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DOI: 10.3791/52553-v
Kyle Peake1, John Manning1, Coral-Ann Lewis1,2, Christine Barr1, Fabio Rossi2, Charles Krieger1,3
1Department of Biomedical Physiology and Kinesiology,Simon Fraser University, 2The Biomedical Research Centre,University of British Columbia, 3Division of Neurology, Department of Medicine, Neuromuscular Disease Unit,VHHSC
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Descrevemos um protocolo pelo qual o condicionamento com bussulfano permite que a medula óssea de um camundongo receptor seja substituída por células da medula óssea de camundongos doadores que expressam onipresente a proteína fluorescente verde, na ausência de irradiação. Esta técnica é útil para estudar o acúmulo de células da medula óssea no sistema nervoso central.
O objetivo geral deste procedimento é substituir o compartimento da medula óssea de camundongos receptores por células da medula óssea de camundongos doadores que expressam onipresente a proteína fluorescente verde. Na ausência de irradiação. Isso é feito primeiro condicionando o camundongo receptor com injeções intraperitoneais seriais do composto mielossupressor busalan.
Em seguida, as células da medula óssea são isoladas dos fêmures e da tíbia de um camundongo doador, expressando onipresente a proteína fluorescente verde. Finalmente, as células da medula óssea do doador são transplantadas para o camundongo receptor condicionado por meio de uma injeção na veia da cauda. Por fim, o sangue é coletado do camundongo transplantado e analisado por citometria de fluxo para estimar a extensão dos sinos da medula óssea.
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