Name: A ligação permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda em Ratos: Um Modelo de Remodelação pós-infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-02T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 37 s
Description: Aprenda a técnica de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior em camundongos para estudar remodelação cardíaca e insuficiência cardíaca pós-infarto. Inclui medições hemodinâmicas invasivas in vivo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Este trabalho foi apoiado pela Onderzoekstoelagen grant OT/13/090 da KU Leuven e pela subvenção G0A3114N da FWO-Vlaanderen.

NOTA: Todos os procedimentos experimentais descritos nesta seção foram aprovados pelo Animal Care and Research Comité Consultivo da Katholieke Universiteit Leuven Institucional (Project: 154/2013-B De Geest). 1. A ligação permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda <ol><li> Anestesiar o rato por administração intraperitoneal de 40 mg / kg a 70 mg / kg de pentobarbital de sódio. Verifique se o mouse atinge o seu bom plano de anestesia quando já não reage uma pitada dedo do pé firme. Sempre confirme anesthetization adequada dessa forma antes de qualquer procedimento cirúrgico ou intervenção. Use lubrificante pomada oftálmica para prevenir o ressecamento da córnea, enquanto sob anestesia. Proporcionar analgesia pré-operatória 2-4 h antes do início do procedimento (buprenorfina 0,05 mg / kg SQ). <ol><li> Aplicar técnicas de assepsia consistentes durante a cirurgia sobrevivência. Implementar procedimentos que inibem a um máximo possível extensão con microbianacontaminação por isso que a infecção significativa ou supuração não ocorre. Estes procedimentos incluem a utilização de instrumentos esterilizados e materiais estéreis, desinfecção da área cirúrgica, e remoção de pele / cabelo sobre o local da cirurgia e desinfecção deste site. </li></ol></li><li> Intubate do mouse com um embotado agulha de calibre 20 auto-preparado. <ol><li> Coloque o mouse em decúbito dorsal, com hiperextensão da cabeça. <ol><li> Focalizar a luz na região do pescoço. Levante a língua com uma pincet embotada. A entrada da laringe pode ser claramente visto. </li><li> Passe a agulha embotada pela laringe na traqueia sob visão direta. Avaliar intubação correta ligando o mouse para o ventilador (volume AVC em ul: 3 x peso corporal (g) + 155; frequência: 120 batidas por minuto). </li></ol></li><li> Alternativamente, melhorar a visualização de entubação endotraqueal, expondo primeiro cuidadosamente a traquéia. <ol><li> Faça um 5 milímetros incisão mid-neck e retrairtecido muscular, um pouco acima da traqueia. </li><li> Realize a intubação usando um microscópio estereoscópico cirúrgico para a visualização direta da traquéia. Levante a língua e entrar na agulha de calibre 20 auto-preparado embotados na traquéia. Confirme intubação correta ligando o mouse para o ventilador (volume AVC em ul: 3 x peso corporal (g) + 155; frequência: 120 batidas por minuto). </li></ol></li></ol></li><li> Mantenha o mouse na posição supina e corrigir o mouse com fita adesiva. Realizar a cirurgia em uma almofada de aquecimento para evitar a hipotermia. <ol><li> Raspar e desinfectar a pele com Betadine. Tome cuidado para que o membro posterior esquerdo cruza o membro posterior direito, a fim de obter uma melhor visão sobre o ventrículo esquerdo durante a cirurgia. </li></ol></li><li> Fazer uma pequena incisão cutânea transversal acima do esterno e separar a pele e os músculos subjacentes. </li><li> Puxe de lado a m. peitoral menor e m. peitoral maior com uma sutura 5-0 seda. </li><li> Faça um incision no terceiro espaço intercostal por inserção de um pincet embotada. </li><li> Mova o pincet sob os músculos intercostais de lateral para medial até o esterno é atingido. Perfurar a parede torácica, empurrando o pincet a partir do interior para a pele. Complete a toracotomia com cuidado cortando o músculo intercostal pouco acima do pincet com uma pequena tesoura. Utilizar esta técnica para prevenir puncionamento dos pulmões. </li><li> Coloque uma esponja imersos em NaCl a 0,9% na cavidade, para proteger os pulmões. Introduzir um espalhador de ferida (afastador peito) para o espaço intercostal para obter uma exposição do lado esquerdo do coração. A partir de agora, o átrio esquerdo, o ventrículo esquerdo, e descendente anterior esquerda da artéria coronária são visíveis ao microscópio estereoscópico. </li><li> Realize uma ligadura da artéria descendente anterior coronária com um único ligadura 6-0 prolene cerca de 1 mm sob a ponta do átrio esquerdo. Isto é distal a partir do primeiro ramo diagonal. NOTA: Como alternativa, 7-0 (00,05 milímetros de diâmetro) ou 8-0 segmentos (0,04 mm de diâmetro) podem ser utilizados. A agulha é um círculo Taper agulha Ponto C-1 13 milímetros 3/8. Ligação bem sucedida da artéria coronária descendente anterior da artéria coronária induz descoloração imediata, resultando em um miocárdio pálido aparecendo no território afectado. </li><li> Remova o espalhador de ferida (afastador no peito). <ol><li> Coloque três 6-0 Ti-Cron em torno do espaço intercostal. Antes de apertar as suturas, remova a esponja da cavidade torácica e re-expandir os pulmões, bloqueando a saída do ventilador. Ao fazer isso, os pulmões se reconectar com a pleura parietal. </li><li> Posteriormente, puxe os fios para suturas apertado e repetir re-expansão, pressionando para baixo no peito. Confirmar o encerramento bem sucedido do tórax usando uma pequena quantidade de solução salina (sem bolhas de ar deve ser visto quando se aplica pressão sobre o peito). </li><li> Olhe através do músculo intercostal para confirmar expansão normal dos pulmões. Reposicionar ambos os músculos peitorais, servindo como umbarreira adicional para a prevenção de um pneumotórax. </li></ol></li><li> Feche a pele com 5-0 silk-suturas. </li><li> Desconecte o mouse do ventilador e permitir a recuperação na almofada de aquecimento. Não deixe um animal sem supervisão até que ele recuperou a consciência suficiente para manter decúbito esternal. Não devolva um animal que passou por uma cirurgia para a companhia de outros animais até que esteja totalmente recuperado. </li><li> Consistentemente fornecer analgesia pós-operatória (buprenorfina 0,05 mg / kg SQ BID por pelo menos 48 horas após a cirurgia). </li></ol> 2. as medidas in vivo hemodinâmica invasiva em camundongos <ol><li> Antes do procedimento, submergir o cateter Millar 1.0 French pressão em água estéril a 37 ° C durante pelo menos 30 minutos para minimizar a variação de sinal. Eletronicamente calibrar o sensor de pressão a 0 mm Hg e 100 mm Hg e gravar dados a 2.000 Hz. </li><li> Realizar a anestesia por administração intraperitoneal de 1,4 g / kg de uretano. Verifique seo mouse atinge o seu bom plano de anestesia quando já não reage uma pitada dedo do pé firme. </li><li> Posicione o mouse anestesiados em decúbito dorsal. Fixe seus membros com fita adesiva. Manter a temperatura corporal com uma almofada de aquecimento e acompanhar com uma sonda retal. Raspar a região do pescoço e fazer uma incisão na linha média na região do pescoço para expor a glândula tireóide. </li><li> Fixar o pescoço com agulhas tortas. </li><li> Puxe de lado a glândula salivar e expor a artéria carótida comum direita. O nervo vago, que se assemelha a um fio branco, encontra-se ao longo da artéria. Separe cuidadosamente a artéria carótida do nervo vago com pinça curvas. </li><li> Passar uma pinça curva sob a artéria carótida comum direita para separá-lo de outros tecidos. Remover o tecido conjuntivo em torno da artéria. </li><li> Passe dois fios de seda 6-0 sob a artéria carótida comum direita. Faça um nó apertado no fio top, que é colocado na direção da cabeça, fechar e fixar com um kocher (ligadura oclusiva distal). Passar a proxifio mal duas vezes da esquerda para a direita e fixar com 2 kochers (fio não oclusivo proximal). </li><li> Manter a artéria carótida húmido soltando estéril 0,9% de NaCl. Seque o excesso de líquido com cotonetes. </li><li> Realizar uma incisão na artéria carótida comum direita com uma agulha de calibre 26 entre a ligadura distal e o fio não oclusivo proximal. </li><li> Introduzir o sensor de pressão no interior da artéria. Verificar que não há perda de sangue. Empurrar suavemente o cateter de pressão Francesa Millar 1.0 para a frente e ajustar o fio não oclusivo proximal de tal modo que o cateter pode passar cuidadosamente através do fio sob a clavícula. <ol><li> Minimizar a perda de sangue durante o ajuste do fio não oclusivo proximal. Não comprimir o sensor de pressão demasiada ao avançar, uma vez que é muito frágil. Desde o fio proximal não deve obstruir a artéria, o navio deve permanecer cheia de sangue. </li></ol></li><li> Comece a gravar o sinal de pressão. Um sinal de pressão arterial Fluctuates em um rato saudável entre a pressão diastólica de 60-70 mmHg e uma pressão sistólica de 100-120 mm Hg. </li><li> Direcionar o cateter através da artéria inominada e através da aorta para o ventrículo esquerdo. A pressão ventricular oscila entre 0 mmHg e 100-120 mm Hg. Permitir que o cateter para estabilizar no interior do ventrículo esquerdo. Registar o sinal durante 30 min a 60 min, dependendo dos requisitos experimentais. </li><li> Após a conclusão da experiência, embeber o cateter em Alconox 1% durante 30 min. Lavar o cateter com água Milli-Q. Guarde o cateter em um bloco de espuma. </li><li> Recuperar dados do software de gravação, para posterior análise. <ol><li> Para a análise dos dados, considere um intervalo de tempo em que o sinal de pressão é estável. Escolha pelo menos 10 ciclos cardíacos consecutivos de os dados gravados de interesse. </li><li> Use software LabChart versão 8.0 ou similar para analisar a freqüência cardíaca, a pressão sistólica ventricular esquerda máxima, o Ventr esquerda diastólica mínimapressão icular, a taxa de pico de contração isovolumétrica ventricular esquerda (dP / dt max), a taxa de pico de relaxamento isovolumétrica ventricular esquerda (dP / dt min), a pressão ventricular esquerda diastólica final, e a constante de tempo do isovolumétrica ventricular esquerda queda de pressão (tau) 7. NOTA: A pressão diastólica final corresponde à pressão no ponto de tempo imediatamente antes do aumento súbito de pressão induzida pela contração isovolumétrica. O cálculo de tau é baseada no ajustamento da pressão do ventrículo esquerdo para uma curva de decaimento monoexponencial, expressa como P (t) = P 0 e -t / tau + b, Nesta fórmula, P (t) é a pressão ventricular esquerda em vez t depois que o valor negativo máximo de dP / dt foi atingido. O parâmetro b correspondente à assimptota teórico, em que uma abordagem simplificada pode ser assumido como sendo zero. Relaxamento isovolumétrico aprimorada resulta em um valor menor do tau. </li></ol></li></ol&gt;

<ol><li>He, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+congestive+heart+failure+in+US+men+and+women%3A+NHANES+I+epidemiologic+follow-up+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Risk factors for congestive heart failure in US men and women: NHANES I epidemiologic follow-up study.</a> Arch Intern Med. 161, 996-1002 (2001).</li>
<li>Anversa, P., Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+cardiomyopathy%3A+pathophysiologic+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Cardiovasc+Dis%22%5BJournal%5D)">Ischemic cardiomyopathy: pathophysiologic mechanisms.</a> Prog Cardiovasc Dis. 33, 49-70 (1990).</li>
<li>Erlebacher, J. A., Weiss, J. L., Weisfeldt, M. L., Bulkley, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+dilation+of+the+infarcted+segment+in+acute+transmural+myocardial+infarction%3A+role+of+infarct+expansion+in+acute+left+ventricular+enlargement%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Early dilation of the infarcted segment in acute transmural myocardial infarction: role of infarct expansion in acute left ventricular enlargement.</a> J Am Coll Cardiol. 4, 201-208 (1984).</li>
<li>Shimizu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+cardiac+insulin+signaling+exacerbates+systolic+dysfunction+induced+by+pressure+overload+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents.</a> J Clin Invest. 120, 1506-1514 (2010).</li>
<li>Tirziu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+hypertrophy+in+the+absence+of+external+stimuli+is+induced+by+angiogenesis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Myocardial hypertrophy in the absence of external stimuli is induced by angiogenesis in mice.</a> J Clin Invest. 117, 3188-3197 (2007).</li>
<li>Theilmeier, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-density+lipoproteins+and+their+constituent%2C+sphingosine-1-phosphate%2C+directly+protect+the+heart+against+ischemia%2Freperfusion+injury+in+vivo+via+the+S1P3+lysophospholipid+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">High-density lipoproteins and their constituent, sphingosine-1-phosphate, directly protect the heart against ischemia/reperfusion injury in vivo via the S1P3 lysophospholipid receptor.</a> Circulation. 114, 1403-1409 (2006).</li>
<li>Weiss, J. L., Frederiksen, J. W., Weisfeldt, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+determinants+of+the+time-course+of+fall+in+canine+left+ventricular+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic determinants of the time-course of fall in canine left ventricular pressure.</a> J Clin Invest. 58, 751-760 (1976).</li>
<li>Bohl, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297, 2054-2058 (2009).</li>
<li>Van Craeyveld, E., Jacobs, F., Gordts, S. C., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-density+lipoprotein+receptor+gene+transfer+in+hypercholesterolemic+mice+improves+cardiac+function+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Low-density lipoprotein receptor gene transfer in hypercholesterolemic mice improves cardiac function after myocardial infarction.</a> Gene Ther. 19, 860-871 (2012).</li>
<li>Gordts, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+effects+of+selective+HDL-raising+gene+transfer+on+survival%2C+cardiac+remodelling+and+cardiac+function+after+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Ther%22%5BJournal%5D)">Beneficial effects of selective HDL-raising gene transfer on survival, cardiac remodelling and cardiac function after myocardial infarction in mice.</a> Gene Ther. 20, 1053-1061 (2013).</li>
<li>Junqueira, L. C., Bignolas, G., Brentani, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Picrosirius+staining+plus+polarization+microscopy%2C+a+specific+method+for+collagen+detection+in+tissue+sections%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+J%22%5BJournal%5D)">Picrosirius staining plus polarization microscopy, a specific method for collagen detection in tissue sections.</a> Histochem J. 11, 447-455 (1979).</li>
<li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%3A+development+of+novel+therapies%2C+past+and+present%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li>
<li>Zolotareva, A. G., Kogan, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+experimental+occlusive+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cor+Vasa%22%5BJournal%5D)">Production of experimental occlusive myocardial infarction in mice.</a> Cor Vasa. 20, 308-314 (1978).</li>
<li>Michael, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia+and+reperfusion%3A+a+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia and reperfusion: a murine model.</a> Am J Physiol. 269, 2147-2154 (1995).</li>
<li>Salto-Tellez, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+in+the+C57BL%2F6J+mouse%3A+a+quantifiable+and+highly+reproducible+experimental+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Pathol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction in the C57BL/6J mouse: a quantifiable and highly reproducible experimental model.</a> Cardiovasc Pathol. 13, 91-97 (2004).</li>
<li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> J Anat. 212, 12-18 (2008).</li>
<li>Kumar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+mouse+coronary+anatomy+and+myocardial+infarction+consequent+to+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22Coron+Artery+Dis%22%5BJournal%5D)">Distinct mouse coronary anatomy and myocardial infarction consequent to ligation.</a> Coron Artery Dis. 16, 41-44 (2005).</li>
<li>Clauss, S. B., Walker, D. L., Kirby, M. L., Schimel, D., Lo, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patterning+of+coronary+arteries+in+wildtype+and+connexin43+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Patterning of coronary arteries in wildtype and connexin43 knockout mice.</a> Dev Dyn. 235, 2786-2794 (2006).</li>
<li>Icardo, J. M., Colvee, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+and+course+of+the+coronary+arteries+in+normal+mice+and+in+iv%2Fiv+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Origin and course of the coronary arteries in normal mice and in iv/iv mice.</a> J Anat. 199, 473-482 (2001).</li>
<li>Yoldas, A., Ozmen, E., Ozdemir, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macroscopic+description+of+the+coronary+arteries+in+Swiss+albino+mice+%28Mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+S+Afr+Vet+Assoc%22%5BJournal%5D)">Macroscopic description of the coronary arteries in Swiss albino mice (Mus musculus).</a> J S Afr Vet Assoc. 81, 247-252 (2010).</li>
<li>James, T. N., Burch, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+supply+of+the+human+interventricular+septum%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Blood supply of the human interventricular septum.</a> Circulation. 17, 391-396 (1958).</li>
<li>Gao, X. M., Xu, Q., Kiriazis, H., Dart, A. M., Du, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+post-infarct+ventricular+rupture%3A+time+course%2C+strain-+and+gender-dependency%2C+tensile+strength%2C+and+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse model of post-infarct ventricular rupture: time course, strain- and gender-dependency, tensile strength, and histopathology.</a> Cardiovasc Res. 65, 469-477 (2005).</li>
<li>Muthuramu, I., Jacobs, F., Singh, N., Gordts, S. C., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+homocysteine+lowering+gene+transfer+improves+infarct+healing%2C+attenuates+remodelling%2C+and+enhances+diastolic+function+after+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Selective homocysteine lowering gene transfer improves infarct healing, attenuates remodelling, and enhances diastolic function after myocardial infarction in mice.</a> PLoS One. 8, 63710(2013).</li>
<li>Eaton, L. W., Weiss, J. L., Bulkley, B. H., Garrison, J. B., Weisfeldt, M. L. Regional cardiac dilatation after acute myocardial infarction: recognition by two-dimensional echocardiography. N Engl J Med. 300, 57-62 (1979).</li>
<li>Erlebacher, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+effects+of+acute+infarct+dilation+on+heart+size%3A+a+two+dimensional+echocardiographic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Late effects of acute infarct dilation on heart size: a two dimensional echocardiographic study.</a> Am J Cardiol. 49, 1120-1126 (1982).</li>
<li>Schuster, E. H., Bulkley, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expansion+of+transmural+myocardial+infarction%3A+a+pathophysiologic+factor+in+cardiac+rupture%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Expansion of transmural myocardial infarction: a pathophysiologic factor in cardiac rupture.</a> Circulation. 60, 1532-1538 (1979).</li>
<li>Jugdutt, B. I., Michorowski, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+infarct+expansion+in+rupture+of+the+ventricular+septum+after+acute+myocardial+infarction%3A+a+two-dimensional+echocardiographic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of infarct expansion in rupture of the ventricular septum after acute myocardial infarction: a two-dimensional echocardiographic study.</a> Clin Cardiol. 10, 641-652 (1987).</li>
<li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nat Protoc. 3, 1422-1434 (2008).</li>
<li>Vanden Bergh, A., Flameng, W., Herijgers, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parameters+of+ventricular+contractility+in+mice%3A+influence+of+load+and+sensitivity+to+changes+in+inotropic+state%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">Parameters of ventricular contractility in mice: influence of load and sensitivity to changes in inotropic state.</a> Pflugers Arch. 455, 987-994 (2008).</li>
</ol>

Nenhum dos autores relata interesses financeiros conflitantes.

Alterações crônicas na estrutura e função do miocárdio, o desenvolvimento de disfunção ventricular esquerda, e progressão para insuficiência cardíaca pode ser investigado em vários modelos de murino 12. A remodelação cardíaca e disfunção pode ser induzida pela lesão do miocárdio ou por pressão sobrecarregar secundário para transversal constrição da aorta, ou podem ser investigados em modelos genéticos de cardiomiopatia dilatada 12. Obviamente, o benefício mais pronunciado de modelos murinos é a dis...

A insuficiência cardíaca é uma síndrome na qual o coração não consegue bombear sangue a uma taxa proporcional às necessidades de oxigênio celular em repouso ou durante o estresse. É caracterizada por retenção de líquidos, falta de ar e fadiga, em particular ao esforço. A insuficiência cardíaca é um problema crescente de saúde pública, a principal causa de hospitalização e uma das principais causas de mortalidade. A doença isquêmica do coração é a principal causa de insuficiência cardíaca1.
A remodelação ventricular refere-se a alterações na estrutura, tamanho e forma do ventrículo esquerdo. Em outras palavras, o remodelamento ventricular diz respeito a uma alteração da arquitetura ventricular esquerda. Essa remodelação arquitetônica do ventrículo esquerdo é induzida por lesão (por exemplo, infarto do miocárdio), por sobrecarga de pressão (por exemplo, hipertensão arterial sistêmica ou estenose aórtica) ou por sobrecarga de volume (por exemplo, insuficiência mitral). Como a remodelação ventricular afeta o estresse da parede, ela tem um impacto profundo na função cardíaca e no desenvolvimento da insuficiência cardíaca.
A perda de tecido miocárdico após infarto agudo do miocárdio resulta em diminuição da ejeção sistólica e aumento do volume e da pressão diastólica final do ventrículo esquerdo. O mecanismo de Frank-Starling, implicando que um aumento do volume diastólico final resulta em um aumento da pressão desenvolvida durante a sístole, pode ajudar a restaurar o débito cardíaco. No entanto, o aumento concomitante do estresse parietal pode induzir hipertrofia regional no segmento não infartado, enquanto na área infartada pode ocorrer expansão e afinamento. Estudos experimentais em animais mostram que o ventrículo infartado hipertrofia e que o grau de hipertrofia é dependente do tamanho do infarto2. 
A perda de tecido miocárdico após o infarto agudo do miocárdio resulta em um aumento repentino nas condições de carga. O remodelamento pós-infarto ocorre no cenário de sobrecarga de volume, uma vez que o tecido infartado estirado e dilatado aumenta o volume do ventrículo esquerdo. Um aumento do volume ventricular não implica apenas aumento da pré-carga (estresse passivo da parede ventricular no final da diástole), mas também aumento da pós-carga (estresse total da parede miocárdica durante a ejeção sistólica). A pós-carga é aumentada à medida que o raio sistólico é aumentado. Portanto, o remodelamento ventricular pós-infarto do miocárdio é caracterizado por características mistas de sobrecarga de volume e sobrecarga de pressão.
O miocárdio consiste em 3 componentes integrados: cardiomiócitos, matriz extracelular e microcirculação capilar. Todos os 3 componentes estão envolvidos no processo de remodelação. As metaloproteinases da matriz produzidas por células inflamatórias induzem a degradação das hastes de colágeno intermiócitos e o deslizamento dos cardiomiócitos. Isso leva à expansão do infarto caracterizada pelo afinamento e dilatação desproporcionais do segmento do infarto3. Em estágios posteriores da remodelação, a fibrose intersticial é induzida, o que afeta negativamente as propriedades diastólicas do coração. 
O compartimento vascular e cardiomiócito no miocárdio deve permanecer equilibrado no processo de remodelação ventricular para evitar hipóxia tecidual4,5. A progride ou não da hipertrofia para insuficiência cardíaca pode ser criticamente dependente desse equilíbrio entre o compartimento vascular e cardiomiócito no miocárdio. 
Um modelo de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior em camundongos é usado para investigar o remodelamento ventricular e a função cardíaca pós-infarto do miocárdio. Este modelo é fundamentalmente diferente em termos de objetivos e relevância fisiopatológica em comparação com o modelo de ligadura transitória da artéria coronária descendente anterior. Neste último modelo de lesão de isquemia/reperfusão, a extensão inicial do infarto pode ser modulada por fatores que afetam o salvamento miocárdico após a reperfusão6. Em contraste, a área do infarto 24 horas após a ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior é fixada. A função cardíaca neste modelo será afetada por 1) o processo de expansão do infarto, cicatrização do infarto e formação de cicatrizes; e 2) o desenvolvimento concomitante de dilatação ventricular esquerda, hipertrofia cardíaca e remodelamento ventricular.

<table><tbody><tr><td>Buprenorfina (Buprenex)</td><td>Bedford Laboratories</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital Sódico (Nembutal)</td><td>Ceva</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>VWR internationals</td><td>200065-400</td><td></td></tr><tr><td>5 - 0 sutura de seda</td><td>Ethicon, Johnson & Johnson Medical</td><td>K890H</td><td></td></tr><tr><td>6 - 0 sutura de prolene&nbsp;</td><td>Ethicon, Johnson & Johnson Medical</td><td>F1832</td><td></td></tr><tr><td>6 - 0 Ti- Sutura Cron</td><td>Ethicon, Johnson & Johnson Medical</td><td>F1823</td><td></td></tr><tr><td>Uretano</td><td>Sigma</td><td>94300</td><td></td></tr><tr><td>Alconox</td><td>Alconox Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ventilador, MiniVent Modelo 845</td><td>Hugo Sachs</td><td>73-0043</td><td></td></tr><tr><td>Afastador de tórax ou afastador de tórax</td><td>Kent Scientific corporation</td><td>INS600240</td><td>ALM Auto-retenção, serrilhado, 7 cm de comprimento, 4 x 4 "L" em forma de pinos, 3 mm x 3 mm</td></tr><tr><td>Cateter de pressão French Millar 1.0&nbsp;</td><td>Millar Instruments&nbsp;</td><td>SPR - 1000/NR</td><td></td></tr><tr><td>Powerlab</td><td>ADInstruments Pty Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LabChart&reg; software</td><td>ADInstruments Pty Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonda retal</td><td>ADInstruments Pty Ltd.</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

a ligação permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda em ratos: um modelo de remodelação pós-infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

A insuficiência cardíaca é uma síndrome em que o coração não consegue bombear o sangue a uma taxa proporcional aos requisitos celulares de oxigênio em repouso ou durante o estresse. É caracterizada pela retenção de líquidos, falta de ar e fadiga, em particular no esforço. A insuficiência cardíaca é um problema crescente de saúde pública, a principal causa de hospitalização, e uma das principais causas de mortalidade. Doença isquêmica do coração é a principal causa de insuficiência cardíaca. A remodelação ventricular refere-se a alterações na estrutura, tamanho e forma do ventrículo esquerdo. Esta remodelação arquitetônica do ventrículo esquerdo é induzida por lesão (por exemplo, infarto do miocárdio), por sobrecarga de pressão (por exemplo, hipertensão arterial sistêmica ou estenose aórtica), ou por sobrecarga de volume. Uma vez que a remodelação ventricular afecta o stress da parede, que tem um profundo impacto sobre a função cardíaca e no desenvolvimento de insuficiência cardíaca. Um modelo de ligadura permanente da descendin anterior esquerdag artéria coronária em ratos é usado para investigar o remodelamento ventricular e função cardíaca pós-infarto do miocárdio. Este modelo é fundamentalmente diferente, em termos de objetivos e relevância fisiopatológica em comparação com o modelo de ligadura transiente da artéria descendente anterior coronária. Neste último modelo de lesão de isquemia / reperfusão, o grau inicial do enfarte pode ser modulado por factores que afectam o salvamento do miocárdio após a reperfusão. Em contraste, a área de enfarte em 24 horas após a ligação permanente da artéria coronária descendente anterior da artéria coronária é fixo. A função cardíaca neste modelo será afetado por 1) o processo de expansão do infarto, a cura do infarto, e formação de cicatriz; e 2) o desenvolvimento concomitante de dilatação do ventrículo esquerdo, hipertrofia cardíaca, e remodelamento ventricular. Além do modelo de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior da artéria coronária, a técnica de mea hemodinâmica invasivame- em ratinhos é apresentado em pormenor.

A extensão do infarto do miocárdio pode ser avaliada por Evans azul / cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio (TTC) dupla marcação. TTC é um indicador redox, o qual é convertido para vermelho escuro 1,3,5-triphenylformazan em tecidos, devido à actividade de várias desidrogenases, na presença de NADH 8 vivo. A Figura 1 mostra uma secção representativa do coração às 24 h após ligadura da artéria descendente anterior coronária. As áreas azuis manchados de indicar regiões não-isquêmicas / normais. A ...

A insuficiência cardíaca é a principal causa de hospitalização e uma das principais causas de mortalidade. Um modelo de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior em camundongos é aplicado para investigar o remodelamento ventricular e a disfunção cardíaca pós-infarto do miocárdio. A técnica de medidas hemodinâmicas invasivas em camundongos é apresentada.

A ligação permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda em Ratos: Um Modelo de Remodelação pós-infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

O objetivo geral dos experimentos a seguir é apresentar a técnica de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior em camundongos. Este modelo é aplicado para investigar o remodelamento cardíaco e o desenvolvimento de insuficiência cardíaca após infarto do miocárdio. Na primeira parte do vídeo, será demonstrado o procedimento de ligadura permanente, enquanto na segunda parte, será mostrada a avaliação da função cardíaca, utilizando medidas hemodinâmicas invasivas in vivo em camundongos.O modelo de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior será demonstrado por Marlin Locks, zootecnia sênior do centro de biologia vascular molecular. Eja Aluno de doutorado do micro grupo apresentará técnica de medidas hemodinâmicas invasivas em camundongos. Comece focalizando uma luz na região do pescoço de um camundongo sedado.Em seguida, levante a língua do animal com um pino embotado para que a entrada da laringe possa ser claramente visualizada. Passe uma agulha embotada de calibre 20 auto-preparada através da laringe até a traqueia e, em seguida, conecte o mouse ao ventilador para avaliar se a intubação foi colocada corretamente. Prenda o mouse a uma almofada de aquecimento para evitar hipotermia.Cuidar para que o membro posterior esquerdo cruze o membro posterior direito para uma melhor visão do ventrículo esquerdo durante a cirurgia. Em seguida, faça uma pequena incisão cutânea transversal até o esterno e separe a pele e os músculos subjacentes. Use uma sutura de seda de cinco zero para afastar os músculos peitorais e, em seguida, insira um conjunto de pinos embotados para fazer uma incisão no terceiro espaço intercostal.Mova o pino sob os músculos intercostais do lado lateral para o medial até que o esterno seja alcançado. Em seguida, empurre o pino de dentro para a pele para perfurar a parede torácica. Finalmente, corte cuidadosamente o músculo intercostal logo acima do pino para completar a toracotomia.Tomando cuidado para não perfurar os pulmões, coloque uma esponja embebida em cloreto de sódio a 0,9% na cavidade para proteger os pulmões e, em seguida, introduza um afastador de tórax no espaço intercostal para expor o átrio esquerdo, o ventrículo esquerdo e a artéria coronária descendente anterior. Agora ligue a artéria coronária descendente anterior esquerda com uma única ligadura de prolina de seis zeros cerca de um milímetro abaixo da ponta do átrio esquerdo e distal ao primeiro ramo diagonal. A ligadura bem-sucedida induzirá uma descoloração imediata, resultando em uma aparência pálida do miocárdio no território afetado.Agora coloque 3 6 0 suturas tron ao redor do espaço intercostal e remova a esponja da cavidade torácica. Expanda novamente os pulmões bloqueando a saída do ventilador e, em seguida, puxe as suturas com força e pressione o tórax para repetir a reexpansão. Use uma pequena quantidade de solução salina para confirmar a falta de bolhas de ar e o fechamento bem-sucedido do tórax.Em seguida, examine o músculo intercostal para confirmar a expansão normal dos pulmões. Reposicione os dois músculos peitorais para servir como uma barreira extra para a prevenção de um pneumotórax e use cinco pontos de seda zero para fechar a pele. Em seguida, desconecte o mouse do ventilador, aquecendo o animal na almofada de aquecimento até que ele se recupere totalmente.Antes de iniciar as medições hemodinâmicas, mergulhe um cateter de pressão French Miller 1,0 em água estéril a 37 graus Celsius para minimizar o desvio do sinal Após pelo menos 30 minutos, eletronicamente, calibre o sensor de pressão em zero e 100 milímetros de mercúrio e registre os dados da linha de base em 2000 hertz. Em seguida, prenda o camundongo anestesiado em decúbito dorsal em uma almofada de aquecimento, monitorando a temperatura do animal com uma sonda retal. Raspe a região do pescoço e, em seguida, faça uma incisão na linha média para expor a glândula tireoide.Em seguida, fixe o pescoço com agulhas dobradas e afaste a glândula salivar para expor a artéria carótida comum direita. Agora identifique o nervo vago, que se assemelha a um fio branco e fica ao longo da artéria, e use uma pinça curva para separar cuidadosamente a artéria do nervo. Passe a pinça curva sob a artéria carótida comum direita para separá-la dos outros tecidos, removendo qualquer tecido conjuntivo ao redor da artéria.Em seguida, passe 2 6 0 fios de seda sob a artéria carótida comum direita e faça um nó apertado no fio superior. Coloque o fio em direção à cabeça, feche-o e fixe-o com uma ligadura distal. Em seguida, passe o fio proximal duas vezes da esquerda para a direita e fixe-o com dois fios proximais não oclusivos neste momento também.Mantenha a artéria carótida úmida pingando cloreto de sódio estéril a 0,9% na artéria. Em seguida, use uma agulha de calibre 26 para fazer uma incisão na artéria carótida comum direita entre a ligadura distal e o fio não oclusivo proximal. Introduza o sensor de pressão na artéria.Em seguida, empurre suavemente o cateter de pressão para frente e ajuste o fio não oclusivo proximal de forma que o cateter possa passar cuidadosamente pelo fio, sob a clavícula, e para que o vaso permaneça cheio de sangue. Agora comece a gravar o sinal de pressão. Em um camundongo saudável, o sinal de pressão arterial flutua entre uma pressão diastólica de 60 a 70 milímetros de mercúrio e uma pressão sistólica de 100 a 120 milímetros de mercúrio.Direcione o cateter através da artéria inominada e da aorta para o ventrículo esquerdo. A pressão ventricular oscilará entre zero e 100 a 120 milímetros de mercúrio. Finalmente, depois de permitir que o cateter se estabilize dentro do ventrículo esquerdo, registre o sinal por 30 a 60 minutos.Dependendo dos requisitos experimentais, a extensão do infarto do miocárdio pode ser avaliada pela coloração dupla TTC com azul de Evan. Aqui, são mostrados cortes representativos do coração 24 horas após a ligadura da artéria coronária descendente anterior. As áreas coradas em azul indicam as regiões normais não isquêmicas.As áreas coradas de vermelho escuro indicam as regiões isquêmicas, mas viáveis. Ou seja, as áreas não infartadas em risco. Já as áreas vermelhas pálidas e coradas negativamente indicam as regiões infartadas, que normalmente compreendem entre 50 a 60% da área total da parede do ventrículo esquerdo.A expansão do infarto pode ser quantificada avaliando o curso do tempo de duração e espessura do infarto. Aqui, um corte transversal representativo e grave manchado de vermelho de um coração no dia 28 após a ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior é mostrado neste corte transversal. A expansão do infarto substancialmente esticado corresponde a um aumento do comprimento absoluto do infarto e uma diminuição da espessura do infarto.Nesses gráficos, é mostrado um registro representativo da pressão arterial e ventricular. A diferença óbvia entre os sinais arteriais e os sinais ventriculares é que o sinal da escada cai para aproximadamente zero milímetros de mercúrio durante a diástole. Usando esse modelo, é importante notar que a função cardíaca dependerá não apenas da perda de tecido miocárdico, mas também do processo de expansão do infarto, na cicatrização do peido e na formação de cicatrizes, e do desenvolvimento concomitante de dilatação do ventrículo esquerdo, hipertrofia cardíaca e remodelamento ventricular.

permanent-ligation-left-anterior-descending-coronary-artery-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este vídeo demonstra como usar um modelo rápido e confiável para o estudo de processos Pathobiological e fisiopatológicas da isquemia miocárdica.

LAD Ligadura: Um Modelo murino de Infarto do Miocárdio

O procedimento cirúrgico utilizado para induzir o enfarte do miocárdio experimental em ratos começa com toracotomia esquerda entre a terceira e quarta das nervuras, a fim de visualizar a superfície anterior do coração e do pulmão esquerdo. A artéria coronária esquerda é ligada, a caixa é fechada e o rato é deixado a recuperar-se espontaneamente.

Técnica modificada para ligação da artéria coronária em ratos

Neste vídeo, descrevemos um procedimento cirúrgico para gerar um modelo de infarto do miocárdio em camundongos ligando permanentemente a artéria coronária descendente anterior.

Gerando Modelo Murino de Infarto do Miocárdio: Um Procedimento Cirúrgico para Ligadura Permanente da Artéria Coronária Descendente Anterior em Modelo de Camundongo

Nós introduzimos um método cirúrgico para induzir experimental de isquemia / reperfusão (I / R) prejuízo para simular o infarto do miocárdio (MI) em modelos de mouse que permite uma maior clareza no posicionamento da ligadura na artéria descendente anterior esquerda (LAD) para aumentar a reprodutibilidade de experimentos MI em camundongos.

Um modelo murino de isquemia-reperfusão, através da ligadura da artéria Descendente Anterior Esquerda

Fornecemos um método confiável para ligadura da artéria descendente anterior (DA) em um modelo de camundongo. Este método é comparativamente menos invasivo do que outros métodos, envolvendo intubação endotraqueal, abordagem de toracotomia do lado esquerdo e toracocentese. Este método pode ser usado como modelo para infarto agudo do miocárdio (IM) agudo e crônico.

Murino Descendente Anterior Esquerda (LAD) ligação da artéria coronária: um modelo melhorado e simplificado para Infarto do Miocárdio

Nisto nós descrevemos um procedimento cirúrgico que mostra como conseguir a ligadura permanente da artéria coronária descendente esquerdo-anterior nos ratos. Este modelo é de grande relevância para investigar a fisiopatologia do infarto do miocárdio e os processos biológicos concomitantes.

Modelo de infarto do miocárdio murino usando ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda

Descrevemos um método simples e reprodutível que pode induzir infarto do miocárdio ou lesão de isquemia-reperfusão miocárdica em camundongos por ligadura precisa da artéria coronária descendente anterior esquerda através de micromanipulação.

Indução de Infarto do Miocárdio e Lesão de Isquemia-Reperfusão Miocárdica em Camundongos

Há várias diferenças entre os ventrículos direito e esquerdo. No entanto, a fisiopatologia do infarto ventricular direito (RVI) não foi esclarecida. No presente protocolo, é introduzido um método reprodutível para geração de modelos de mouse RVI, o que pode fornecer um meio de explicar o mecanismo do RVI.

Geração e Caracterização do Infarto do Miocárdio Ventricular Direito Induzido pela Ligação Permanente da Artéria Coronária Direita em Camundongos

Apresenta-se aqui um procedimento cirúrgico para ligadura permanente da artéria coronária esquerda em camundongos. Este modelo pode ser utilizado para investigar a fisiopatologia e a resposta inflamatória associada após o infarto do miocárdio.

Laqueadura da Artéria Coronária Esquerda: Um Modelo Murino Cirúrgico de Infarto do Miocárdio

Numerosas manipulações genéticas e / ou injeções intramiocárdica de genes, proteínas, células e / ou biomateriais são sobrepostos sobre a dimensão do tempo em estudos de lesão de isquemia / reperfusão aguda e crônica em camundongos remodelação. Este vídeo ilustra os procedimentos de microcirurgia para isquemia / reperfusão, ligadura da artéria coronária permanente, e estudos de injeção intramiocárdica.

Ligadura da artéria coronária e injeção intramiocárdica em um modelo murino de infarto

Aprenda a técnica de ligadura permanente da artéria coronária descendente anterior em camundongos para estudar remodelação cardíaca e insuficiência cardíaca pós-infarto. Inclui medições hemodinâmicas invasivas in vivo.

A ligação permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda em Ratos: Um Modelo de Remodelação pós-infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca (Vídeo) | JoVE Journal

A ligação permanente da artéria coronária descendente anterior esquerda em Ratos: Um Modelo de Remodelação pós-infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca

Explorar mais vídeos