty%22">DSEK: What you need to know about endothelial keratoplasty</a>. , SLACK Inc.. Thorofare, NJ. (2009).</li>
<li>Studeny, P., Sivekova, D., Lieheova, K., Vokrojova, M., Kuchynka, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hybrid+technique+of+lamellar+keratoplasty+%28DMEK-S%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Hybrid technique of lamellar keratoplasty (DMEK-S).</a> Journal of Ophthalmology. 2013, 2013.254383(2013).</li>
<li>Muraine, M., Gueudry, J., He, Z., Piselli, S., Lefevre, S., Toubeau, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+technique+for+the+preparation+of+corneal+grafts+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Novel technique for the preparation of corneal grafts for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> American Journal of Ophthalmology. 156 (5), 851-859 (2013).</li>
<li>Lie, J. T., Birbal, R., Ham, L., van der Wees, J., Melles, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+tissue+preparation+for+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cataract+Refractive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Donor tissue preparation for Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Journal of Cataract Refractive Surgery. 34 (9), 1578-1583 (2008).</li>
<li>Kruse, F. E., Laaser, K., Cursiefen, C., Heindl, L. M., Schlotzer-Schrehardt, U., Riss, S., Bachmann, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stepwise+approach+to+donor+preparation+and+insertion+increases+safety+and+outcome+of+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">A stepwise approach to donor preparation and insertion increases safety and outcome of Descemet membrane endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 30 (5), 580-587 (2011).</li>
<li>Rudolph, M., Kaaser, L., Bachmann, B., Cursiefen, C., Epstein, D., Kruse, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+higher-order+aberrations+after+Descemet%E2%80%99s+membrane+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Corneal higher-order aberrations after Descemet’s membrane endothelial keratoplasty.</a> Ophthalmology. 119 (3), 528-535 (2012).</li>
<li>Price, F., Price, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+endothelial+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Cornea%22%5BJournal%5D)">Evolution of endothelial keratoplasty.</a> Cornea. 32, 28-32 (2013).</li>
<li>Dapena, I., Dapena, L., Dirisamer, M., Ham, L., Melles, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+acuity+and+endothelial+cell+density+following+Descemet+membrane+endothelial+keratoplasty+%28DMEK%29%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Soc+Esp+Oftalmol%22%5BJournal%5D)">Visual acuity and endothelial cell density following Descemet membrane endothelial keratoplasty (DMEK).</a> Arch Soc Esp Oftalmol. 86 (12), 395-401 (2011).</li>
</ol>

Hassan Tausif e Dr. Navasuja Chandrasekaran tem nada a revelar. Drs. Mian, Shtein e Woodward são diretores médicos para o Michigan Banco de Olhos. Mr. Mavin, Sr. Tito, e Ms. Johnson são funcionários da Midwest Banco de Olhos.

A camada de células endoteliais desempenham um papel crítico na manutenção da transparência córnea através de desidratação. Doenças das células endoteliais pode resultar em deficiência visual significativo. DMEK visa substituir as células endoteliais doentes com um enxerto de doador constituído por membrana e camada de células endoteliais de Descemet. Preparação de tecido do dador com um DM intacta e contagem de células endoteliais adequada são críticos para a sobrevivência do tecido do enxerto. Rasgando de DM durante a...

Endotelial Keratoplasty (EK) substituiu rapidamente ceratoplastia penetrante (PKP), como o procedimento de escolha para o tratamento de doenças endoteliais representam mais de 50% de todos os transplantes realizados nos Estados Unidos em 2012 6. PKP é limitada pela reabilitação visual prolongado com alto astigmatismo e instabilidade de refração, perda da integridade globo e complicações relacionadas à sutura. Procedimentos EK primeira geração, incluindo profunda lamelar endotelial Keratoplasty (dlek) envolvidos dissecção Manual do estroma corneal com transplante de tecido doador espessura parcial. Estes procedimentos foram bem sucedidos em transplante de tecido endotelial doador, mantendo uma superfície da córnea intacta, mas eram tecnicamente desafiador e resultou na limitado melhor acuidade visual corrigida, devido a uma córnea irregular de interface lamelar 1. O procedimento EK atual de escolha é de Descemet Stripping endotelial Keratoplasty (DSEK), que oferece clar córneadade com recuperação mais rápida da visão, minimiza erros de refração pós-operatória e astigmatismo, e diminui o risco de deiscência da ferida traumática, mantendo a superfície da córnea 7. Este procedimento envolve a remoção da membrana de Descemet e endotélio doente e substituição por tecido doador de espessura parcial que compreende uma nova camada de células endoteliais. A córnea do doador é dissecado com um microcerátomo para preparar o tecido posterior serem transplantadas 8. Preparação do tecido do doador pelo olho bancos tem sido fundamental para o crescimento rápido e, sem dúvida, o sucesso deste procedimento. O aumento de 16 vezes perto em procedimentos DSEK nos Estados Unidos entre 2005 e 2012 corresponde a quase metade do tecido a ser preparada pelo olho bancos 6. Embora DSEK pode melhorar a acuidade visual de 20/40, ou melhor, a maioria dos pacientes não alcançam 20/20 visão devido a neblina interface de estroma e aumento de luzespalham a partir da adição de doador de tecido estromal 7. A técnica cirúrgica EK progrediu a membrana de Descemet ceratoplastia endotelial (DMEK) que envolve o transplante de membrana só doador de Descemet (DM) e endotélio. Este procedimento tem uma maior proporção de pacientes que alcançam 20/20 de visão, a recuperação visual mais rápida, e um menor risco de rejeição endotelial 9. No entanto, a preparação do tecido doador é mais difícil devido às dimensões do enxerto mais finas.

<table><tbody><tr><td>VisionBlue</td><td>D.O.R.C., Zuiland, Holanda</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Punção a vácuo Barron</td><td>Katena, Denville, Nova Jersey</td><td>K20-2112</td><td></td></tr></tbody></table>

preparação tecido doador de córnea para membrana de descemet endotelial keratoplasty

Corneal Donor Tissue Preparation for Descemet's Membrane Endothelial Keratoplasty

Membrana de Descemet ceratoplastia endotelial (DMEK) é uma forma de transplante de córnea, em que apenas uma camada única de células, o endotélio da córnea, juntamente com a sua membrana basal (membrana de Descemet) é introduzido no estroma posterior do recipiente 3. Ao contrário de Descemet Stripping Automated endotelial Keratoplasty (DSAEK), onde estroma adicional dos doadores é introduzida, sem interface antinatural estroma-to-estroma é criado. Como resultado, a anatomia natural da córnea é preservada, tanto quanto possível, permitindo o tempo de recuperação para melhorar a acuidade visual e 4. Endotelial Keratoplasty (EK) é o procedimento de escolha para o tratamento de disfunção endotelial. As vantagens de EK incluem a rápida recuperação da visão, a preservação da integridade do bulbo ocular e alteração refrativa mínimo devido ao uso de uma incisão pequena, periférica 1. DSAEK utiliza tecido do dador preparada com estroma de espessura parcial e endotélio. A rápida success e utilização deste procedimento pode ser atribuído à disponibilidade de olho banco preparado tecidos pré-cortados. Os benefícios da preparação olho banco de tecido do doador incluem a eliminação de necessidade de equipamento especializado na sala de operação e disponibilidade de back up tecido do doador em caso de perfuração do tecido durante a preparação. Além disso, a preparação de alto volume de tecido do doador por técnicos olho bancárias pode proporcionar a melhoria da qualidade do tecido do doador. DSAEK pode ter limitado melhor acuidade visual corrigida, devido à criação de uma interface do estroma entre o doador eo receptor da córnea. Eliminação desta interface com o transplante de membrana e endotélio único doador de Descemet em DMEK pode melhorar os resultados visuais e reduzir as complicações após EK 5. Semelhante ao DSAEK, o sucesso a longo prazo e aceitação de DMEK depende facilidade de disponibilidade de pré-cortados, olho-bank preparado tecido do doador. Aqui nós apresentamos uma abordagem passo a passo para a preparação do tecido doador, que pode reduzir alguns barriers oculares bancos enfrentam no fornecimento de enxertos DMEK.

Separação adequada do DM e endotélio de estroma é essencial na preparação de tecidos pré-cortados para DMEK. Cinquenta córneas de doadores com idade média de 65 ± 6 anos (variação 55-75), a morte para o tempo de processamento de 5,9 ± 2,3 dias (variação 1-10) e densidade de células endoteliais (ECD) de 2616 ± 321 células / mm 2 ( intervalo 2,049-3,247) foram usadas para avaliar a viabilidade e reprodutibilidade da técnica de preparação cirúrgica por dois técnicos banco de olhos. A taxa de sucesso foi de 72% n...

Ceratoplastia endotelial é uma técnica cirúrgica em constante evolução como avanços resultam em transplante de enxertos mais finas com cada sucessão 1. Aqui apresentamos uma técnica de dissecção dos tecidos controlada manual para permitir uma separação segura e repetível do endotélio e membrana de Descemet do doador botões córneo para transplante 2.

Preparação tecido doador de córnea para Membrana de Descemet endotelial Keratoplasty

Descemet&#8217;s Membrane Endothelial Keratoplasty (DMEK) is a form of corneal transplantation in which only a single cell layer, the corneal endothelium, ...

O objetivo geral deste procedimento é preparar o tecido endotelial de Demas para a inserção do DMEC. Isso é feito primeiro realizando uma trepanação parcial e aplicando a mancha para visualizá-la. Em seguida, uma dissecção parcial de 360 graus na linha TATed é realizada entre o estroma S e a membrana demas.Em seguida, a membrana de Demas é retirada manualmente do leito estromal, deixando apenas uma pequena dobradiça presa. Finalmente, a membrana de Demas é devolvida ao leito estromal e qualquer líquido residual entre eles é removido. Em última análise, a benzoplastia endotelial com membrana de Demas usando preparações de tecido pré-cortadas é uma forma segura e repetível de dissecção manual controlada do tecido usada para tratar doenças endoteliais.A principal vantagem do banco de olhos que prepara o tecido doador de keroplastia endotelial de membrana dizimada é que ele reduz o risco de perda de tecido no preparo e melhora a eficiência na sala de cirurgia para o cirurgião. Geralmente, os cirurgiões em cada uma dessas técnicas podem ter dificuldades no início porque podem achar difícil evitar o rompimento da membrana de Demas, especialmente durante a dissecção parcial e a remoção do desme A demonstração visual dessa técnica é crítica porque as etapas de separação são difíceis de descrever. Em particular, o delineamento bem-sucedido entre deses e estroma Demonstrando o procedimento estará Lauren Johnson, gerente de processamento de tecidos do laboratório Midwest Ibis, Michigan.Para começar a preparar o tecido endotelial de Demas, use o traje adequado, incluindo boné e máscara, e use proteção para os olhos na sala de processamento. Prepare a sala de processamento ligando primeiro o ventilador para criar pressão positiva. Organize todos os suprimentos, certificando-se de verificar as datas de validade, integridade das embalagens e indicadores de esterilização com as mãos recém-lavadas e, usando luvas estéreis, estabeleça um campo estéril abrindo assepticamente os envoltórios.Evite usar a parte externa de uma polegada e meia do envoltório como parte do campo estéril, pois essa parte é considerada não estéril, solte os itens estéreis no campo estéril. Em seguida, coloque o microscópio acima do campo estéril. Ligue a fonte de luz e ajuste as oculares conforme necessário enquanto obtém o tecido da córnea a ser removido.Coloque-o próximo à área de processamento estéril preparada. Afrouxe a tampa da câmara de visualização e ela fique em cima da câmara de visualização sem fios engatados e descarte as luvas não estéreis. Em seguida, abra, um par de luvas estéreis e um avental estéril com toalha.Faça uma esfoliação cirúrgica antes de colocar o avental estéril e, em seguida, luvas estéreis. Abra as caixas de instrumentos para que todos os suprimentos fiquem acessíveis e abra uma cortina permeável à umidade para criar a área de trabalho. Monte a seringa de vidro para a mancha solta trian, colocando o êmbolo na seringa e apertando o êmbolo com os dedos.Conecte uma cânula à seringa azul trian e uma segunda cânula ao frasco de solução salina balanceada. Separe o punção de refinamento TR do bloco de vácuo e coloque-o de lado. Em seguida, centralize o bloco de vácuo dentro do campo de view do microscópio antes de ajustar as configurações do microscópio para colocar o bloco de vácuo em foco.Usando um quadrado de papel alumínio como barreira, levante a tampa da câmara de visualização com a mão oposta e usando uma pinça. Segure a córnea pela borda da esclera para remover a córnea do meio de armazenamento. Em seguida, recoloque a tampa da câmara de visualização, completamente pressionada uma seringa de sucção.Em seguida, coloque o lado epitelial da córnea voltado para baixo no bloco de vácuo e certifique-se de que esteja centralizado. Usando os postes-guia, abaixe suavemente o anel de assento no bloco de vácuo. Remova o anel de assentamento e coloque-o de lado com o tecido focado e bem visualizado ao microscópio.Execute uma trepanação parcial para marcar através da membrana de demas. Incline o bloco de vácuo e use uma lança de cotonete estéril colocada no limbo para remover o excesso de meio. Em seguida, coloque mancha suficiente no limbo para manchar a borda da partitura.A membrana de Demas permite que a mancha permaneça no endotélio por 60 a 90 segundos. Em seguida, use as lanças cirúrgicas para remover o excesso de manchas da área límbica da córnea. Tomando cuidado para não tocar no endotélio com várias gotas de BSS.Enxágue a córnea da solução de coloração e use lanças de cotonete estéreis para remover o excesso de BSS. Em seguida, coloque uma a duas gotas de BSS na borda da esclera para evitar que o tecido seque. Repita conforme necessário durante todo o procedimento para realizar uma dissecção parcial da membrana desme com uma pinça aberta, coloque uma ponta na borda da marca de pontuação e separe suavemente a membrana desme e o endotélio do estroma.Separe a membrana e o endotélio do descemet, não mais do que um a dois milímetros da borda marcada, e continue a dissecção 360 graus ao redor. Observe a localização de quaisquer micro lágrimas usando um marcador de pele para colocar um ponto no bloco de vácuo. Use uma pinça para remover quaisquer marcas endoteliais que se sobreponham à marca de pontuação.Em seguida, localize os micro rasgos marcados anteriormente e gire o bloco de vácuo para que o maior fique às seis horas. Isso se tornará a dobradiça da aba. Em seguida, usando a pinça, segure a membrana SMAs às 12 horas.Em seguida, separe suavemente do estroma S, descascando-o em direção à dobradiça. Crie a articulação parando a separação a dois milímetros da marca de pontuação. Coloque suavemente a aba de volta no lugar no estroma S.Use BSS e lanças de swab para desmontar o endotélio e retorná-lo à sua posição original. Remova o fluido residual entre a membrana de demas e o estroma para que o retalho permaneça na posição. Absorva o excesso de umidade da esclera perto da dobradiça.Use um marcador de pele para desenhar uma ponta de seta na borda da esclera, apontando-a para o centro da dobradiça e remova o excesso de tinta. Solte o vácuo pressionando o pistão da seringa conectada ao bloco de vácuo enquanto o vácuo é desengatado. Use uma pinça para remover a córnea do bloco de vácuo usando um quadrado de folha como barreira.Levante a tampa da câmara de visualização. Coloque a córnea na câmara de visualização com o lado endotelial voltado para cima. Recoloque a tampa e aperte-a.Finalmente, após remover o tecido da área de processamento e quebrar o campo estéril de acordo com o protocolo de texto, realizar avaliação pós-corte da lâmpada de fenda e microscopia especular das córneas e registrar os achados. 50 córneas de doadores com idade média de 65 anos mais ou menos seis anos morte até tempo de processamento de 5,9 mais ou menos 2,3 dias, e densidade de células endoteliais ou ECD de 2.616 mais ou menos 321 células por centímetro quadrado foram usadas para avaliar a viabilidade e reprodutibilidade da técnica de preparo cirúrgico. A taxa de sucesso foi de 72% nos primeiros 25 casos e aumentou para 80% no segundo semestre, com uma taxa de sucesso geral de 76% Ponto por correlação serial ou RPB foi usado para determinar a correlação com fatores teciduais pré-operatórios.A idade do doador, o óbito até o tempo de processamento e o ECD não se correlacionaram com o preparo bem-sucedido do tecido. O ECD pós-preparação de 2.676 mais ou menos 284 não foi significativamente diferente do pré-preparação. ECD. Os resultados malsucedidos resultaram de rupturas de DM e perda celular grave.Esses casos também foram associados à dificuldade de remontagem do tecido e coloração incompleta do dm Edge iBank. A avaliação dos resultados dos pacientes de nove procedimentos DEC realizados por cinco cirurgiões indicou que um caso teve uma luxação em um dia e uma semana sem necessidade de acuidade visual borbulhante em um dia variou de 2.400 a percepção de luz e em uma semana melhorou para 2.103. Uma vez dominado, esse procedimento pode ser realizado em menos de 20 minutos e, com a prática, o tempo que o tecido permanece fora do meio original pode ser tão curto quanto 10 minutos.Ao tentar este procedimento, é importante obter tecido da córnea de doadores com mais de 45 anos. Isso minimiza o risco de rasgar a membrana da abelha. Após este procedimento, processamento adicional pode ser realizado, como a aplicação de marcações de orientação, que identificam qual lado é o lado estromal da membrana Após seu desenvolvimento.Essa técnica abriu caminho para a rápida aceitação do DMEC pelos cirurgiões da córnea.

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Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

O artigo descreve uma técnica simplificada de córnea especiais de consumo e eviscerar os tecidos da retina do globo ocular de humanos doadores cadavéricos. A técnica descrita aqui vai ajudar a impostos especiais de consumo tecidos de boa qualidade para ser utilizados para transplantação, cirúrgicos ou de pesquisa, sem danificar outros tecidos do globo ocular.

Uma técnica simplificada para<em&gt; In situ</em&gt; Excisão de Córnea e evisceração de tecido da retina do globo ocular humano

O transplante da córnea do endotélio é uma técnica cirúrgica para o tratamento de doenças da córnea posteriores. Dissecção microcerátomo mecânico para preparar resultados de tecidos mais finos, enxertos mais simétrica com perda de células endoteliais e menos resultados melhores. Dissecações pode ser realizada no banco de olhos antes da cirurgia de transplante da córnea.

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Relatamos uma técnica para a fabricação de microbolsas dentro membranas electrospun para estudar o comportamento das células. Especificamente, descreve-se uma combinação de microstereolithography e de electrospinning para a produção de PLGA (poli (láctido-co-glicólido)) dispositivos de biomateriais córnea equipados com microestruturas.

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Os camundongos têm sido usados como modelo para estudar muitas formas de transplante, incluindo o transplante de córnea.  Descrevemos neste relato um modelo murino para transplante de córnea agudo e tardio.

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Um procedimento totalmente a laser é proposto no transplante endotelial. A técnica cirúrgica baseia-se no uso de um laser de femtossegundo para preparar o tecido doador. A técnica de soldagem a laser é então usada para fixar o endotélio doador na posição correta.

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Descemet's Stripping Only é um procedimento experimental em que pacientes com gutae córnea central resultante da Distrofia Corneal Endotelial De Fuchs têm a membrana de Descemet despojada para células periféricas para regenerar a camada endotelial. Apresentamos nova metodologia simulando DSO em córneas humanas distróficas ex vivo com cura acelerada estimulada pelo eFGF1 (NM141).

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