June 20th, 2015
Rede trabecular (TM) de migração para o espaço do canal de Schlemm pode ser induzida por elevação da pressão aguda por ophthalmodynamometer, e observado por tomografia domínio espectral de coerência óptica. O objetivo deste método é o de quantificar a resposta morfométricas da via de saída vivendo a elevação da pressão aguda em tecidos vivos in situ.
O objetivo geral deste procedimento é quantificar a resposta morfométrica da via de saída viva à elevação aguda da PIO em olhos humanos vivos in situ por meio do exame da malha trabecular em condições fisiológicas. Isso é feito medindo primeiro a pressão dentro do olho na linha de base e visualizando o limbo, a localização da via de saída do humor aquoso por tomografia de coerência óptica. O segundo passo é repetir as medidas de pressão e varreduras do limbo enquanto a PIO está sendo elevada com a aplicação de cinco e 10 gramas de pressão na esclera lateral por dinamômetro oftalmo.
Em seguida, depois de relaxar o músculo liso com uma gota de ajuda tropical. Medições de pressão e varreduras de limbo são repetidas sem. E durante a elevação da PIO, os dados da imagem são então exportados e processados, e a comparação da morfologia da estrutura da via de saída medida da mudança morfológica em resposta à elevação da PIO com e sem relaxamento do músculo liso fornece informações sobre as propriedades mecânicas da malha trabecular.
A principal vantagem que essa técnica tem sobre outras técnicas, como a microscopia de força atômica, é que estamos medindo a malha trabecular no olho vivo e examinando a resposta mecânica à perturbação da PIO. Essa resposta inclui a influência do músculo liso circundante que o sustenta. Geralmente, os indivíduos que são novos neste método inicialmente terão dificuldades porque não há fixação, alvo e fixação, nem a posição dos olhos neste método é ajustada principalmente por comando verbal.
Além disso, quando aplicamos o dinamômetro abdominal, o que acontece é que ele causa uma ligeira mudança na posição dos olhos. Portanto, a varredura deve ser realinhada antes da aquisição da imagem. Comece com a elevação da pressão.
Uma pressão basal é primeiro medida usando o aplicativo Goldman Chronometry, coloque uma gota de 0,5% de propano no olho e aguarde três minutos. Divida o grupo de teste em duas coortes. A coorte um recebe 30 gramas de pressão e a coorte dois recebe cinco gramas de pressão.
Aplique suavemente pressão na esclera temporal com o dinamômetro oftalmológico. Em seguida, espere cinco minutos e aplique 10 gramas de pressão na segunda coorte e faça outra medição, sendo a medição de pressão elevada. Agora execute a varredura de tomografia de coerência óptica do assento do olho do sujeito, o assunto no scanner e insira seus dados demográficos.
Em seguida, use comandos verbais para centralizar a varredura no limbo temporal, direcionando o olhar do paciente na direção nasal. Assim que o limbo temporal estiver centralizado, faça uma varredura de linha de base. Agora coloque uma gota de 0,5% de propano no olho.
Espere três minutos e faça outra varredura enquanto aplica pressão usando uma coorte de dinamômetro almo, uma recebe 30 gramas de pressão e a coorte dois recebe cinco gramas de pressão. Para a segunda coorte, aguarde cinco minutos a partir da aplicação inicial de pressão e aplique 10 gramas de pressão enquanto faz uma terceira varredura do olho. Como antes, apenas uma boa varredura é aceitável.
Depois de exportar os dados e importar para a Imagem J, converta a imagem em uma pilha de imagens TIFF e use o processo de contraste local aprimorado com as configurações a seguir. Tamanho do bloco de parâmetro de 31, caixas do Instagram em 256, inclinação máxima em cinco máscaras definida como nenhuma e defina a opção rápida como ativada. Faça isso em cada quadro da pilha de imagens e salve as alterações.
Em seguida, ajuste o tamanho da proporção para 2048 Por 10 24, vire as imagens verticalmente. Defina a distância da escala para 2048. Defina a distância conhecida para 4.000 e defina a proporção do pixel para um.
As varreduras podem então ser analisadas para travessias de navios. Gire lentamente a roda do mouse para examinar visualmente as varreduras para identificar uma travessia de embarcação distinta. Para servir como ponto de referência nas digitalizações, registre o número da imagem e o número do quadro de referência na planilha de análise.
Percorrer os quadros no volume de varredura serve a duas finalidades. Primeiro, estamos procurando pontos de referência distintos nos vasos aquosos. Eles serão usados para alinhar os volumes de digitalização feitos em momentos diferentes.
Em segundo lugar, à medida que percorremos o volume, estamos integrando em nossa mente a morfologia dos vasos aquosos e usando essa morfologia para distinguir os vasos aquosos do canal de Schlemm. Usando a ferramenta de seleção à mão livre, concentre-se no canal de Schlemm Primeiro, faça medições de sua área de seção transversal. Segmente manualmente o canal circulando o limite com o mouse.
Mantenha pressionada a tecla CTRL D para o quadro de imagem atual para documentar o local da linha de segmentação. Em seguida, mantenha pressionada a tecla CTRL M para medir automaticamente a área do canal de Schlemm. Quando ampliado, vemos que não há limite distinto do canal de Schlemm.
Por esse motivo, uma abordagem de largura total e meio máximo é usada a priori como diretriz para determinar o limite da segmentação. Agora copie a área da seção transversal do canal de Schlemm e o número do quadro de medição para a planilha de análise. Em seguida, desmarque a área delineada e pressione a seta para a direita.
Tecla três vezes para avançar três quadros de imagem. Repita este processo até que a área da seção transversal do canal de Schlemm tenha sido medida em 10 quadros. Agora pressione a tecla de seta para a esquerda para retornar ao primeiro quadro de medição e começar a medir o comprimento do canal de Schlemm.
Selecione a ferramenta de segmento reto na barra de ferramentas. Desenhe uma linha reta dos locais mais anteriores para posteriores no canal de Schlemm no quadro atual. Mantenha pressionada a tecla Control D para documentar a localização da linha de segmentação.
Em seguida, mantenha pressionado o controle M para medir o comprimento do canal de Schlemm. Em seguida, copie o comprimento do canal de Schlemm e o número do quadro para a planilha de análise, desmarque o comprimento e em cada terceira imagem onde o volume foi medido, faça a medição do comprimento do canal. Por fim, medir a espessura da malha trabecular em três amostras.
Retorne ao primeiro quadro de medição e desenhe uma linha reta da posição mais anterior do canal até a borda da malha trabecular e da câmara interna. Certifique-se de que a linha esteja perpendicular à borda. Agora mantenha pressionado o controle e pressione D e, em seguida, pressione M para obter a medição da linha.
Sempre copie essas medidas para o banco de dados junto com o quadro de onde elas foram retiradas. Em segundo lugar, desenhe uma linha do centro do canal até a borda da malha e da câmara anterior. A linha deve ser perpendicular à borda.
Em seguida, segure a tecla control e pressione D apenas para o quadro atual. Em terceiro lugar, desenhe uma linha da localização mais posterior do canal até a borda da malha com a câmara anterior. Além disso, certifique-se de que essa linha seja perpendicular à borda.
Em seguida, mantenha pressionado o controle e pressione D e, em seguida, pressione M.Repita essas três medições de espessura em cada um dos outros nove quadros analisados anteriormente. Em seguida, prossiga com a análise dos dados usando os protocolos descritos, foram obtidos os efeitos de pequenas e grandes mudanças na pressão interocular no fluxo de saída, parâmetros morfológicos tratados, como canal de Schlemm, área de seção transversal. Altos níveis de aumento de pressão produzem um colapso observável do canal, enquanto pequenos aumentos de pressão interocular foram acomodados Uma vez dominada, essa técnica pode ser realizada dentro de 10 a 15 minutos, se realizada corretamente.
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Este estudo investiga a resposta morfométrica da malha trabecular (MT) à elevação aguda da pressão intraocular (PIO) em olhos humanos vivos. Usando tomografia de coerência óptica, a migração da MT para o espaço do canal de Schlemm é quantificada sob condições fisiológicas.
This technique enables direct measurement of trabecular meshwork mechanical response to intraocular pressure elevation in living human eyes, providing physiologically relevant data for glaucoma target validation. By quantifying morphometric changes under conditions that preserve native tissue interactions, it supports mechanistic de-risking of outflow pathway hypotheses. The approach bridges preclinical models and human pathophysiology, enhancing predictive confidence in target selection for IOP-lowering therapies.
This method fits within the discovery continuum from target hypothesis to preclinical validation by providing human-derived biomechanical data on the outflow tract.