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DOI: 10.3791/52741-v
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This article presents an optimized, inexpensive, and reliable negative geotaxis assay in Drosophila melanogaster, serving as a model for neurodegenerative disorders. The assay is designed to be more sensitive to mild locomotor defects, aiding in the screening for potential genetic interactions and drug targets.
Apresentamos um ensaio de geotaxia negativa otimizado, barato e confiável em Drosophila melanogaster como modelo para doenças neurodegenerativas. Sendo mais sensível a defeitos locomotores leves, este ensaio ajudará a rastrear possíveis interações genéticas e alvos de drogas.
O objetivo geral deste procedimento é quantificar a capacidade de escalada de moscas do tipo selvagem e moscas mutantes para os genes envolvidos na locomoção. Isso é feito primeiro transferindo as moscas para um cilindro graduado de vidro. O segundo passo é deslocar as moscas para o fundo do cilindro batendo levemente no cilindro no acolchoamento de espuma.
As moscas que cruzam a linha alvo são gravadas em seguida com uma câmara de vídeo durante dois minutos. A etapa final é analisar os vídeos e traçar o número de moscas acima da linha alvo a cada 10 segundos. Em última análise, o ensaio de escalada é usado para identificar defeitos na capacidade de escalada de linhagens mutantes de moscas-das-frutas.
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