O coelho Modelo Blood-shunt para o Estudo da aguda e tardia Sequelas de hemorragia subaracnóidea: Aspectos Técnicos

O objetivo geral deste procedimento é estabelecer uma pressão intracraniana independente do examinador, ou shunt sanguíneo controlado por PIC, hemorragia subaracnóidea aguda ou modelo de HSA no coelho. Isso é feito primeiro canulando a artéria subclávia. Na segunda etapa, é realizada a angiografia por subtração digital e, em seguida, sondas de neuromonitoramento e uma agulha de acesso espinhal são colocadas na etapa final.

A agulha de acesso espinhal e a artéria subclávia são conectadas a um shunt para induzir a HSA aguda controlada por PIC independente, em última análise, o fluxo sanguíneo cerebral da PIC ou FSC e a resposta cardiorrespiratória do animal à HAS aguda podem ser monitorados. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo neurovascular, como como a lesão cerebral precoce e a amostra tardia do vaso cerebral contribuem para o resultado e a mortalidade do parto. Após hemorragia subica aneurismática Comece colocando o coelho sedado em decúbito dorsal com as patas dianteiras e traseiras fixadas na superfície operacional.

Instale um eletrocardiograma de três canais como tal. Coloque três eletrodos subcutâneos em forma triangular no lado ventral do coelho. Em seguida, desinfete a pele com iodopovidona ou similar sobre o músculo pictórico direito ao redor do terço médio da clavícula, cubra o animal com lençóis estéreis.

Depois de infiltrar o músculo peitoral com anestésicos locais, faça uma incisão lateral na pele parosa e exponha o músculo peitoral. Divida a fibra muscular superior e inferiormente por dissecção romba até que a artéria subclávia possa ser visualizada. Em seguida, sob o microscópio, disseque a artéria subclávia usando duas micropinças retas e, em seguida, ligue-a distalmente e coloque uma ligadura ao redor da extremidade proximal exposta usando quatro pontos de polifilamento O e uma micropinça curva.

Em seguida, use uma microtesoura curva para incisar a parede da artéria subclávia e canular a artéria retrógrada. Em seguida, prenda o cateter por ligadura de nó duplo em direção à ligadura proximal e, adicionalmente, prenda o cateter por ligadura de nó duplo em direção à ligadura distal para evitar torção ou flexão arterial das partes proximais da artéria e para evitar deslizamento ou sangramento maciço. Em seguida, colete amostras de sangue para o status da gasometria arterial e monitore continuamente os parâmetros cardiovasculares e respiratórios padrão.

Coloque um dispositivo de dimensionamento externo sobre os ângulos da mandíbula para calibrar a angiografia e permitir uma comparação exata das medições post hoc da linha de base e do diâmetro do vaso de acompanhamento. Em seguida, execute a injeção retrógrada em bolus intra-arterial de LIO IOP não iônica através da artéria canulada e lave imediatamente a cânula com solução salina para evitar a oclusão da escada. Após a angiografia de subtração digital basal, reposicione o coelho em decúbito ventral, tomando cuidado para não manipular ou realocar o cateter intra-arterial.

Conecte o monitoramento da pressão arterial e comece a monitorar continuamente os parâmetros cardiovasculares e respiratórios padrão, incluindo eletrocardiograma, pressão arterial, saturação periférica de oxigênio, dióxido de carbono expiratório e temperatura central. Transfira os dados através da interface de saída analógica para um registrador de dados conversor digital analógico e armazene. Coloque a cabeça em um suporte em um ângulo de 30 graus orientado para baixo e, em seguida, desinfete a pele da cabeça e pescoço com iodopovidona três vezes por um minuto cada.

Depois de cobrir a nova área cirúrgica com lençóis estéreis, faça uma incisão na linha média da pele. Insira um pequeno afastador cirúrgico para fazer três osteotomias redondas de acordo com os pontos de referência externos do crânio e calibre as sondas de neuromonitoramento. Coloque a pressão intercraniana e as pontas de neuromonitoramento do fluxo sanguíneo doppler a laser interparenquimatoso e sele os orifícios da broca com cera óssea para manter o fluido do crânio apertado e permitir uma condição de crânio fechado, a fim de manter o estado estacionário de I-C-P-C-P-P e MAP.

Em seguida, insira uma agulha de acesso espinhal pediátrico de calibre 22 e 40 milímetros transcutânea na cisterna magna. Em seguida, deslize a agulha para baixo ao longo da protuberância occipital externa óssea até que uma lacuna seja detectada. Confirme o posicionamento correto da agulha observando o gotejamento espontâneo do líquido cefalorraquidiano com a cabeça do coelho inclinada para baixo em um ângulo de 20 a 30 graus por alguns minutos.

Agora, use um tubo de monitoramento de pressão cheio de sangue para conectar a agulha de acesso espinhal na cisterna magna à torneira de parada de três vias conectada à artéria subclávia previamente cateterizada. Em seguida, abra a conexão de derivação entre a artéria subclávia e o IC esterno magna para induzir hemorragia subaracnoide. Após a abertura do shunt, a pressão intracraniana começa a aumentar para valores próximos à pressão arterial diastólica.

Nesse momento, o fluxo no shunt é interrompido se o platô intercraniano for mantido por mais de 10 segundos, ou se a pressão diminuir espontaneamente, feche o shunt após a pressão intercraniana atingir seu pico, mantenha a agulha de acesso espinhal no lugar até que a pressão retorne a um estado estacionário próximo aos valores basais. Finalmente, remova a agulha fina do fluxo sanguíneo cerebral e as sondas de pressão intracraniana. Tampe os orifícios da broca com cera óssea e, em seguida, use sulfato de neomicina para realizar uma irrigação rigorosa da ferida e suturar a pele.

Primeiro, suture a pele sobre os orifícios da broca. Em seguida, após o reposicionamento do coelho em decúbito dorsal e a remoção do cateter da artéria subclávia, suturar o músculo peitoral e a pele. O modelo de shunt sanguíneo raivoso de HSA descrito neste relatório produz lesão cerebral precoce no hipocampo, córtex basal e vasculatura cerebral 24 horas após a lesão, induzindo uma distribuição sanguínea característica.

Além disso, este modelo desencadeia graus moderados a graves de vasoespasmo cerebral tardio no terceiro dia. Após a indução da HAS, a taxa de mortalidade do procedimento é de aproximadamente 20% devido à parada respiratória ou bradicardia grave no momento da HAS aguda, durante a qual os animais estão sob anestesia completa. Do ponto de vista técnico, este modelo de shunt de sangue permite a indução de HSA independente e controlável do examinador.

Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de proteger firmemente esta artéria subclavon, tomar um ótimo carro e reposicionar o animal e ser muito gentil e paciente durante a acupuntura Cy Sternum.