Name: Heterotopic Cervical Transplante Cardíaco em Ratos (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-25T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: Aprenda o transplante cardíaco cervical heterotópico em camundongos usando a técnica de manguito para anastomose simplificada. Este método facilita o estudo da lesão de isquemia-reperfusão e rejeição de enxertos.

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M.-A. Deutsch é apoiado pelo Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung für Herzforschung e Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane é apoiado pela Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) e Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)

Todos os experimentos foram aprovados pelo alemão Heart Center Munique eo Governo da Baviera, Alemanha (Gz. 55.2-1-54-2532.3-17-13). Os animais foram alojados em uma instalação livre de patógenos específicos e recebeu cuidados humanos em conformidade com os &quot;Princípios de Laboratório Animal Care&quot; formuladas pela Sociedade Nacional de Pesquisa Médica e do &quot;Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório&quot; fornecido pela Academia Nacional de Ciências e publicado pelos Institutos Nacionais de Saúde (NIH publicação 86-23 no., revista, 1985). NOTA: Um conjunto completo de instrumentos de microcirurgia estéreis, incluindo duas pinças curvas e dilatadores dos vasos, é necessário para o procedimento (Figura 2a). Profilaxia com antibióticos perioperatórios não é rotineiramente necessária, mas pode ser indicada em animais imunocomprometidos. Os animais foram sacrificados usando inalação de isoflurano terminal. Doador de Preparação e Graft Colheita &lt;ol&gt; <li> Anestesiar o animal por via intraperitoneal (ip) de injecção de midazolam (5,0 mg / kg), medetomidina (0,5 mg / kg) e fentanil (0,05 mg / kg de peso corporal). Posicione o mouse em decúbito dorsal sobre o campo operatório e confirmar tolerância cirúrgico pelo reflexo interdigital. </li><li> Desinfectar a pele três vezes com clorexidina e realizar uma incisão na linha média abdominal. Recolha os intestinos com gaze húmida para a esquerda para expor a veia cava inferior. </li><li> Injectar 50 UI de heparina diluído em 0,4 ml de solução salina através da veia cava inferior para a anticoagulação. Faça uma incisão na embarcação 1 min após heparinização. </li><li> Abra o diafragma e executar uma toracotomia bilateral para expor o coração. A parede anterior do tórax é refletido superiormente e mantido no lugar com um grampo. </li><li> Remova o timo e sem rodeios dissecar o tecido conjuntivo entre aorta e tronco pulmonar. Faça uma incisão na veia cava superior direita. </li><li> Perfurar a aorta ascendente mobilizado no nível doTBE com uma agulha G 30, montado sobre uma seringa de 5 ml e perfundir lentamente o coração retrogradually sem pressão excessiva, com 3 ml de 4 ° C, solução cardioplégica a frio. Evitar a entrada de ar para dentro da circulação coronária. Largar solução salina gelada para o enxerto para aumentar ainda mais a parada cardíaca. </li><li> Transecto a aorta proximal à origem do tronco braquiocefálico. </li><li> Ligadura da veia inferior e ambos cavas superior perto do coração com 8-0 seda e transecto-los para distal para as ligaduras. </li><li> Dissecar livre do tronco pulmonar como distalmente quanto possível. Ligadura das artérias pulmonares perto da bifurcação com 8-0 seda e transecto-los para distal. </li><li> Ligadura das veias pulmonares todos juntos com um único ligadura 8-0 seda e transecto-los. </li><li> Tiraram o coração do doador e armazená-lo em solução cardioplégica gelada até a implantação. </li></ol> 2. Destinatário Preparação <ol><li> Prepararos punhos para anastomoses por corte do tubo de poliimida com um bisturi n ° 11 ou uma tesoura ao microscópio. A braçadeira é constituída por um corpo cilíndrico e uma extensão (1/3 da circunferência) para a colocação da pinça vascular, cada uma com um comprimento de 1 mm (Figura 2b). </li><li> Anestesiar o animal e confirmar tolerância cirúrgico, tal como descrito acima. Injectar 0,25 ml de soro fisiológico morno solução por via subcutânea (sc) para a reposição de líquidos. </li><li> Remover os pêlos da região cervical direita usando um barbeador elétrico e colocar o animal em decúbito dorsal sobre uma almofada quente. Prenda os pés com fios de fita, evitando overstretching os membros dianteiros, pois isso pode comprometer a respiração. Cubra os olhos usando pomada oftálmica para prevenir o ressecamento. Desinfetar o local da cirurgia três vezes com clorexidina. </li><li> Faça uma incisão transversa da pele a partir do ângulo da mandíbula direito ao entalhe jugular. </li><li> Sem rodeios mobilizar a extErnal veia jugular. Cauterizar ramos laterais com um fórceps bipolares e transecto-los. </li><li> Dividir a veia jugular externa entre ligaduras no nível de confluência com a veia a partir da glândula submandibular. </li><li> Puxe a veia jugular externa através do manguito e oclusão do vaso proximal, colocando um grampo vascular sobre a extensão do punho. Remova a ligadura e irrigar o lúmen do vaso com 01:10 salina heparinizada. </li><li> Evert parede do vaso através da braçadeira e fixe-o com uma predefinição circunferencial 8-0 seda ligadura. </li><li> Remova a parte superficial do músculo esternocleidomastóideo. </li><li> Mobilizar a artéria carótida comum direita e transecto embarcação entre ligaduras abaixo da bifurcação carotídea. </li><li> Puxe a artéria carótida através do manguito e oclusão do vaso proximal, colocando um grampo Yasargil sobre a extensão do punho. Remova a ligadura e irrigar o lúmen do vaso com 01:10 salina heparinizada. </li><li> Gentilmente dilate do lúmen arterial, com um dilatador navio, everter parede do vaso através da braçadeira e fixe-o com uma predefinição circunferencial 8-0 seda ligadura. </li><li> Para ganhar espaço suficiente para a implantação do enxerto, remover o lobo direito da glândula submandibular. </li><li> Mantenha o campo operatório úmido até a implantação. </li></ol> 3. Enxerto Implantação <ol><li> Coloque o enxerto na região cervical do receptor de cabeça para baixo com a aorta orientada medialmente e a artéria pulmonar lateralmente. </li><li> Puxe a aorta do enxerto sobre o manguito com a artéria carótida e garantir a anastomose com uma ligadura circunferencial 8-0 seda. </li><li> Inciso do tronco pulmonar no seu aspecto anterior e puxe-o sobre o manguito com a veia jugular externa. Novamente garantir a anastomose com uma ligadura circunferencial 8-0 seda. </li><li> Remover o grampo na veia jugular externa, seguindo por desclampeamento da artéria carótida. Os corações enche imediatamente com sangue. Para aumentar reperfusion cair 37 ° C soro fisiológico morno para o enxerto. Normalmente, o coração se desenvolve em ritmo sinusal dentro de um minuto. Remover o manguito extensão no local venoso. </li><li> Assegurar a posição correta do enxerto, anastomoses deve ser livre de tensão e vasos sem torção. Não vasos cauterizados da pele uma vez que este pode prejudicar a cicatrização de feridas. Sangramento geralmente pára espontaneamente. Fechar a pele com uma sutura contínua única 8-0. </li></ol> 4. Cuidados Pós-Operatórios <ol><li> Injectar 0,25 ml quente sc solução salina para a reposição de líquidos. </li><li> Para antagonizar narcóticos injectar a naloxona (1,2 mg / kg), o flumazenil (0,5 mg / kg) e atipamezol (2,5 mg / kg de peso corporal) SC esquerdo do animal na almofada quente até ter recuperado a consciência suficiente para manter decúbito esternal. Observar o animal durante pelo menos uma hora adicional para registar qualquer comportamento anormal. Não devolva um animal que tenha sido submetido a cirurgia para a companhia de outros animais até que esteja totalmente Recovevermelho. </li><li> Fornecer analgesia preemptiva com buprenorfina (0,05 mg / kg sc três vezes por dia) ou uma analgesia alternativa de acordo com um protocolo institucional local por um período mínimo de 72 horas após o procedimento. </li><li> O cirurgião e um veterinário deve ver os animais regularmente. Em caso de perda de peso&gt; 15%, a apatia, inchaço ou infecção lado cirúrgicos animais são sacrificados usando inalação de isoflurano terminal. </li></ol>

<ol><li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+transplantation+in+congenic+strains+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Heart transplantation in congenic strains of mice.</a> Transplant Proc. 5, 733-735 (1973).</li>
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</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

Nós completamos mais de 200 transplantes cardíacos com uma taxa de sucesso superior a 90% em várias configurações experimentais. Com a técnica descrita aqui, o procedimento completo pode ser feito no prazo de 60 min por um cirurgião experiente. Ao preparar os vasos cervicais antes de colheita de órgãos, o tempo total de isquemia do enxerto pode ser limitada a 20 min. Tempo para o implante (tempo de isquemia quente) é significativamente mais curta utilizando a técnica de braçadeira em comparação com a técnica de sutura <...

O modelo de transplante cardíaco é freqüentemente usada para investigar I / R-lesão, rejeição do enxerto, doença vascular pós-transplante ea eficiência dos agentes imunomoduladores. Mouse modelos combinam muitas vantagens como o imunológica conhecida e origens genéticas, a disponibilidade de muitas estirpes puras e transgénicas experimentais e custos relativamente baixos. Em 1973, uma técnica de transplante cardíaco abdominal em ratinhos foi descrita pela primeira vez por Corry et al 1. Neste modelo enxertos são revascularizada pelo ponta-a-lado anastomose da aorta ascendente a aorta abdominal do receptor e da principal artéria pulmonar à veia cava inferior. Em 1991, a técnica de sutura para o transplante cardíaco cervical em ratos foi descrita por Chen et al 2. Neste modelo a perfusão coronária retrógrada é estabelecido por anastomose da artéria carótida do destinatário à aorta ascendente do grpopa. Os drenos de sangue venoso, através do seio coronário no átrio direito, ventrículo direito e é ejetado através da artéria pulmonar para o destinatário veia jugular externa (Figura 1). Em comparação com a implantação do enxerto abdominal modelo cervical é menos invasiva ea localização superficial do enxerto permite um acesso muito fácil para exames de acompanhamento adicionais (por exemplo palpação, ecocardiografia, microscopia de fluorescência intravital) 3,4. Apesar das melhorias técnicas 5,6, uma utilização mais generalizada deste modelo tem sido limitada devido a dificuldades técnicas para realizar anastomoses suturadas de pequenos vasos com alta incidência de vazamento de anastomose e trombose. Em 1991, Matsuura et ai. introduziu o manguito técnica em que a parede do vaso é revirado sobre um cilindro de síntese, o que facilita grandemente o modelo de transplante de coração 7 do colo do útero. A técnica foi further adotado para vários modelos experimentais de transplante renal, incluindo 8, 9 pancreático, membro 10, hepáticos 11,12, 13,14 e transplante de pulmão vascular 15. Em comparação com a técnica de sutura o tempo necessário para a anastomose e, assim, o tempo de isquemia quente é mais curto e existem complicações vasculares significativamente menor, utilizando a técnica do manguito 16. Além disso, ele permite que os cirurgiões com pouco treinamento em microcirurgia para executar a operação com uma elevada taxa de sucesso. Uma desvantagem da técnica de braçadeira é pré-requisito para a ligação da artéria carótida comum, o que pode alterar a perfusão cerebral. Neste artigo, apresentamos um vídeo técnica manguito melhorado e simplificado para o transplante cardíaco cervical em camundongos.

<table><tbody><tr><td>Pinça JFC-7.2</td><td>S& T</td><td>P-00036</td><td>Ponta curva 0,20 mm</td></tr><tr><td>Dilatador de vaso D-5a</td><td>S& T</td><td>S-00124</td><td></td></tr><tr><td>Adventita tesoura</td><td>S& T</td><td>S-00102</td><td></td></tr><tr><td>Braçadeira vascular B-1V</td><td>S& T</td><td>S-00396</td><td></td></tr><tr><td>Yasargil Clip</td><td>Peter Lazic</td><td>65.097</td><td>3,5 mm de comprimento</td></tr><tr><td>Pinça bipolar</td><td>Micromed</td><td>148-100-011</td><td>ponta 0,25 mm</td></tr><tr><td>Tubos de poliimida</td><td>River Tech Medical</td><td></td><td>19-24 calibre</td></tr><tr><td>8,0 ligaduras de seda</td><td>Catgut</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Custodiol HTK solução</td><td>Essential Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

heterotopic cervical transplante cardíaco em ratos

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

O transplante cardíaco cervical heterotópico em camundongos é uma ferramenta valiosa em transplantes e pesquisas cardiovasculares. A técnica do balonete simplifica muito esse modelo, evitando anastomoses de sutura desafiadoras de pequenos vasos, reduzindo assim o tempo de isquemia quente. Em comparação com o implante de enxerto abdominal, o modelo cervical é menos invasivo e o enxerto implantado é facilmente acessível para exames de acompanhamento posteriores. As anastomoses são realizadas puxando a aorta ascendente do enxerto sobre o balonete com a artéria carótida comum do receptor e puxando a artéria pulmonar principal sobre o balonete com a veia jugular externa. A seleção do tamanho adequado do manguito e a mobilização completa dos vasos são importantes para o sucesso da revascularização. A lesão de isquemia-reperfusão (I/R) pode ser minimizada pela perfusão do enxerto com solução cardioplégica e pela hipotermia. Neste artigo, fornecemos detalhes técnicos para uma técnica simplificada e aprimorada do manguito, que deve permitir que cirurgiões com habilidades microcirúrgicas básicas realizem o procedimento com alta taxa de sucesso.

Nossa equipe pode executar com êxito a técnica descrita após cerca de 20 cirurgias de formação. A parte mais desafiadora é a everter parede do vaso da artéria carótida sobre o punho, porque facilmente vira para trás e múltiplas tentativas podem levar a rasgar do muro. Após o período de treinamento, o tempo cirúrgico médio total foi de 60 ± 8 min. Cerca de 20 min são necessários para a colheita doador, 25 min para a preparação dos vasos cervicais e 15 minutos para anastomoses e fechamento da pele. <p class="jove_cont...

A técnica do manguito encurta e facilita o modelo de transplante cardíaco cervical heterotópico em camundongos, evitando anastomoses de sutura tecnicamente desafiadoras de pequenos vasos. Os detalhes técnicos mostrados neste vídeo devem permitir que as pesquisas estabeleçam esse modelo em seus laboratórios.

Heterotopic Cervical Transplante Cardíaco em Ratos

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Este vídeo apresenta um modelo experimental de transplante cardíaco cervical para investigar a lesão por isquemia e reperfusão com camundongos singênicos, ou para investigar a rejeição do enxerto com animais alogênicos. O primeiro passo do procedimento é a retirada do coração do camundongo doador. O enxerto é armazenado em solução cardioplégica sobre gelo por até quatro horas, dependendo da configuração experimental.O próximo passo é a preparação dos vasos cervicais direitos do camundongo receptor, em que a parede dos vasos da veia jugular externa e da artéria carótida divididas é voltada para fora sobre uma cânula e fixada com uma ligadura. O passo final do procedimento é o implante do enxerto no camundongo receptor. A aorta ascendente do enxerto é puxada sobre a cânula juntamente com a artéria carótida, e o tronco pulmonar é anastomosado com a veia jugular externa.No final, os grampos são removidos e a reperfusão começa. Normalmente, o coração desenvolve ritmo sinusal dentro de um minuto. Em comparação com o implante abdominal do enxerto em transplante cardíaco cervical, o método é menos invasivo e os animais se recuperam mais rapidamente.Além disso, ao utilizar grampos para anastomose, a sutura de vasos pequenos pode ser completamente evitada, tornando este um modelo tecnicamente mais viável. Após pré-sedação do camundongo com isoflurano, anestesie-o por meio de injeção intraperitoneal de anestésicos e confirme a tolerância cirúrgica verificando o reflexo de retirada do membro. Em seguida, posicione o camundongo em decúbito dorsal sobre o campo operatório.Em seguida, desinfete a pele três vezes com clorexidina. Agora, realize uma incisão abdominal mediana e retrai os intestinos para a esquerda utilizando uma gaze úmida para expor a veia cava inferior. Então, injete na VCI 50 unidades de heparina diluídas em 0,4 mililitros de solução salina para prevenir a coagulação.Um minuto depois, incise o vaso, abra o diafragma e realize uma toracotomia bilateral para expor o coração, reflita a parede torácica anterior superiormente e fixe-a com um grampo. Em seguida, remova o timo e dissecção romba do tecido conjuntivo entre a aorta e o tronco pulmonar, incisando a veia ázigo direita. Depois, use uma agulha de calibre 30 para perfurar a aorta descendente mobilizada na altura do tronco braquiocefálico e perfundir lentamente o coração em sentido retrógrado utilizando três mililitros de solução cardioplégica gelada.Não aplique pressão excessiva. Não injete nenhum ar. E para acentuar ainda mais a parada cardíaca, goteje solução salina gelada sobre o enxerto.Em seguida, seccionar a aorta proximalmente até a origem do tronco braquiocefálico e ligar a veia cava inferior e ambas as veias cavas superiores próximas ao coração. Usando seda ATO, após a colocação das ligaduras, seccionar cada vaso distalmente às ligaduras. A seguir, destacar o tronco pulmonar o mais distal possível e ligar as artérias pulmonares próximas à bifurcação.Com o fio de seda, também seccionar esses vasos distalmente às ligaduras. Os últimos vasos a serem ligados são as veias pulmonares, que podem ser ligadas juntas com uma única ligadura de seda. Em seguida, seccionar essas veias e remover o coração do doador.Guarde o coração em solução cardióplega gelada até que seja necessário para iniciar o procedimento sob o microscópio. Prepare as cânulas para anastomose cortando o tubo de poliamida com tesoura ou lâmina de bisturi número 11. Após preparar o receptor para a cirurgia da mesma forma que o doador, administre uma injeção subcutânea de 0,25 mililitros de solução salina morna para reposição hídrica.Em seguida, retire os pelos da região cervical direita e posicione o camundongo em decúbito dorsal sobre uma placa aquecida, fixe as patas com fita adesiva, mas não estique excessivamente os membros anteriores, pois isso pode comprometer a respiração. Aplique então pomada oftálmica e desinfete o local cirúrgico três vezes com várias fricções de clorexidina. Inicie agora a cirurgia fazendo uma incisão transversal na pele, do ângulo mandibular direito até a incisura jugular.Em seguida, mobilize diretamente a veia jugular externa e cauterize os ramos laterais com uma pinça bipolar, seccionando-os. Divida a veia jugular externa entre as ligaduras no ponto onde há uma confluência com a veia da glândula submandibular. Após isolada, puxe a veia jugular externa através do manguito.Em seguida, oclua o vaso proximalmente colocando um grampo vascular na extensão da luva. Agora remova a ligadura e irrigue a luz do vaso com uma a 10 soluções salinas heparinizadas. Complete a fixação à luva invertendo a parede do vaso sobre ela e fixando o vaso com uma ligadura de seda ose pré-ajustada em sentido circunferencial.Agora remova a parte superficial do músculo esternocleidomastoideo. Em seguida, mobilize a artéria carótida comum direita. Então, abaixo da bifurcação carotídea, posicione duas ligaduras e seccione o vaso entre elas.Agora puxe a artéria carótida através do manguito e coloque um grampo al na extensão proximal ao manguito. Para ocluir o vaso, remova o ligadura e irigue o lúmen do vaso com uma a 10 soluções salinas heparinizadas. Em seguida, dilate suavemente o lúmen com um dilatador de vasos.E, como antes, conclua a fixação do vaso ao manguito. A parte mais difícil do procedimento é everter o volume do vaso da artéria sobre o manguito, pois ele pode facilmente voltar. É, portanto, importante mobilizar completamente a artéria para selecionar um tamanho apropriado de manguito e dilatar suavemente a luz do vaso antes da eversão.Em preparação para o enxerto, remova o lobo direito da glândula submandibular e mantenha o campo operatório úmido. Posicione o enxerto na região cervical receptora de cabeça para baixo, com a aorta orientada medialmente e a artéria pulmonar lateralmente. Em seguida, puxe a aorta do enxerto sobre o manguito com a artéria carótida e fixe a anastomose com uma ligadura de seda 8-0 em forma de oito ao redor.Em seguida, realize uma incisão no tronco pulmonar na sua face anterior e puxe-o sobre o manguito com a veia jugular externa. Utilize outra ligadura para fixar esta anastomose. Agora remova o clamp da veia jugular externa e, em seguida, da artéria carótida; o coração deve se encher rapidamente com sangue para melhorar a reperfusão; goteje solução salina aquecida sobre o enxerto.Normalmente, o coração iniciará um ritmo sinusal dentro de um minuto. Agora, remova a extensão do cateter no local venoso e verifique a prótese. A anastomose deve estar livre de tensão e os vasos não devem apresentar qualquer torção.Não cauterize os vasos da pele. Como isso pode prejudicar a cicatrização da ferida, o sangramento deve cessar espontaneamente; feche a pele com uma sutura contínua simples. Após a cirurgia, injete no animal um quarto de mililitro de solução salina morna por via subcutânea.Em seguida, injete um coquetel de medicamentos por via subcutânea para antagonizar os efeitos dos narcóticos. Deixe o animal se recuperar sobre uma almofada aquecida até que consiga manter a posição esternal recumbente. Observe o animal por pelo menos uma hora antes de considerá-lo totalmente recuperado.Após a recuperação, o camundongo deve ser mantido isolado por pelo menos três dias. Forneça analgesia por um mínimo de 72 horas. Além disso, pese o animal diariamente para verificar perda severa de peso e monitore a saúde geral do animal.Utilizando o protocolo descrito, camundongos syngênicos Black six foram transplantados para análise histopatológica. Os enxertos foram corados com hematoxilina, eosina e vermelho do Sirius, e seções de animais não transplantados foram utilizadas como controles comparadas aos controles.Isquemia prolongada. A reperfusão resultou em uma forte reação inflamatória com edema tecidual. Hiperemia com infiltração de leucócitos, indicada com estrelas, e oclusão microvascular.A coloração vermelha intensa mostrou deposição acentuada de colágeno intersticial indicada pelas setas. Tais deposições de colágeno não foram observadas nos controles. Este modelo de transplante é uma ferramenta interessante na pesquisa cardiovascular e de transplantes.É especialmente útil investigar a lesão por isquemia e reperfusão miocárdica antes de iniciar os experimentos. Certifique-se de que você pode realizar esta técnica com resultados operatórios reprodutíveis, pois, caso contrário, isso pode representar um viés importante; a anastomose e, portanto, o tempo de isquemia quente devem ser limitados a menos de 20 minutos.

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O rato modelo de transplante cardíaco heterotópico tem sido comprovada por muitos pesquisadores de ser um método importante para o estudo dos mecanismos de rejeição e de resposta imune. No entanto, as técnicas envolvidas são ainda um desafio. Ao modificar as técnicas padrão que temos tido sucesso com mais de 1.000 transplantes.

Transplante cardíaco heterotópico em ratos

O modelo de transplante de coração de murídeo cervical é bem adequado para imunológico, bem como estudos de lesão de reperfusão de isquemia. Nós modificamos o procedimento usando uma técnica cuff não sutura e realizou mais de 1.000 transplantes de sucesso com essa abordagem.  Aqui, nós fornecemos mais detalhes desta técnica para complementar o vídeo.

Murino Cervical Modelo de coração Transplante usando uma técnica Cuff Modificado

Uma técnica é demonstrada para o procedimento microcirúrgico para transplante heterotópico de corações em camundongos, incluindo métodos simplificados para coleta de doadores e anastomose de vasos receptores.

Um método modificado para heterotópico Rato coração transplante

O manuscrito descreve as etapas necessárias para realizar o transplante cardíaco heterotópico no mouse.

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Aqui, nós descrevemos um modelo pré-clínico do grande-animal (porcine) da transplantação transplantação orthotopic do do coração que foi estabelecida firmemente e utilizada para investigar estratégias cardioprotetores novas.

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Uma nova técnica para reconstrução do circuito sanguíneo em um modelo de transplante de coração de camundongo heterotópico é demonstrada.

Reconstrução do circuito sanguíneo em um modelo de transplante de coração de rato abdominal

No presente protocolo, um modelo de transplante cardíaco em camundongos é utilizado para investigar o mecanismo de rejeição do enxerto cardíaco. Neste modelo heterotópico de transplante cardíaco, a eficiência da operação é melhorada, e a sobrevida dos enxertos cardíacos é garantida por uma anastomose cervical término-terminal do implante cardíaco usando uma técnica de Cuff modificada.

Técnica de Cuff Modificada para Modelo de Transplante Cardíaco Heterotópico Cervical:

Modelos de transplante cardíaco de camundongos representam valiosas ferramentas de pesquisa para o estudo da imunologia do transplante. O presente protocolo detalha o transplante cardíaco cervical heterotópico de camundongos que envolve a colocação de manguitos na artéria carótida comum do receptor e no tronco da artéria pulmonar do doador para permitir o fluxo sanguíneo laminar.

Transplante cardíaco cervical heterotópico de camundongo utilizando manguitos vasculares

Este protocolo apresenta uma técnica de transplante cervical heterópico de coração heterópico sem manguito e baseada em sutura em camundongos, projetada para permitir a colocação confiável de um segundo enxerto cardíaco heterotópico para avaliação da tolerância imunológica específica do doador sob condições fisiológicas com interferência mínima de material estranho.

Modelo cervical sem sutura para transplante cardíaco heterotópico secundário para avaliar a tolerância imunológica específica do doador em camundongos

Este protocolo apresenta uma técnica simplificada de anastomose de sutura ponta a ponta para transplante cardíaco cervical murino, fornecendo um modelo robusto e reprodutível para o estudo da imunologia de transplantes.

Transplante cardíaco de camundongo heterópico cervical usando a técnica de anastomose ponta a lateral para estudar imunologia de transplante

Aprenda o transplante cardíaco cervical heterotópico em camundongos usando a técnica de manguito para anastomose simplificada. Este método facilita o estudo da lesão de isquemia-reperfusão e rejeição de enxertos.

Heterotopic Cervical Transplante Cardíaco em Ratos

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