Name: A estimulação optogenética do nervo auditivo (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-08T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 53 s
Description: Aprenda a estimulação optogenética do nervo auditivo em camundongos usando LEDs azuis ou fibras ópticas. Este método avança a pesquisa auditiva e pode melhorar futuros implantes cocleares.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este trabalho foi financiado pelo Ministério Federal Alemão de Educação e Pesquisa (Bernstein Foco para Neurotechnology conceder 01GQ0810, a T. Moser, e MED-EL Alemanha); Fundação Alemã de Pesquisa, através do Centro de Microscopia nanoescala e Fisiologia Molecular do Cérebro (fzt 103, T. Moser) e através do SFB889, a N. Strenzke e T. Moser).

Todos os experimentos apresentados neste trabalho foram realizados com os padrões éticos definidos pela lei alemã de proteção dos animais experimentais. O conselho da Universidade de Goettingen para bem-estar animal e do animal escritório de assistência social do estado da Baixa Saxônia aprovou os experimentos. 1 Preparação de μLED-estimulador <ol><li> Para μLEDs, primeiro prepare o estimulador μLED. Use LEDs azuis com 200 por 200 mM superfície ativa (μLED, ver Tabela Materiais). </li><li> Fios solda na μLED. Em seguida, encapsular o μLED e as conexões usando cola epóxi. Deixe o dispositivo durante a noite para permitir a cura epóxi. </li><li> Para a estabilidade mecânica e o isolamento eléctrico dos fios do funil através de um capilar de vidro fino, use 1 mm de diâmetro exterior capilares de borosilicato e vedar a junção com epoxi (Figura 1D), tal que o capilar pode ser montado sobre um manipulador mecânico. NOTA: Taqui é um trade-off de fazer a cápsula grossa o suficiente para obter um bom isolamento elétrico (evitando artefatos de estimulação), mas fina o suficiente para permitir que o LED se mover livremente dentro da bolha e para localizá-lo na cocleostomias. É uma boa prática para preparar mais de um LED. </li><li> Para confirmar bom isolamento elétrico, primeiro preparar uma placa de Petri com 0,9% de NaCl e dip 3 fios de cobre nu encerrados no líquido. Isso serve para simular um animal com eletrodos ABR. Conecte os fios ao ABR-amplificador e de lá para um osciloscópio. </li><li> Em seguida, conecte o LED para o estimulador e mergulhá-lo na solução até que esteja totalmente coberta. Conduzir o LED com pulsos (consulte a etapa 3.1.1) na corrente máxima permitida por mais de 20 minutos e verifique se há artefatos de estimulação. Se eles aparecem, descarte o LED e tentar uma nova. </li></ol> 2 Procedimento Cirúrgico <ol><li> Use 4-10 semanas de idade, camundongos transgênicos expressando ChR2 sob o promotor THY1.2 (linha 9em Wang et al. 13). Para manipular o animal e realizar a cirurgia, sempre use ferramentas cirúrgicas limpas e bem identificados. </li><li> Anestesiar os animais com uma injecção ip de uma mistura de uretano (1,32 mg / kg), xilazina (5 mg / kg) e buprenorfina a 0,1 mg / g diluídos em solução de NaCl a 0,9% estéril e colocar o rato sobre uma placa de aquecimento para manter o organismo temperatura a 37 ° C. Com esta dose, a anestesia dura em geral de todo o protocolo experimental. <ol><li> A partir de 10 minutos após a primeira verificação de indução à anestesia de sinais de excitação pelo reflexo de retirada da pata. Em caso de movimentos, aplicação de doses de manutenção de uretano (0,66 mg / kg) e buprenorfina (0,05 mg / g), diluída em 0,9% de solução de NaCl estéril (sem xilazina). Verifique novamente o reflexo de retirada da pata e prosseguir somente se o reflexo é ausente. </li></ol></li><li> Raspar com cuidado a área retroauricular na preparação da incisão. Use um retroauricularaproximar-se para chegar a bula (cavidade do ouvido médio contendo ar). <ol><li> Com um micro fórceps dissecar cuidadosamente e / ou remover parte dos músculos do pescoço, por exemplo, platisma, esternocleidomastoideo, e scalenes. </li><li> Localizar e expor a bula (Figura 1A). Identificar a bula como uma estrutura óssea com uma forma esférica com uma característica do anel sobre a superfície da bula indica que a inserção da membrana timpânica (Figura 1A). Fazer um buraco com a ponta de uma agulha de insulina logo abaixo deste anel. Começar por aí, remover o osso que cobre a bula, com um fino Rongeur (gnawer) ou micropinças de tal maneira que o Promontorium da cóclea é exposto (Figura 1B). </li></ol></li><li> Para o cocleostomias, raspar delicadamente fora da cápsula óssea para abrir uma pequena janela (cocleostomias: ~ 500-800 mm), tendo o cuidado de deixar intacto o labirinto membranoso (Figura 1B). Realize o cocleostomias no segundo cocleartransformar, pois é longe o suficiente da artéria estapediana e do ápice. Abrindo as ápice poderia produzir ruptura da cóclea, incluindo uma fratura do modiolus. </li><li> Para uma janela de inserção rodada de uma fibra óptica ou μLED-implante para timpânica, ampliar cuidadosamente o nicho da janela redonda riscando o nicho ósseo com a ponta de um bisturi afiado (a lâmina número 11 é uma boa opção). Utilize sempre uma nova lâmina ou bisturi. Tenha muito cuidado, pois a artéria estapediana corre muito perto da janela redonda (Figura 1B). </li></ol> 3. Optical Estimulação utilizando duas abordagens <ol><li> Para a estimulação transcoclear, uso μLEDs ou um laser de fibra acoplada. <ol><li> Monte o capilar levando o μLED em um manipulador mecânico e cuidadosamente posicionar o μLED na cocleostomias. Utilização oABR, provocada por estimulação 3-10 ms de comprimento a partir de uma fonte de corrente (tipicamente 5-40 mA a 2,7 V) a 1-5 Hz, como um meio para optimizar a posição e ouientation do μLED. </li><li> Para a estimulação de laser, utilizar um laser de onda contínua nm 473 e 250 um uma fibra óptica (ver Materiais). Casal da fibra óptica a uma fonte de laser azul que, idealmente, oferece controle analógico rápido de alimentação (então usar um dispositivo acústico-ótico ou um obturador rápido para definir o estímulo óptico). Usando um micromanipulador, localize a ponta da fibra diretamente na cocleostomias e corrigi-o usando o cimento dental (estimulação transcoclear). </li></ol></li><li> Para a estimulação intracoclear, inserir a fibra através da janela redonda na escala timpânica. Em seguida, use 3-10 pulsos de laser ms de 10-30 mW (potência de saída de fibra) em 1-5 Hz para obter oABR. A grande amplitude de oABR permite que o experimentador observar oABR desencadeada por estímulos individuais no osciloscópio para optimizar a posição e orientação do emissor (μLED ou fibra), utilizando amplitude oABR como um limite ler. </li><li> Uma vez que boa oABR foram alcançados, fixar a fibra com cyanoacrcola ylate ou cimento dental e esperar até que a cola é sólido. NOTA: É normal observar um pouco de líquido que sai da cóclea. No entanto, para evitar problemas com a polimerização do cimento, é aconselhável para secar a região utilizando mechas de algodão finas. </li></ol> 4. Gravações de oABR <ol><li> Insira eletrodos de agulha debaixo do pavilhão auricular, no vértice e na parte de trás, perto das pernas e conectá-los ao amplificador. </li><li> Amplificar a diferença de potencial entre o vértice ea mastóide agulhas subcutâneos. Amostra a uma taxa de 50 kHz e um filtro (1-10.000 Hz). Visualize a diferença de potencial em um osciloscópio de preferência perto da configuração de gravação para otimizar a posição do estimulador óptico. Use média de sinal (50-1,000x) e armazenar os dados em um computador para análise off-line. </li></ol> 5. Gravações de potenciais evocados de campo local opticamente <ol><li> Colocar o animal em um quadro estereotáxico. Utilizando uma pinça centorali puxar a pele que cobre o crânio e realizar uma incisão mediana com uma tesoura que se estende desde aproximadamente entre os olhos para o ponto onde os músculos do pescoço para anexar o crânio. <ol><li> Refletir a pele lateralmente. Corte o periósteo longitudinalmente ao longo da sutura sagital e removê-lo para um lado, esfregando suavemente o osso craniano exposto com um cotonete. </li></ol></li><li> A posição de uma placa de metal feita sob encomenda para a cabeça exposta deixando aproximadamente 1 mm de espaço entre a extremidade caudal da placa e lambda. Com um diâmetro de 0,7 milímetros fure cuidadosamente faça um furo no osso parietal. </li><li> Gentilmente parafuso em um parafuso de diâmetro 0,85 milímetros - para servir de referência para os potenciais gravados a partir do colículo inferior (CI) - segurando o parafuso com uma pinça, enquanto o parafuso não está bem presa. Garantir um bom contato entre o parafuso e dura, sem penetrar no cérebro. Cole o parafuso e a chapa de metal sobre o crânio com cola de cianoacrilato. </li><li> Solte o nmúsculos Eck suavemente do crânio. Puxe os músculos do pescoço caudal de cerca de 1-2 mm. Identifique a intersecção do seio sagital superior, (SSS) e do seio transverso (TS). Se necessário, aumentar a transparência do crânio umedecendo o osso com uma solução de NaCl fisiológica. <ol><li> Identificar o IC em camundongos como mentir diretamente caudal para o cruzamento SSS e TS. Após a identificação da localização da IC lentamente e cuidadosamente realizar uma trepanação ca. estendendo 0,5 milímetros rostralmente a 1,5 mm caudal ao TS e cerca de 3 mm para os lados. </li><li> Evite qualquer prejuízo para a SSS e TS como estes impediria uma experiência bem sucedida. Aqui, testar se o osso trepanned tornou-se solto por suavemente empurrando-o. Utilizando uma pinça lentamente levantar o osso. </li></ol></li><li> Com um adaptador apropriado fixar um conjunto de canais múltiplos e headstage num micromanipulador. Para evitar a destruição da matriz de gravação multicanal durante a inserção no IC, retire cuidadosamente a duracom uma ponta curvada de uma pequena agulha hipodérmica começando perto de uma extremidade de osso. <ol><li> Retirar o animal do quadro estereotáxico. Fixar a placa de metal em um bar para permanecer fixação estereotáxico. Posicione a sonda de gravação sobre o IC e inseri-lo sob controle microscópico de modo que o mais alto do canal é apenas visível na superfície. </li></ol></li><li> Amplificar a diferença de potencial entre os canais individuais da matriz de gravação e o parafuso de referência no osso parietal, a uma taxa de amostra de 32 kHz, o filtro passa-baixo (300 Hz) e armazenar em um computador para análise off-line. </li><li> Todos os animais devem ser humanamente eutanasiados ao final do procedimento antes da recuperação anestésica de acordo com as diretrizes da eutanásia relevantes. Os métodos adequados de eutanásia pode incluir o deslocamento cervical ou inalação de CO 2. </li></ol>

<ol><li>Rubinstein, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paediatric+cochlear+implantation%3A+prosthetic+hearing+and+language+development%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Paediatric cochlear implantation: prosthetic hearing and language development.</a> Lancet. 360 (9331), 483-485 (2002).</li>
<li>Middlebrooks, J. C., Bierer, J. A., Snyder, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+implants%3A+the+view+from+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Current+opinion+in+neurobiology%22%5BJournal%5D)">Cochlear implants: the view from the brain.</a> Current opinion in neurobiology. 15 (4), 488-493 (2005).</li>
<li>Clark, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+multiple-channel+cochlear+implant%3A+the+interface+between+sound+and+the+central+nervous+system+for+hearing%2C+speech%2C+and+language+in+deaf+people-a+personal+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Philosophical+transactions+of+the+Royal+Society+of+London.+Series+B%2C+Biological+sciences%22%5BJournal%5D)">The multiple-channel cochlear implant: the interface between sound and the central nervous system for hearing, speech, and language in deaf people-a personal perspective.</a> Philosophical transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological sciences. 361 (1469), 791-810 (2006).</li>
<li>Zeng, F. G., Rebscher, S., Harrison, W., Sun, X., Feng, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+implants%3A+system+design%2C+integration%2C+and+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+reviews+in+biomedical+engineering%22%5BJournal%5D)">Cochlear implants: system design, integration, and evaluation.</a> IEEE reviews in biomedical engineering. 1, 115-142 (2008).</li>
<li>Wilson, B. S., Dorman, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+implants%3A+a+remarkable+past+and+a+brilliant+future%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+research%22%5BJournal%5D)">Cochlear implants: a remarkable past and a brilliant future.</a> Hearing research. 242 (1-2), 3-21 (2008).</li>
<li>Moore, D. R., Shannon, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+cochlear+implants%3A+awakening+the+deafened+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Beyond cochlear implants: awakening the deafened brain.</a> Nature neuroscience. 12 (6), 686-691 (2009).</li>
<li>Shannon, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multichannel+electrical+stimulation+of+the+auditory+nerve+in+man.+II.+Channel+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+research%22%5BJournal%5D)">Multichannel electrical stimulation of the auditory nerve in man. II. Channel interaction.</a> Hearing research. 12 (1), 1-16 (1983).</li>
<li>Fishman, K. E., Shannon, R. V., Slattery, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Speech+recognition+as+a+function+of+the+number+of+electrodes+used+in+the+SPEAK+cochlear+implant+speech+processor%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+speech%2C+language%2C+and+hearing+research%3A+JSLHR%22%5BJournal%5D)">Speech recognition as a function of the number of electrodes used in the SPEAK cochlear implant speech processor.</a> Journal of speech, language, and hearing research: JSLHR. 40 (5), 1201-1215 (1997).</li>
<li>Kral, A., Hartmann, R., Mortazavi, D., Klinke, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+resolution+of+cochlear+implants%3A+the+electrical+field+and+excitation+of+auditory+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+research%22%5BJournal%5D)">Spatial resolution of cochlear implants: the electrical field and excitation of auditory afferents.</a> Hearing research. 121 (1-2), 11-28 (1998).</li>
<li>Izzo, A. D., Suh, E., Pathria, J., Walsh, J. T., Whitlon, D. S., Richter, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selectivity+of+neural+stimulation+in+the+auditory+system%3A+a+comparison+of+optic+and+electric+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+biomedical%22%5BJournal%5D)">Selectivity of neural stimulation in the auditory system: a comparison of optic and electric stimuli.</a> Journal of biomedical. 12 (2), 021008(2007).</li>
<li>Richter, C. P., Rajguru, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spread+of+cochlear+excitation+during+stimulation+with+pulsed+infrared+radiation%3A+inferior+colliculus+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neural+engineering%22%5BJournal%5D)">Spread of cochlear excitation during stimulation with pulsed infrared radiation: inferior colliculus measurements.</a> Journal of neural engineering. 8 (5), 056006(2011).</li>
<li>Teudt, I. U., Maier, H., Richter, C. P., Kral, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acoustic+events+and+%E2%80%9Coptophonic%E2%80%9D+cochlear+responses+induced+by+pulsed+near-infrared+laser%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+transactions+on+bio-medical+engineering%22%5BJournal%5D)">Acoustic events and “optophonic” cochlear responses induced by pulsed near-infrared laser.</a> IEEE transactions on bio-medical engineering. 58 (6), 1648-1655 (2011).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-speed+mapping+of+synaptic+connectivity+using+photostimulation+in+Channelrhodopsin-2+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">High-speed mapping of synaptic connectivity using photostimulation in Channelrhodopsin-2 transgenic mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (19), 8143-8148 (2007).</li>
<li>Kleinlogel, S., Feldbauer, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultra+light-sensitive+and+fast+neuronal+activation+with+the+Ca2%2B-permeable+channelrhodopsin+CatCh%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Ultra light-sensitive and fast neuronal activation with the Ca2+-permeable channelrhodopsin CatCh.</a> Nature neuroscience. 14 (4), 513-518 (2011).</li>
<li>Friesen, L. M., Shannon, R. V., Baskent, D., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Speech+recognition+in+noise+as+a+function+of+the+number+of+spectral+channels%3A+comparison+of+acoustic+hearing+and+cochlear+implants%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Speech recognition in noise as a function of the number of spectral channels: comparison of acoustic hearing and cochlear implants.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 110 (2), 1150-1163 (2001).</li>
<li>Donaldson, G. S., Kreft, H. A., Litvak, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Place-pitch+discrimination+of+single-+versus+dual-electrode+stimuli+by+cochlear+implant+users+%28L%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Place-pitch discrimination of single- versus dual-electrode stimuli by cochlear implant users (L).</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 118 (2), 623-626 (2005).</li>
<li>Srinivasan, A. G., Shannon, R. V., Landsberger, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+virtual+channel+discrimination+in+a+multi-channel+context%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+research%22%5BJournal%5D)">Improving virtual channel discrimination in a multi-channel context.</a> Hearing research. 286 (1-2), 19-29 (2012).</li>
<li>Zeng, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Speech+dynamic+range+and+its+effect+on+cochlear+implant+performance%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Speech dynamic range and its effect on cochlear implant performance.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 111 (1 Pt 1), 377-386 (2002).</li>
<li>Matic, A. I., Walsh, J. T., Richter, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+extent+of+cochlear+infrared+neural+stimulation+determined+by+tone-on-light+masking%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+biomedical%22%5BJournal%5D)">Spatial extent of cochlear infrared neural stimulation determined by tone-on-light masking.</a> Journal of biomedical. 16 (11), 118002(2011).</li>
<li>Verma, R., Guex, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auditory+responses+to+electric+and+infrared+neural+stimulation+of+the+rat+cochlear+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Hearing+research%22%5BJournal%5D)">Auditory responses to electric and infrared neural stimulation of the rat cochlear nucleus.</a> Hearing research. 310, 69-75 (2014).</li>
<li>Fenno, L., Yizhar, O., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+and+application+of+optogenetics%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+review+of+neuroscience%22%5BJournal%5D)">The development and application of optogenetics.</a> Annual review of neuroscience. 34, 389-412 (2011).</li>
<li>Hegemann, P., Nagel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+channelrhodopsins+to+optogenetics%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+molecular+medicine%22%5BJournal%5D)">From channelrhodopsins to optogenetics.</a> EMBO molecular medicine. 5 (2), 173-176 (2013).</li>
<li>Packer, A. M., Roska, B., Häusser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+neurons+and+photons+for+optogenetics%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Targeting neurons and photons for optogenetics.</a> Nature neuroscience. 16 (7), 805-815 (2013).</li>
<li>Nagel, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Channelrhodopsin-2%2C+a+directly+light-gated+cation-selective+membrane+channel%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Channelrhodopsin-2, a directly light-gated cation-selective membrane channel.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 100 (24), 13940-13945 (2003).</li>
<li>Nagel, G., Szellas, T., Kateriya, S., Adeishvili, N., Hegemann, P., Bamberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Channelrhodopsins%3A+directly+light-gated+cation+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Society+transactions%22%5BJournal%5D)">Channelrhodopsins: directly light-gated cation channels.</a> Biochemical Society transactions. 33 (Pt 4), 863-866 (2005).</li>
<li>Nagel, G., Brauner, M., Liewald, J. F., Adeishvili, N., Bamberg, E., Gottschalk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light+activation+of+channelrhodopsin-2+in+excitable+cells+of+Caenorhabditis+elegans+triggers+rapid+behavioral+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Current+biology%3A+CB%22%5BJournal%5D)">Light activation of channelrhodopsin-2 in excitable cells of Caenorhabditis elegans triggers rapid behavioral responses.</a> Current biology: CB. 15 (24), 2279-2284 (2005).</li>
<li>Boyden, E. S., Zhang, F., Bamberg, E., Nagel, G., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Millisecond-timescale%2C+genetically+targeted+optical+control+of+neural+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Millisecond-timescale, genetically targeted optical control of neural activity.</a> Nature neuroscience. 8 (9), 1263-1268 (2005).</li>
<li>Bamann, C., Kirsch, T., Nagel, G., Bamberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectral+characteristics+of+the+photocycle+of+channelrhodopsin-2+and+its+implication+for+channel+function%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+molecular+biology%22%5BJournal%5D)">Spectral characteristics of the photocycle of channelrhodopsin-2 and its implication for channel function.</a> Journal of molecular biology. 375 (3), 686-694 (2008).</li>
<li>Ritter, E., Stehfest, K., Berndt, A., Hegemann, P., Bartl, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+light-induced+structural+changes+of+Channelrhodopsin-2+by+UV-visible+and+Fourier+transform+infrared+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+biological+chemistry%22%5BJournal%5D)">Monitoring light-induced structural changes of Channelrhodopsin-2 by UV-visible and Fourier transform infrared spectroscopy.</a> The Journal of biological chemistry. 283 (50), 35033-35041 (2008).</li>
<li>Berndt, A., Prigge, M., Gradmann, D., Hegemann, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+open+states+with+progressive+proton+selectivities+in+the+branched+channelrhodopsin-2+photocycle%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+journal%22%5BJournal%5D)">Two open states with progressive proton selectivities in the branched channelrhodopsin-2 photocycle.</a> Biophysical journal. 98 (5), 753-761 (2010).</li>
<li>Kato, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crystal+structure+of+the+channelrhodopsin+light-gated+cation+channel%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Crystal structure of the channelrhodopsin light-gated cation channel.</a> Nature. 482 (7385), 369-374 (2012).</li>
<li>Hegemann, P., Möglich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Channelrhodopsin+engineering+and+exploration+of+new+optogenetic+tools%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+methods%22%5BJournal%5D)">Channelrhodopsin engineering and exploration of new optogenetic tools.</a> Nature methods. 8 (1), 39-42 (2011).</li>
<li>Mattis, J., Tye, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+for+applying+optogenetic+tools+derived+from+direct+comparative+analysis+of+microbial+opsins%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+methods%22%5BJournal%5D)">Principles for applying optogenetic tools derived from direct comparative analysis of microbial opsins.</a> Nature methods. 9 (2), 159-172 (2012).</li>
<li>Arenkiel, B. R., Peca, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+Vivo+Light-Induced+Activation+of+Neural+Circuitry+in+Transgenic+Mice+Expressing+Channelrhodopsin-2%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">In Vivo Light-Induced Activation of Neural Circuitry in Transgenic Mice Expressing Channelrhodopsin-2.</a> Neuron. 54 (2), 205-218 (2007).</li>
<li>Tomita, H., Sugano, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+Properties+of+Transgenic+Rats+Harboring+the+Channelrhodopsin-2+Gene+Regulated+by+the+Thy-1.2+Promoter%5BTitle%5D)+AND+%22+PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Visual Properties of Transgenic Rats Harboring the Channelrhodopsin-2 Gene Regulated by the Thy-1.2 Promoter.</a> PLoS ONE. 4 (11), e7679(2009).</li>
<li>Hernandez, V. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetic+stimulation+of+the+auditory+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+clinical+investigation%22%5BJournal%5D)">Optogenetic stimulation of the auditory pathway.</a> The Journal of clinical investigation. 124 (3), 1114-1129 (2014).</li>
<li>Madisen, L., Mao, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+toolbox+of+Cre-dependent+optogenetic+transgenic+mice+for+light-induced+activation+and+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A toolbox of Cre-dependent optogenetic transgenic mice for light-induced activation and silencing.</a> Nature Neuroscience. 15 (5), 793-802 (2012).</li>
<li>Yizhar, O., Fenno, L. E., Davidson, T. J., Mogri, M., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetics+in+neural+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Optogenetics in neural systems.</a> Neuron. 71 (1), 9-34 (2011).</li>
<li>Hernandez, V. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetic+stimulation+of+the+auditory+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+clinical+investigation%22%5BJournal%5D)">Optogenetic stimulation of the auditory pathway.</a> The Journal of clinical investigation. 124 (3), 1114-1129 (2014).</li>
<li>Gunaydin, L. A., Yizhar, O., Berndt, A., Sohal, V. S., Deisseroth, K., Hegemann, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrafast+optogenetic+control%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+neuroscience%22%5BJournal%5D)">Ultrafast optogenetic control.</a> Nature neuroscience. 13 (3), 387-392 (2010).</li>
<li>Klapoetke, N. C., Murata, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Independent+optical+excitation+of+distinct+neural+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+methods%22%5BJournal%5D)">Independent optical excitation of distinct neural populations.</a> Nature methods. 11 (3), 338-346 (2014).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

As experiências descritas demonstram a estimulação optogenetic dos SGNs, e pode, em princípio, também ser utilizado para estimular as células ciliadas internas e / ou externas, desde que a expressão de opsinas. Esses experimentos exigem muita paciência e carinho. Como mencionado antes, as etapas mais críticas são uma boa cocleostomias / janela redonda de inserção, bem como uma posição adequada e orientação da fonte de luz. Há limitações com estimulação optogenética ao usar ChR2. No nosso cas...

Segundo a Organização Mundial de Saúde, 360 milhões de pessoas no mundo sofrem de perda auditiva. Em indivíduos surdos, estimulação elétrica direta de SGNs por CIs permitir a compreensão da fala aberta na maioria deles 1,2,4,5. Apesar de CIs foram implantados em mais de 200.000 pessoas, sendo portanto o neuroprosthesis maior sucesso, codificação de som impulsionado pelos atuais implantes cocleares é limitado. IC são baseados na estimulação eléctrica através de um certo número de eléctrodos, em que cada um de uma região activa tonotópico do nervo auditivo, saltando, assim, o órgão de Corti disfuncional sensorial da cóclea. Ouvintes com audição normal podem discriminar mais de 2.000 freqüências, porém CIs de hoje usam somente até 12-22 canais de freqüência 4. Isto é devido ao fluxo de corrente generalizada de cada eletrodo estimulante 7,9, a ativação de um grande número de SGNs que representam muitas frequências sonoras diferentes 8,15. Estelimitação pode ser melhorado utilizando a estimulação multipolar, mas à custa de um maior consumo de energia 16,17. Sua gama dinâmica de saída para a intensidade do som também é limitado, tipicamente abaixo de 6-20 dB 4,18. Por estas razões, melhorando frequência ea resolução intensidade são objectivos importantes para aumentar o desempenho do CI para melhorar o reconhecimento de fala em ambientes ruidosos, compreensão prosódia e percepção musical. Uma opção diferente para estimular o nervo auditivo é a estimulação óptica. A luz pode ser convenientemente focado para atingir uma população pequena SGN, prometendo melhor confinamento espacial, aumentando a resolução de freqüência e também ampliando a gama dinâmica, resultando em uma melhor resolução intensidade. De fato, a estimulação coclear com luz infravermelha mostrou resolução de freqüência excelente em modelos animais 10,11,19. Uma desvantagem deste tipo de estimulação é que ele requer energias mais elevadas do que a estimulação eléctrica <sup&gt; 10,11. Além disso, as preocupações sobre a capacidade do método para estimular diretamente os neurônios auditivos têm sido levantadas 12,20. Como uma alternativa para a estimulação de infravermelhos, que empregam Optogenetics para tornar SGNs sensível à luz. Optogenética é uma nova abordagem que combina técnicas genéticas e ópticas de forma não invasiva e, especificamente, controlar células com alta precisão temporal (Comentários de 21 a 23). A modalidade actualmente mais frequentemente utilizada emprega a expressão do channelrodopsina 2 (ChR2) gene microbiano de Chlamydomonas reinhardtii, e variantes destes, que codifica um canal de luz fechado catião 24. ChR2 é uma proteína transmembranar-7-hélice que, quando traduzidas em neurónios e activado pela luz azul, age como canal de catião não-selectivos, assim despolarização das células 24 e 27. ChR2 foi bem caracterizada 24,28- 31 e muitas variantes têm sido desenvolvidas para modificar actioespectro n, gating e propriedades de permeabilidade 32,33. O objetivo do nosso trabalho é estabelecer optogenética coclear para a ativação da via auditiva. Notamos que a abordagem optogenetic para estimular o nervo auditivo requer manipulação genética do gânglio espiral para a expressão de channelrodopsina. Trabalhando com ratos e ratazanas permite a utilização de animais transgénicos, disponíveis 13,34,35, que proporcionam a expressão de channelrodopsina com pouca variabilidade ao longo do eixo e através tonotópico 36 animais. Combinando alelos condicionais 37 com Cre-linhas apropriadas proporciona a expressão específica de célula. A transferência de genes para o gânglio da espiral de outros animais requer a utilização de vírus, tais como vírus adeno-associado que é um método padrão para Optogenetics 38 e que mostrou funcionar bem em ratos 36. A manipulação genética e expressão de transgenes que codificam proteínas estranhas riscos de ursos para efeitos adversos, como imunorespostas e / ou proliferação ne, condição comprometida ou até mesmo a morte de células geneticamente manipuladas. Para os fins desta demonstração usamos camundongos transgênicos expressando ChR2 em neurônios do gânglio espiral sob a Thy-1 promotor 13 para estimular opticamente da via auditiva. Observamos que outras variantes channelrodopsina podem ser usados ​​para o mesmo propósito que nós demonstramos usando a transferência mediada por vírus da captura variante 14 em SGNs 39. Enquanto optogenética coclear requer a manipulação genética, oferece afinação molecular para a estimulação SGN otimizado e melhorado promessas frequência e resolução de intensidade quando comparada à estimulação elétrica. Estimulação optogenética da via auditiva é altamente relevante para a pesquisa de audição. Por exemplo, ele promete avanços em estudos sobre o refinamento de tonotopia dependente de atividade durante o desenvolvimento, na análise da exigência de integração espectral em localizat somion e da extensão da interação entre projeções aferentes específicas de frequência no sistema auditivo central.

<table><tbody><tr><td>Uretano</td><td>Sigma Aldrich</td><td>U2500-100G</td><td>Anestésico</td></tr><tr><td>Xilazina HCl</td><td>RXV</td><td></td><td>Sedativo e analgésico</td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Reckitt Benckiser</td><td></td><td>Analgésico</td></tr><tr><td>Dumont #5 Pinças</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-10</td><td>É usado para segurar tecidos duros, por exemplo, ossos ou materiais. Nunca os use para segurar tecido macio e delicado</td></tr><tr><td>Dumont #5 - Fórceps Fino</td><td>Ferramentas de Ciência Fina</td><td>11254-20</td><td>Apenas para ser usado para segurar tecidos</td></tr><tr><td>moles Tesouras Finas - Ferramentas de</td><td>Ciência Fina</td> Afiadas <td>14060-09</td><td>Para abrir a pele e ajudar na dissecção muscular</td></tr><tr><td>Lempert Rongeurs&nbsp;</td><td>Ferramentas de Ciência Fina</td><td>16004-16</td><td>Eles são muito úteis para remover facilmente o osso do laser bulla</td></tr><tr><td>473 nm&nbsp;</td><td>Changchun New Industries</td><td>MLL-III473</td><td>100 mW estado sólido 473 nm laser</td></tr><tr><td>driver&nbsp;</td><td>Changchun New Industries</td><td>DPSSL MLL 100 mW</td><td>TTL operado driver a laser</td></tr><tr><td>250 &micro; m fibra óptica</td><td>Qualquer comercial; por exemplo, Thorlabs</td><td>M42L05</td><td></td></tr><tr><td>Modulador acústico-óptico</td><td>Crystal Technology, Inc.</td><td>PCAOM VIS</td><td>Controle a quantidade de luz acoplada à fibra do controlador de laser</td></tr><tr><td>para modulador acústico-óptico</td><td>Crystal Technology, Inc.</td><td>160T1-8SAR-24-0.8</td><td>Controle o modulador acústico-óptico</td></tr><tr><td>Solo2 medidor de potência e energia do laser</td><td>Gentec-EO</td><td></td><td>Usado para medir a intensidade da luz do LED e do laser acoplado à fibra</td></tr><tr><td>Azul e micro; LED</td><td>Cree</td><td>C470UT200</td><td>É necessário construir vários &mu; Dispositivos LED porque são facilmente danificados ou o isolamento não é bom o suficiente</td></tr><tr><td>Sistema TDT&nbsp;</td><td>Tucker-Davis Technologies</td><td>RZ6-A-P1</td><td>Pode ser usado em qualquer sistema para geração de estímulos e aquisição</td></tr><tr><td>de dados Sonda de silício de 16 canais de haste única</td><td>Neuronexus</td><td>a1x16-5mm-100-177-CM16LP&nbsp;</td><td>Estes são dispositivos frágeis, devem ser manuseados com cuidado e limpos após o uso</td></tr><tr><td>Instrumentos de Precisão Mundial</td> <td>Omnidrill</td><td>503598</td><td>Realizar craniotomia para gravações de IC e implantação de parafuso de referência</td></tr><tr><td>Micro Broca de Aço Micro Drill Burrs</td><td>qualquer comercial; e.g. Fine Science Tools</td><td>19007-07</td><td></td></tr><tr><td>Parafuso ósseo auto-roscante</td><td>qualquer comercial; e.g. Ferramentas de Fine Science</td><td>19010-10</td><td></td></tr><tr><td>Micromanipulador</td> <td>de parafuso de referênciaqualquer comercial; e.g. Luigs+NeumannInVivo Unit Junior 4 eixos</td><td></td><td>Posicionamento da sonda de gravação</td></tr></tbody></table>

a estimulação optogenética do nervo auditivo

Optogenetic Stimulation of the Auditory Nerve

Estimulação elétrica direta de neurônios do gânglio espiral (SGNs) por implantes cocleares (IC) permite a compreensão da fala aberta na maioria dos surdos implantados 1 e 6. No entanto, o som de codificação com CIs atuais tem baixa freqüência e resolução de intensidade devido a ampla propagação atual de cada contato do eletrodo de ativar um grande número de SGNs ao longo do eixo tonotópico da cóclea 7 a 9. Estimulação óptica é proposto como uma alternativa à estimulação elétrica que promete espacialmente mais confinado a ativação de SGNs e, portanto, a resolução de frequência mais elevada de codificação. Nos últimos anos, a iluminação infravermelha directa da cóclea foi utilizado para evocar respostas do nervo auditivo 10. No entanto, exige energias mais elevadas do que a estimulação elétrica 10,11 e incerteza quanto ao mecanismo subjacente 12. Aqui nós descrevemos um método baseado na optogenética para estimular SGNscom luz azul de baixa intensidade, utilizando camundongos transgênicos com expressão neuronal de channelrodopsina 2 (ChR2) 13 ou expressão mediada pelo vírus da captura ChR2 variante 14. Foram utilizados micro-díodos emissores de luz (μLEDs) e lasers de fibra acoplado para estimular ChR2 expressam SGNs através de uma pequena abertura artificial (cocleostomias) ou da janela redonda. Analisamos as respostas por gravações couro cabeludo dos potenciais evocados de luz (optogenetic auditivo de tronco cerebral de resposta: oABR) ou por gravações microeletrodos da via auditiva e os comparou com estimulação acústica e elétrica.

Um cocleostomias ideal é crítica e aumenta a probabilidade de uma experiência de sucesso. Isto significa que a janela é regular, pequena, e não há prejuízo das estruturas internas da cóclea. Por exemplo, sangramento indica lesão da estria vascular. Um bom exemplo é apresentado na Figura 1B. Usando ratinhos transgénicos ChR2, ChR2 é expresso nas SGNs dentro da cóclea (Figura 1C). Iluminação azul claro, seja por μLED ou laser, provoca grande o...

O implante coclear (IC) permitem ouvir pela estimulação elétrica direta do nervo auditivo. No entanto, a má frequência e intensidade resolução limita a qualidade de ouvir com CIs. Aqui descrevemos estimulação optogenética do nervo auditivo em ratos como uma estratégia alternativa para a investigação auditiva e desenvolvimento de futuros ICs.

A estimulação optogenética do nervo auditivo

Direct electrical stimulation of spiral ganglion neurons (SGNs) by cochlear implants (CIs) enables open speech comprehension in the majority of implanted ...

O objetivo geral deste procedimento é estimular opticamente o nervo auditivo de animais com neurônios do gânglio espiral optogeneticamente modificados. Isso é feito preparando primeiro um estimulador micro LED azul ou uma fibra óptica acoplada a um laser azul. O próximo passo do procedimento é avaliar a cóclea usando uma abordagem microcirúrgica retroauricular.O terceiro passo é posicionar o estimulador óptico para registrar as respostas do tronco encefálico evocadas opticamente. A etapa final é acessar o cólus inferior para registrar a atividade evocada opticamente. Em última análise, os resultados podem mostrar a estimulação bem-sucedida do sistema auditivo por meio de registros das respostas auditivas do tronco encefálico e dos potenciais de campo locais.No colículo inferior Estimulação optogenética do nervo auditor. Como alternativa ao elétrico, o implante coclear promete melhor resolução de frequência e intensidade. Isso é de grande interesse para a pesquisa de auditores, mas as implicações dessa técnica se estendem para uma melhor restauração da audição em surdos.Este método pode ajudar a responder a questões-chave na pesquisa auditiva, como o papel da atividade padrão para o

optogenetic-stimulation-of-the-auditory-nerve

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

A aplicação de um paradigma clássico medo condicionado comportamental para auditivo protético investigação em ratos é descrito. Este paradigma fornece um mecanismo para a identificação de ambos, detecção de e discriminação entre, acústica distinta e estímulos elétricos com freqüência cardíaca como uma medida de resultado.

Determinação do Comportamento da Discriminação do estímulo acústico Par de estímulos auditivos e elétrica usando um condicionamento clássico e da freqüência cardíaca abordagem

Fonte: Kozin, E. D., et.al. Visualização direta do núcleo coclear dorsal murino para estimulação optogenética da via auditiva. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra a transferência de genes mediada por vírus para o núcleo coclear dorsal (DCN) de camundongos para permitir a estimulação auditiva induzida por luz. Um vetor viral que codifica opsina, um canal iônico sensível à luz, é injetado no DCN após uma craniotomia e aspiração cerebelar para acesso direto. As opsinas expressas permitem que...

Transferência gênica mediada por vírus para o núcleo coclear dorsal do camundongo para estimulação auditiva induzida por luz

Este vídeo demonstra um protocolo para estimular a raiz nervosa auditiva e registrar correntes pós-sinápticas em neurônios olivococleares mediais em fatias de cunha cerebral de camundongo.

Estimulação da raiz nervosa auditiva e gravações de corrente pós-sináptica em uma fatia de cunha de cérebro de camundongo

Fonte: Badran, B. W., et al. Administração laboratorial de estimulação transcutânea do nervo vago auricular (taVNS): técnica, direcionamento e considerações. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a estimulação transcutânea do nervo vago auricular (taVNS), um método não invasivo para modular a atividade cerebral. Os eletrodos são colocados na parede anterior do meato acústico externo e no tragus, visando o ramo auricular do nervo vago (ABVN). Quando estimulado, o impulso nervoso resultante...

Estimulação transcutânea do nervo vago auricular no ouvido humano

Fonte: Akil, O., et al., Método cirúrgico para entrega de genes mediada por vírus ao ouvido interno de camundongos através da membrana da janela redonda. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o procedimento de entrega de um gene terapêutico no ouvido interno de um filhote de camundongo com perda auditiva geneticamente induzida. Usando um vetor viral adeno-associado (AAV), o gene é injetado através da membrana da janela redonda, permitindo que as partículas virais entrem nas células ciliadas,...

Terapia gênica baseada em vetores virais para restauração auditiva em um modelo de camundongo

O objetivo deste protocolo é delinear uma abordagem cirúrgica para fornecer acesso direto ao núcleo coclear dorsal em um modelo murino.

Visualização direta do Murino Dorsal Coclear Nucleus para Optogenetic Estimulação da via auditiva

O órgão auditivo medeia a audição. Aqui apresentamos um método de micro-eletroporação in ovo modificado otimizado para estudar a proliferação e diferenciação de células progenitoras auditivas no órgão auditivo de galinhas em desenvolvimento.

A transferência de genes para o frango auditivo órgão por<em&gt; In Ovo</em&gt; Micro-eletroporação

Apresentamos uma técnica para administração localizada de drogas através da rota trans-timpânicas na cóclea. Entrega da droga através desta rota não iria interferir com a eficácia de anticâncer dos medicamentos quimioterápicos tais como a cisplatina.

Entrega de trans-timpânicas drogas para o tratamento da ototoxicidade

Modelos animais de implantes cocleares podem avançar o conhecimento das bases tecnológicas de tratamento de perda de audição neurossensorial permanente com estimulação elétrica. Este estudo apresenta um protocolo cirúrgico para agudo ensurdecedor e implante coclear de uma matriz de eletrodo em ratos, bem como a avaliação funcional com auditivo de tronco encefálico.

Cirurgia de implante coclear e gravações de resposta eletricamente evocado auditivo do tronco encefálico em camundongos C57BL/6

A integração de diversas entradas sinápticas aos neurônios é melhor medida em uma preparação que preserva todos os núcleos pré-sinápticos para o tempo natural e a plasticidade do circuito, mas as fatias cerebrais normalmente cortam muitas conexões. Desenvolvemos uma fatia cerebral modificada para imitar a atividade do circuito in vivo, mantendo a capacidade de experimentação in vitro.

Preparação de fatia de cunha in vitro para imitar conectividade do circuito neuronal vivo

A estimulação eletroacústica (EAS) com eletrodos mais longos pode oferecer maior cobertura coclear e vários tipos de mapas em casos de perda auditiva de altas frequências. A combinação de cirurgia menos invasiva, eletrodos flexíveis de parede lateral e administração de esteróides permite uma inserção mais profunda com pouco ou nenhum trauma cirúrgico, resultando em boa preservação da audição.

Cobertura coclear aprimorada e preservação auditiva na perda auditiva de alta frequência por meio de estimulação eletroacústica com eletrodo mais longo

Aprenda a estimulação optogenética do nervo auditivo em camundongos usando LEDs azuis ou fibras ópticas. Este método avança a pesquisa auditiva e pode melhorar futuros implantes cocleares.

A estimulação optogenética do nervo auditivo

Explorar mais vídeos