Name: Um modelo de mouse subcrónica e Mild Derrota social Estresse para Compreender déficits comportamentais e fisiológicas induzida por estresse (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 10 s
Description: Aprenda a estabelecer um modelo de estresse social subcrônico leve em camundongos para estudar sintomas depressivos induzidos por estresse. Este método investiga alterações comportamentais e fisiológicas, incluindo hiperfagia e polidipsia.

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Os autores agradecem Drs. Kentaro Nagaoka (Universidade de Tóquio de Agricultura e Tecnologia) e Wataru Iio (Ibaraki) para a discussão útil. Esta pesquisa foi apoiada em parte por Ibaraki University Cooperação entre Agricultura e Ciências Médicas (IUCAM) (A MEXT, Japão) e do Projeto de Pesquisa sobre o Desenvolvimento de Produtos e Alimentos com benefícios de promoção da sanidade agropecuária (NARO) (O MAFF, Japão) .

Os estudos com animais foram aprovados pelo e cumpridas as orientações, tanto do Animal Care e Use Committee da Universidade de Ibaraki e do Ministério da Educação Cultura, Desporto, Ciência e Tecnologia (MEXT), Japão (Notificação No.71). Uma descrição completa do protocolo é demonstrado na Figura 1. 1. Aparelho <ol><li> Prepare dois tipos de gaiolas: uma única gaiola (largura [W] × profundidade [D] × altura [H] = 143 milímetros × 293 milímetros × 148 mm), e uma &quot;derrota sociais (SD)&quot; gaiola (W × D × H = 220 mm × 320 mm × 135 milímetros). </li><li> Como mostrado na Figura 2, a gaiola SD dividir em dois compartimentos com uma placa acrílica transparente divisor (5 mm de espessura) com 15 furos circulares (3 × 5 matriz: 8 mm de diâmetro). </li><li> Obter chips de madeira-de barbear feitos de abetos, purificada por dieta pelotas do alimento, e uma garrafa de água potável. Além disso, obter toalhas de papel, uma máscara e luvas de látex. </li&gt; <li> Para o teste de interação social, preparar uma arena de campo aberto (W × D × H = 40 centímetros x 40 centímetros x 40 cm) feitos de cloreto de polivinilo cinza, um peso de aço (190 g), e uma caixa de interação plástico (W × D × H = 10 centímetros x 10 centímetros × 13 cm; 100 g) com três janelas de malha de arame (W × D = 5 centímetros x 5 cm) (Figura 3). </li><li> Coloque uma câmara CCD (2,8-12 mm; F ​​= 1: 1,4; 1/3 polegada CCD) e um sistema de seguimento automático na sala de testes de comportamento na instalação para animais. Coloque uma prateleira apropriado para as gaiolas de rato na sala de testes de comportamento que se habituem os ratos para o ambiente da sala de teste durante pelo menos 30 min. </li></ol> 2. A habituação ao Meio Ambiente <ol><li> Use macho C57BL / 6JJmsSlc (B6) ratos que são 7 semanas de idade e do sexo masculino Slc: ICR (ICR) ratos que são mais de 5 meses de idade e entregar para a instalação de uma empresa de criação de animais. </li><li> Independentemente mover dois grupos de ratinhos B6 (n= 12 em cada grupo) para a instalação; utilize um grupo (B6 ratos screener) para o rastreio de ratinhos ICR agressivos e outro grupo (sujeito ratos B6) para o desenvolvimento do modelo sCSDS. </li><li> Introduzir ratinhos ICR (n = 12) para a instalação, a fim de rastrear seus comportamentos agressivos. </li><li> Casa os ratos individualmente em gaiolas individuais durante 1 semana sob um ciclo de luz-escuro de 12 h (cerca de 100 lux de luz fluorescente, luzes acesas às 08:00) com temperatura constante (cerca de 23 ° C) e os níveis de humidade (cerca de 40%) de modo a habituar-los para o ambiente. Particionar cada gaiola, colocando placas de plástico de cor branca, entre as gaiolas para que os ratos não são afetados pelos comportamentos dos ratos vizinhos. </li><li> Faça purificada por dieta grãos de ração e água de osmose reversa disponível ad libitum. Use AIN-93G Chow porque os ingredientes de outros peletes de dieta não purificada pode variar. </li><li> Medir o peso corporal, a ingestão de alimentos (FI), e ingestão de água (WI) dos ratinhos todos os dias. Calcule a bganho de peso Ody (BWG) desde o dia inicial. </li></ol> 3. Triagem de Aggressive ICR Mice <ol><li> Depois de habituação para 1 semana como mencionado acima, a tela de ratinhos ICR (residente), utilizando testes de residente-intrusão para um julgamento 3 min com ratos screener B6 (intruso; 8 semanas de idade) no período da tarde (14: 00-17: 00) sob a iluminação de cerca de 300 lux na sala de habitação. <ol><li> Especificamente, teste cada ratinho ICR para três ensaios por dia durante 5 dias consecutivos (15 ensaios no total) em relação a muitos ratos B6 diferentes quanto possível para encontrar que ratinhos ICR mostram alta agressividade para com os intrusos. Durante os testes, registrar o ataque latência e duração do comportamento agressivo (movimentos rápidos com ataque cortante). </li></ol></li><li> Identificar ratinhos ICR hiper-agressivo, verificando as feridas danos em ratos intrusos B6 após cada tentativa. </li><li> Calcular a proporção de ensaios em que a latência ataque é inferior a 30 segundos, como um primeiro índice de pontuação da agressão. </li><li> Calculate a proporção de ensaios em que a latência de ataque é menor do que 3 minutos, como um segundo índice de pontuação da agressão. </li><li> Avaliar os escores de agressividade desde o primeiro índice. Use o segundo índice quando o primeiro índice é igual. </li><li> Selecione os ratinhos ICR que tiveram pontuações mais altas de agressão sem comportamentos hiper-agressivo como ratinhos ICR agressivos. Use os ratinhos ICR agressivos repetidamente ao longo do próximo conjunto de experimentos até aproximadamente 12 meses de idade; no entanto, realizar o processo de triagem para ratos ICR agressivos como descrito acima antes de cada experimento para confirmar a agressividade dos ratinhos ICR. </li><li> Depois de cada sessão do rastreio, registrar o grau de lesão dos ratos screener B6. Se um mouse estiver ferido, isolar o mouse em uma única gaiola e observar o progresso, verificando seu ganho de peso corporal, a ingestão de alimentos e ingestão de água. No caso de feridas graves, que afectam a fisiologia e comportamento em ratinhos, sacrificar-los de acordo com I locaisOrientações ACUC. </li></ol> 4. sCSDS <ol><li> Introduzir ratinhos B6 sujeita 7 dias antes (dia -6) no dia da exposição inicial de stress (dia 1) e casa os ratos individualmente em gaiolas individuais para habituar-los para o ambiente. </li><li> Três dias antes do dia 1 (no dia -2), mover os ratinhos ICR agressivas para um compartimento de cada gaiola de SD, o qual é dividido por um divisor de acrílico para permitir que os ratinhos estabelecer seus territórios nas gaiolas SD (o mesmo número de sujeitos B6 ratos). </li><li> Separe as gaiolas SD usando placas de separação de cor branca, como no estado de gaiola única descrito acima. </li><li> Para ratinhos B6 não-esforçado de controlo, preparar gaiolas SD (metade do número de murganhos) para manter os ratos aos pares; colocar os dois ratos em cada compartimento dividido pelo divisor numa gaiola SD durante 10 dias. </li><li> Após as medições diárias BWG, FI, e WI no dia 1, os ratos local sujeito B6 em um dos compartimentos das gaiolas SD (home-gaiola do residente) no afternoon (14: 00-16: 00) com iluminação de cerca de 300 lux na sala de habitação e medir o tempo de contato físico a partir da primeira mordida ataque para completar o teste residente-intruso. </li><li> No dia 1, defina o tempo de contato físico para 5 min da primeira mordida ataque e ter observadores contar o número de picadas de ataque de ratos ICR que são direcionadas preferencialmente na parte de trás ou flancos do oponente como descrito por Miczek et al. 20 a determinar o grau de stress físico para ratinhos B6. </li><li> Após o tempo de contato físico, B6 resgate sujeitos, e verificar e registrar o seu estado de pele e feridas. Em seguida, colocar os ratinhos B6 para outro compartimento ao lado dos ratinhos ICR nas gaiolas SD até que a exposição ao stress físico no dia seguinte. </li><li> Porque o divisor de acrílico na gaiola SD é transparente e contém furos, expor ratinhos B6 sujeita a várias tensões emocionais, incluindo visual, auditiva e estímulos olfativos, dos ratinhos ICR no compartimento vizinhomento da gaiola SD durante 24 horas todos os dias. </li><li> Medir a BWG, FI, e WI de ratinhos B6 controle diário e, em seguida, colocá-los em cada compartimento nas gaiolas SD para 1 dia. </li><li> No dia 2, após as medições diárias de BWG, FI, e WI, introduzir ratinhos B6 sujeitos nos territórios de outros ratinhos ICR para expô-los ao estresse físico. </li><li> Defina a duração do contato físico em 4,5 min a partir da primeira mordida ataque no dia 2, e contar o número de picadas de ataque. </li><li> Mova ratinhos B6 controle em diferentes compartimentos e mudar as combinações de pares, a fim de embaralhar a colocação e parceiro dos pares de cada dia. </li><li> Diminuir a duração do contacto físico por 0,5 min por dia, de modo que a duração do dia em 10 é definida como 0,5 min a partir do primeiro ataque mordida. </li><li> No dia 7, substituir cerca de metade das aparas de madeira em todos os compartimentos nas gaiolas SD. </li><li> Após a exposição ao stress físico último no dia 10, mover-se ratinhos B6 sujeito em gaiolas individuais. Similar aos ratinhos B6 sujeitos, mova o controle camundongos B6 em gaiolas individuais no dia 10. </li><li> Se um rato ICR não mostra quaisquer picadas de ataque até 5 minutos em cada tentativa nos dias 1 a 10, pôr termo ao julgamento. Substituir o rato ICR com ratinhos ICR agressivos peças e realizar um julgamento alternativa para o mouse assunto B6. </li><li> Se um mouse estiver ferido, isolar o mouse em uma única gaiola e observar o progresso, verificando seu ganho de peso corporal, a ingestão de alimentos e ingestão de água. Siga as diretrizes IACUC para analgesia. No caso de ferimentos graves que afetam a fisiologia e comportamento em camundongos, sacrificá-los de acordo com as directrizes locais IACUC. </li></ol> 5. social Prevenção de teste (Teste de Interacção social) <ol><li> Realizar testes comportamentais para evitação social na parte da manhã (09: 00-12: 00) no dia 11. </li><li> Trinta minutos antes do ensaio, transferir as gaiolas dos ratinhos de controlo e sujeitos B6 para uma prateleira (luz fraca de menos de 1 lux) na comportamentalquarto sob uma iluminação de teste inferior a 20 lux para lhes permitir habituar ao ambiente. </li><li> Para reduzir os efeitos de ordem, alternadamente testar ratinhos de controlo e sujeitos B6. </li><li> Limpar uma arena de campo aberto (iluminada com uma luz de 20 lux no centro do campo) e uma caixa de interacção plástico usando toalhas de papel embebidos com etanol a 70% antes do teste comportamental para cada rato para remover fezes, urina, e todos os odores . </li><li> Coloque um rato desconhecido ICR (não usado como um agressor) a partir de uma única gaiola perto do aparelho de campo aberto. </li><li> Coloque um rato B6 para o campo aberto da caixa de interacção vago, como mostrado na Figura 4. Monitorar e analisar o seu comportamento durante 2,5 minutos usando o sistema de análise automática (descrito no passo 5.10). </li><li> Após o primeiro ensaio, remover o rato B6 do campo e colocá-lo na sua gaiola de origem. </li><li> Em seguida, coloque o macho desconhecido ICR rato (meta social) na caixa de interação e, em seguida, introduzir a B6rato para o campo aberto e monitorar o seu comportamento durante 2,5 min. </li><li> Após a segunda tentativa, retornar tanto a B6 e ratinhos ICR para as suas gaiolas, e limpar o domínio da interacção e a caixa, como mencionado acima. </li><li> Repita essas etapas para cada ratinho B6 para testar o seu comportamento social. Durante cada ensaio, ficha top-view de filmes usando uma câmera CCD. <ol><li> Após os testes comportamentais, calcular o tempo gasto na zona de interacção (em segundos) e na zona de canto (em segundos) para cada teste, como mostrado em Goto et ai. 13. Julgar a posição do rato com base no centro do rato. </li><li> Calcular a pontuação de interação social como 100 × (tempo de interação, com alvo) / (tempo de interação, sem alvo), seguindo os métodos publicados em Krishnan et al. 21. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Heim, C., Binder, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+research+trends+in+early+life+stress+and+depression%3A+Review+of+human+studies+on+sensitive+periods%2C+gene-environment+interactions%2C+and+epigenetics%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Neurol%22%5BJournal%5D)">Current research trends in early life stress and depression: Review of human studies on sensitive periods, gene-environment interactions, and epigenetics.</a> Exp. Neurol. 233 (1), 102-111 (2012).</li>
<li>Whiteford, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+burden+of+disease+attributable+to+mental+and+substance+use+disorders%3A+findings+from+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2010%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Global burden of disease attributable to mental and substance use disorders: findings from the Global Burden of Disease Study 2010.</a> Lancet. 382 (9904), 1575-1586 (2013).</li>
<li>Ferrari, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Burden+Attributable+to+Mental+and+Substance+Use+Disorders+as+Risk+Factors+for+Suicide%3A+Findings+from+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2010%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">The Burden Attributable to Mental and Substance Use Disorders as Risk Factors for Suicide: Findings from the Global Burden of Disease Study 2010.</a> PLoS ONE. 9 (4), e91936(2014).</li>
<li>Flint, J., Kendler, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+major+depression%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The genetics of major depression.</a> Neuron. 81 (3), 484-503 (2014).</li>
<li>Nestler, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+Depression%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of Depression.</a> Neuron. 34 (1), 13-25 (2002).</li>
<li>Gold, P. W., Chrousos, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organization+of+the+stress+system+and+its+dysregulation+in+melancholic+and+atypical+depression%3A+high+vs+low+CRH%2FNE+states%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Organization of the stress system and its dysregulation in melancholic and atypical depression: high vs low CRH/NE states.</a> Mol. Psychiatry. 7 (3), 254-275 (2002).</li>
<li>O'Keane, V., Frodl, T., Dinan, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+atypical+depression+in+relation+to+the+course+of+depression+and+changes+in+HPA+axis+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">A review of atypical depression in relation to the course of depression and changes in HPA axis organization.</a> Psychoneuroendocrinology. 37 (10), 1589-1599 (2012).</li>
<li>Nestler, E. J., Hyman, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+neuropsychiatric+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models of neuropsychiatric disorders.</a> Nat. Neurosci. 13 (10), 1161-1169 (2010).</li>
<li>Katz, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+and+human+depressive+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Biobehav.+Rev%22%5BJournal%5D)">Animal models and human depressive disorders.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 5 (2), 231-246 (1981).</li>
<li>Krishnan, V., Nestler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+depression%3A+molecular+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Top.+Behav.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Animal models of depression: molecular perspectives.</a> Curr. Top. Behav. Neurosci. 7, 121-147 (2011).</li>
<li>Kudryavtseva, N. N., Bakshtanovskaya, I. V., Koryakina, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+model+of+depression+in+mice+of+C57BL%2F6J+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Biochem.+Behav%22%5BJournal%5D)">Social model of depression in mice of C57BL/6J strain.</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 38 (2), 315-320 (1991).</li>
<li>Miczek, K. A., Yap, J. J., Covington, H. E. 3rd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+stress%2C+therapeutics+and+drug+abuse%3A+preclinical+models+of+escalated+and+depressed+intake%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol.+Ther%22%5BJournal%5D)">Social stress, therapeutics and drug abuse: preclinical models of escalated and depressed intake.</a> Pharmacol. Ther. 120 (2), 102-128 (2008).</li>
<li>Goto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subchronic+and+mild+social+defeat+stress+accelerates+food+intake+and+body+weight+gain+with+polydipsia-like+features+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Subchronic and mild social defeat stress accelerates food intake and body weight gain with polydipsia-like features in mice.</a> Behav. Brain Res. 270, 339-348 (2014).</li>
<li>Goto, T., Kubota, Y., Toyoda, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+and+Liver+Metabolic+Profiles+in+Mice+Subjected+to+Subchronic+and+Mild+Social+Defeat+Stress%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Plasma and Liver Metabolic Profiles in Mice Subjected to Subchronic and Mild Social Defeat Stress.</a> J. Proteome Res. , (2014).</li>
<li>Iio, W., Matsukawa, N., Tsukahara, T., Kohari, D., Toyoda, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+chronic+social+defeat+stress+on+MAP+kinase+cascade%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci.+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of chronic social defeat stress on MAP kinase cascade.</a> Neurosci. Lett. 504 (3), 281-284 (2011).</li>
<li>Iio, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+chronic+social+defeat+stress+on+peripheral+leptin+and+its+hypothalamic+actions%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effects of chronic social defeat stress on peripheral leptin and its hypothalamic actions.</a> BMC Neurosci. 15 (72), (2014).</li>
<li>Iio, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anorexic+behavior+and+elevation+of+hypothalamic+malonyl-CoA+in+socially+defeated+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem.+Biophys.+Res.+Commun%22%5BJournal%5D)">Anorexic behavior and elevation of hypothalamic malonyl-CoA in socially defeated rats.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 421 (2), 301-304 (2012).</li>
<li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+JN+%22What%27s+Wrong+With+My+Mouse%3F%3A+Behavioral+Phenotyping+of+Transgenic+and+Knockout+Mice%22">What's Wrong With My Mouse?: Behavioral Phenotyping of Transgenic and Knockout Mice</a>. , 2nd ed, John Wiley & Sons Inc. Hoboken. 978-970 (2007).</li>
<li>Golden, S. A., Covington, H. E. 3rd, Berton, O., Russo, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+standardized+protocol+for+repeated+social+defeat+stress+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">A standardized protocol for repeated social defeat stress in mice.</a> Nat. Protoc. 6 (8), 1183-1191 (2011).</li>
<li>Miczek, K. A., Maxson, S. C., Fish, E. W., Faccidomo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aggressive+behavioral+phenotypes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Aggressive behavioral phenotypes in mice.</a> Behav. Brain Res. 125, 167-181 (2001).</li>
<li>Krishnan, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+adaptations+underlying+susceptibility+and+resistance+to+social+defeat+in+brain+reward+regions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Molecular adaptations underlying susceptibility and resistance to social defeat in brain reward regions.</a> Cell. 131 (2), 391-404 (2007).</li>
<li>Chuang, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+beta3-adrenergic-leptin-melanocortin+circuit+regulates+behavioral+and+metabolic+changes+induced+by+chronic+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">A beta3-adrenergic-leptin-melanocortin circuit regulates behavioral and metabolic changes induced by chronic stress.</a> Biol. Psychiatry. 67 (11), 1075-1082 (2010).</li>
<li>Warren, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiological+sequelae+of+witnessing+stressful+events+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biol.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Neurobiological sequelae of witnessing stressful events in adult mice.</a> Biol. Psychiatry. 73 (1), 7-14 (2013).</li>
<li>Savignac, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+sensitivity+to+the+effects+of+chronic+social+defeat+stress+in+an+innately+anxious+mouse+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Increased sensitivity to the effects of chronic social defeat stress in an innately anxious mouse strain.</a> Neuroscience. 192, 524-536 (2011).</li>
<li>Green, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+Adversities+and+Adult+Psychiatric+Disorders+in+the+National+Comorbidity+Survey+Replication+I%3A+associations+with+first+onset+of+DSM-IV+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Gen.+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Childhood Adversities and Adult Psychiatric Disorders in the National Comorbidity Survey Replication I: associations with first onset of DSM-IV disorders.</a> Arch. Gen. Psychiatry. 67 (2), 113-123 (2010).</li>
<li>Miniati, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+characteristics+and+treatment+outcome+of+depression+in+patients+with+and+without+a+history+of+emotional+and+physical+abuse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Psychiatr.+Res%22%5BJournal%5D)">Clinical characteristics and treatment outcome of depression in patients with and without a history of emotional and physical abuse.</a> J. Psychiatr. Res. 44 (5), 302-309 (2010).</li>
<li>Tao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examining+the+relationship+between+lifetime+stressful+life+events+and+the+onset+of+major+depression+in+Chinese+women%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Affect.+Disord%22%5BJournal%5D)">Examining the relationship between lifetime stressful life events and the onset of major depression in Chinese women.</a> J. Affect. Disord. 135 (1-3), 95-99 (2011).</li>
<li>Valente, S., Fisher, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognizing+and+managing+psychogenic+polydipsia+in+mental+health%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Nurse+Pract%22%5BJournal%5D)">Recognizing and managing psychogenic polydipsia in mental health.</a> J. Nurse Pract. 6 (7), 546-550 (2010).</li>
<li>Dundas, B., Harris, M., Narasimham, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Psychogenic+Polydipsia+Review%3A+Etiology%2C+Differential%2C+and+Treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Psychiatry+Rep%22%5BJournal%5D)">Psychogenic Polydipsia Review: Etiology, Differential, and Treatment.</a> Curr. Psychiatry Rep. 9 (3), 236-241 (2007).</li>
<li>Tsumura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Downregulation+of+AQP2+expression+in+the+kidney+of+polydipsic+STR%2FN+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Downregulation of AQP2 expression in the kidney of polydipsic STR/N mice.</a> Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290 (2), F478-F485 (2006).</li>
<li>Flores, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Schedule-Induced+Polydipsia%3A+Searching+for+the+Endophenotype+of+Compulsive+Behavior%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Schedule-Induced Polydipsia: Searching for the Endophenotype of Compulsive Behavior.</a> World J. Neurosci. 4, 253-260 (2014).</li>
<li>Cryan, J. F., Dinan, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mind-altering+microorganisms%3A+the+impact+of+the+gut+microbiota+on+brain+and+and+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mind-altering microorganisms: the impact of the gut microbiota on brain and and behaviour.</a> Nat. Rev. Neurosci. 13 (10), 701-712 (2012).</li>
</ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Houve diferenças definitivas no peso corporal entre sCSDS ratos e camundongos CSDS submetidos ao protocolo padrão CSDS (5 a 10 min de contato físico com os agressores por dia) 19. Os ratos mostraram aumento sCSDS BWG durante o período de stress, enquanto que os camundongos normais CSDS mostraram uma diminuição no peso corporal durante o período de estresse 21,22,23. Há uma diferença substancial entre os dois protocolos em termos da duração total do contato físico com os agressores durante o período...

Muitos tipos de eventos estressantes ocorrem ao longo da vida dos seres humanos. O estresse excessivo muitas vezes leva a conseqüências fisiológicas prejudiciais em humanos e animais. Nos seres humanos, eventos estressantes são os principais fatores de risco para a precipitação de transtornos psiquiátricos, como depressão 1. A Global Burden of Disease estudo indicaram que a depressão é uma das doenças mais incapacitantes em termos de anos de vida ajustados por incapacidade (DALY) e anos vividos com incapacidade 2. Além disso, a depressão representa a maior proporção de DALYs suicidas 3. Pessoas que sofrem de depressão têm dificuldade em gerir as suas vidas, e, como resultado, sua qualidade de vida, muitas vezes piora. Por conseguinte, existe uma forte necessidade de desenvolver agentes terapêuticos eficazes para melhorar a qualidade de vida desses pacientes. Muitos estudos têm sido realizados sobre os principais transtornos depressivos, e revelaram que a contribuição genética para a doença susceptibility é de cerca de 30-40%, a qual é explicada pelos efeitos de múltiplos loci de efeitos pequenos 4. Por causa dos mecanismos patogénicos subjacentes complexos depressão, a etiologia detalhada da doença permanece elusiva. Os relatórios clínicos indicam que existem subtipos de depressão, como melancólico e atípico depressão 5, que mostram reduzidas e aumento de peso corporal, respectivamente 6. Apesar de 25-30% e 15-30% dos pacientes com depressão representam características melancólicas e atípicos puros, respectivamente, a maioria deles tem características em comum de ambos os subtipos 7. Por conseguinte, a depressão major tem uma ampla variedade de sintomas. A fim de encontrar e desenvolver terapêuticas biomarcadores objectivas para os vários tipos de depressão em seres humanos, é importante estabelecer diversos modelos animais diferentes da depressão 8. Os modelos animais de depressão foram estabelecidas usando várias aproximações incluindo aprendidodesamparo, estresse leve crônico imprevisível e estresse social derrota crônica (CSDS) 9-12. Toyoda e colaboradores estabeleceram os modelos CSDS de ratos e ratinhos de 13-17, a fim de elucidar o metabolismo e comportamentos que estão associados com a depressão. Tendo em conta que modelos animais de depressão são avaliados pela validade de face 18, o contexto em que o modelo está estabelecido é importante. Além disso, Golden et al. 19 relataram os métodos para a criação de ratinhos CSDS em detalhe. Sabe-se que as deficiências de comportamento social de ratinhos CSDS pode ser recuperado por tratamento crónico, mas não pelo tratamento agudo com antidepressivos, e que eles compartilham sintomas semelhantes aos dos doentes com depressão, em termos da regulação da neurotrófico derivado do cérebro fator de seis. Goto et al. 13 previamente desenvolvido o subcrónica e leve estresse social derrota (sCSDS) modelo de mouse, modificando os métodosde Golden et al. 19. Os ratos sCSDS mostrar sintomas polydipsia- e hiperfagia-like seguintes ganhos de peso corporal e índice de água aumentou corpo 13. Neste relatório, o protocolo para o estabelecimento do modelo de rato sCSDS é fornecido e discutimos a utilidade deste modelo.

<table><tbody><tr><td>gaiola simples</td><td>Charles River Laboratories Japão</td><td></td><td>largura [W] &vezes; profundidade [D] &vezes; altura [H] = 143 &vezes; 293 &vezes; 148 mm</td></tr><tr><td>M gaiola</td><td>Natsume Seisakusho</td><td></td><td>W &vezes; D &vezes; H = 220 &vezes; 320 &vezes; 135 mm</td></tr><tr><td>Whiteflake</td><td>Charles River Laboratories Japão</td><td></td><td>Lascas de barbear de madeira feitas de abetos</td></tr><tr><td>AIN-93G</td><td>Levedura</td><td></td><td>Oriental pellets de alimentos de dieta purificada</td></tr><tr><td>Kimtowel</td><td>Nippon Paper Crecia Co.</td><td></td><td>Toalhas de papel</td></tr><tr><td>arena O'</td><td> Hara & Co.</td><td></td><td>feito de policloreto de vinila cinza</td></tr></tbody></table>

um modelo de mouse subcrónica e mild derrota social estresse para compreender déficits comportamentais e fisiológicas induzida por estresse

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Eventos estressantes da vida geralmente aumentam a incidência de depressão em humanos. Para estudar os mecanismos da depressão, o desenvolvimento de modelos animais de depressão é essencial. Como existem vários tipos de depressão, vários modelos animais são necessários para uma compreensão mais profunda do transtorno. Anteriormente, foi estabelecido um modelo de camundongo de estresse de derrota social subcrônico e leve (sCSDS) usando um paradigma de estresse de derrota social crônico modificado (CSDS). No paradigma, para reduzir as lesões físicas dos agressores, a duração do contato físico entre o agressor e um subordinado foi reduzida em comparação com o paradigma CSDS original. Os camundongos sCSDS mostraram aumento do ganho de peso corporal, ingestão de alimentos e ingestão de água durante o período de estresse, e seus comportamentos sociais foram suprimidos após o período de estresse. Em termos de validade aparente do excesso de comer e beber demais induzido pelo estresse após o aumento do ganho de peso corporal, os camundongos sCSDS podem mostrar algumas características relacionadas à depressão atípica em humanos. Assim, um modelo de camundongo de sCSDS pode ser útil para estudar os mecanismos patogênicos subjacentes à depressão. Este protocolo ajudará a estabelecer o modelo de camundongo sCSDS, especialmente para estudar os mecanismos subjacentes ao ganho de peso induzido por estresse e sintomas semelhantes a polidipsia e hiperfagia.

Para monitorizar o grau de stress físico ao longo dos períodos de 10 dias, o número de picadas de ataque em ratos ICR foi contado manualmente por um investigador. A Figura 5A indica os valores individuais para o número de picadas de ataque recebidos. Houve grande variabilidade na fase inicial (cerca de 10-120 mordidas no dia 1), mas essa variabilidade foi reduzida na fase posterior (aproximadamente 5-20 mordidas no dia 10). Figura 5B indica que o número médio de ataque bites recebidos d...

Aqui, métodos para desenvolver um modelo de mouse subcrónica e leve estresse derrota social são descritas e utilizadas para investigar as características patogênicas de depressão, incluindo hyperphagia- e sintomas polidipsia-like seguintes aumento do peso corporal.

Um modelo de mouse subcrónica e Mild Derrota social Estresse para Compreender déficits comportamentais e fisiológicas induzida por estresse

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

O objetivo geral deste procedimento é estabelecer um modelo murino de estresse social de derrota subcrônico e leve, ou S-C-S-D-S, para estudar os mecanismos dos sintomas induzidos pelo estresse. Isso é realizado primeiramente habituando camundongos machos individuais da linhagem black six e camundongos ICR ao ambiente. O segundo passo é triar e selecionar camundongos ICR agressivos.Em seguida, os camundongos S-C-S-D-S são expostos individualmente a camundongos black six, repetidamente ao longo de vários dias. As pontuações finais de comportamento social, peso corporal, consumo de alimento e consumo de água revelam todas as alterações induzidas pelo estresse no modelo de camundongo S-C-S-D-S. A fim de identificar biomarcadores e desenvolver indicadores objetivos para os diversos tipos de depressão em humanos, é importante estabelecer diversos modelos animais diferentes de declínio. Para esta demonstração, são utilizados camundongos machos pretos da linhagem C57BL/6 com sete semanas de idade e camundongos machos ICR mais velhos. Forme dois grupos de uma dúzia de camundongos C57BL/6 e um grupo de uma dúzia de camundongos ICR. Transfira os grupos independentemente para a instalação de alojamento. Um grupo de C57BL/6 é destinado à triagem dos camundongos ICR e o outro é para o desenvolvimento do modelo S-C-S-D-S.Mantenha os camundongos individualmente por uma semana em condições padrão com umidade relativa em torno de 40% entre as gaiolas. Coloque barreiras brancas opacas para que os camundongos não possam ver uns aos outros diariamente. Meça a ingestão de alimento e água de cada animal, bem como a massa corporal de cada um.Após a semana de habituação, realize testes de intruso residente com os camundongos ICR como residentes durante as horas da tarde. Conduza o teste por três minutos sob 300 lux no ambiente de alojamento; durante o teste, registre a latência para o ataque e a duração dos movimentos rápidos com mordida, o que define um ataque. Após cada ensaio, verifique os camundongos black six quanto a lacerações. Utilize isso como um índice de comportamento hiperagressivo nos camundongos ICR para o primeiro índice de agressividade.Utilize a proporção de ensaios com latência de ataque inferior a 30 segundos. Selecione os camundongos ICR mais agressivos que não sejam hiperagressivos. Utilize esses camundongos no modelo S-C-S-D-S.Repita o teste três vezes ao dia durante cinco dias consecutivos. Cada um dos 12 camundongos ICR deve encontrar cada um dos 12 camundongos black six pelo menos uma vez. Introduza os camundongos testados black six no ambiente de alojamento.Protegidos da visão de camundongos vizinhos. Deixe-os se habituarem assim por sete dias. São necessários dois camundongos black six para cada camundongo ICR agressivo no estudo.Três dias antes de iniciar o experimento, transfira os camundongos ICR agressivos para um compartimento de cada gaiola SD. Uma gaiola SD contém um divisor de acrílico móvel. As gaiolas SD devem ser todas bloqueadas de forma que os vizinhos não possam ser vistos.Na casa seguinte, os camundongos pretos seis controle não submetidos a estresse, de modo que cada par ocupe compartimentos opostos de gaiolas SD todos os dias do estudo. Monitore o peso, a mudança na água e o consumo de alimento de todos os camundongos no primeiro dia do experimento. Após realizar as medições regulares, coloque um camundongo preto seis sujeito no compartimento ocupado por um camundongo ICR.Realize este procedimento no meio da tarde e sob 300 trancas na sala de alojamento. Após o primeiro ataque, comece a pontuar os ataques durante cinco minutos. Conte o número de ataques direcionados às costas ou flanco do camundongo intruso.Após cinco minutos, retire o camundongo black six e verifique a presença de feridas. Em seguida, coloque o camundongo black six no compartimento oposto ao do mesmo camundongo ICR até o próximo dia de teste. Dessa forma, o camundongo black six ainda poderá ver, ouvir e sentir o cheiro do camundongo ICR, experimentando estresse cumulativo ao longo do relógio.No segundo dia após a coleta das medidas de peso, introduza cada camundongo black six em um território diferente de camundongo ICR. Após o primeiro ataque, permita que os camundongos interajam por quatro minutos e meio. Colete as mesmas medidas do primeiro dia.Após a interação, verifique feridas no camundongo black six. Devolva-o à mesma gaiola, mas no lado oposto ao do camundongo agressivo. A cada dia consecutivo de teste.Reduza o tempo de interação entre os camundongos em 30 segundos na última sessão. O tempo de interação é de apenas 30 segundos após o primeiro ataque. Se em qualquer dia, após cinco minutos, um camundongo ICR não realizar um ataque, remova-o do estudo e substitua-o por um reserva.Introduza o camundongo black six àquele camundongo reserva no mesmo teste hoje pela manhã, no dia 11, e realize um teste com todos os camundongos black six em um campo aberto meia hora antes do início. Coloque as gaiolas dos camundongos black six controle e dos camundongos black six sujeitos em uma prateleira sob menos de uma chave de iluminação; a iluminação do ambiente deve ser de aproximadamente 20 chaves próximo à arena. Mantenha um único camundongo ICR agressivo desconhecido.Inicie o experimento colocando um camundongo black six em uma caixa de campo aberto com uma caixa de interação vazia por dois minutos e meio. O comportamento deve ser monitorado por um sistema automatizado. Após dois minutos e meio, retorne o camundongo black six à sua gaiola de origem e coloque o camundongo ICR dentro da caixa de interação no campo aberto.Este camundongo é o alvo e representa o ponto central da zona de alvo no campo aberto. Em seguida, reintroduza o camundongo preto ao campo aberto com o alvo por dois minutos e meio. Após a conclusão do teste, devolva ambos os camundongos às suas gaiolas de origem e limpe a arena do campo aberto.Prossiga com a aplicação dessa experiência a cada camundongo black six posteriormente. Determine o tempo gasto pelos camundongos black six em cada zona de interação e nas zonas dos cantos a partir desses valores. Calcule o escore de interação social utilizando o protocolo descrito.Os ataques foram pontuados durante um período de 10 dias. Houve uma variabilidade considerável no início, mas isso abriu caminho para a consistência. Os camundongos tiveram menos tempo para interagir a cada dia.Daí a tendência descendente. O número médio de mordidas de ataque recebidas diminuiu gradualmente ao longo do tempo porque a duração do contato físico diminuiu de cinco minutos para 30 segundos. Camundongos estressados pareceram ganhar mais peso ao longo dos 10 dias do que os camundongos controle.Não houve muita diferença no consumo de alimentos. No entanto, os camundongos estressados consumiram o dobro do volume de água, e isso foi bastante significativo no teste de interação social realizado após o regime de estresse de 10 dias. Houve uma diferença significativa entre os camundongos controle e os estressados, como seria de se esperar.Os camundongos controle foram muito mais exploratórios quando o camundongo-alvo estava presente. O uso do modelo de estresse social crônico subagudo em camundongos é vantajoso porque esses camundongos modelo podem nos ajudar a compreender melhor o mecanismo subjacente ao ganho de peso induzido pelo estresse e aos sintomas de polidipsia e hiperfagia.

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Research

JoVE Journal

Behavior

Comportamento

O protocolo de estresse leve crônico imprevisível (UCMS) é um método validado para estudar mudanças comportamentais e fisiológicas associadas ao estresse crônico e sintomas depressivos. Oito semanas de imposição do protocolo UCMS induzem mudanças comportamentais e maus resultados de saúde em roedores de ambos os sexos.

Uma crônica Protocolo de estresse leve Imprevisível para sintomas depressivos Instigando, mudanças de comportamento e resultados negativos de saúde em Roedores

Aqui nós apresentamos o protocolo imprevisíveis stress leve crônica em ratos. Este protocolo induz um fenótipo de depressivo, como a longo prazo e permite avaliar a eficácia dos antidepressivos putativos em reverter os défices de depressiva como comportamentais e neuromolecular.

O protocolo de estresse suave crônico imprevisível para induzir Anhedonia em ratos

A tarefa da barreira do labirinto Y é um teste de comportamento que examina a motivação para gastar esforço para recompensa. Aqui, discutimos o teste de múltiplos estressores crônicos bem validados, incluindo corticosterona crônica e estresse de derrota social com esse comportamento, bem como o novo estresse crônico de derrota social não discriminatória (CNSDS), que é eficaz nas mulheres.

Estresse crônico muda comportamento de escolha relacionado ao esforço em uma tarefa de barreira y-maze em camundongos

Apresentamos aqui um modelo de rato de ansiedade induzido por isolamento social (SI) que utiliza camundongos selvagens do tipo C56BL/6J para induzir estresse e comportamento semelhante à ansiedade com manuseio mínimo e sem procedimentos invasivos. Este modelo reflete os padrões da vida moderna de isolamento social e é ideal para estudar ansiedade e distúrbios relacionados.

Modelo de Isolamento Social: Um Modelo de Roedores Não Invasivo de Estresse e Ansiedade

O teste de segurança contra ameaças sociais permite uma avaliação simultânea do desenvolvimento de evitação social como uma medida da aprendizagem condicionada aversiva e da capacidade de discriminação de segurança contra ameaças sociais, ambos utilizados para identificar indivíduos suscetíveis e resilientes ao estresse dentro de um único grupo de camundongos machos cronicamente derrotados socialmente.

Teste de segurança contra ameaças sociais revela fenótipos psicossociais relacionados ao estresse

Desenvolvemos um modelo de estresse de derrota social acelerada para camundongos adolescentes C57BL/6, que funciona em machos e fêmeas e permite a exposição durante períodos discretos da adolescência. A exposição a esse modelo induz evitação social, mas apenas em um subconjunto de camundongos machos e fêmeas derrotados.

Modelo de estresse de derrota social para camundongos adolescentes C57BL / 6 machos e fêmeas

Este protocolo detalha como realizar o estresse crônico de derrota social de 10 dias em camundongos machos adolescentes para produzir evitação social duradoura na idade adulta em mais de 60% dos camundongos.

Estresse crônico de derrota social em camundongos machos adolescentes

Ao integrar quatro estressores sociais diários, o presente estudo descreve um modelo de estresse social integrado múltiplo (MISS) para transtornos psiquiátricos em camundongos C57BL / 6J fêmeas. Após dez dias de exposição repetida ao MISS, os camundongos desenvolveram fenótipos depressivos e ansiosos, fornecendo assim um modelo animal natural baseado em etiologia para estudar transtornos psiquiátricos em mulheres.

Um modelo de estresse social integrado múltiplo para transtornos psiquiátricos em camundongos C57BL / 6J fêmeas

Este vídeo mostra o paradigma residente-intruso em ratos. Este teste é um método padronizado para medir a agressividade ofensiva, comportamento defensivo e violência em um ambiente semi-natural. A utilização do paradigma para experiências de stress social está bem explicado.

O Paradigma Residente-intruder: um teste padronizado para Agressão, Violência e Estresse social

Este artigo descreve o uso de residente intruso estresse social crônico como um paradigma ethologically relevantes para a depressão pós-parto modelo e ansiedade em roedores lactantes.

Usando Social Stress Crônico ao Modelo depressão pós-parto em lactação Roedores

Aprenda a estabelecer um modelo de estresse social subcrônico leve em camundongos para estudar sintomas depressivos induzidos por estresse. Este método investiga alterações comportamentais e fisiológicas, incluindo hiperfagia e polidipsia.

Um modelo de mouse subcrónica e Mild Derrota social Estresse para Compreender déficits comportamentais e fisiológicas induzida por estresse (Vídeo) | JoVE Journal

Um modelo de mouse subcrónica e Mild Derrota social Estresse para Compreender déficits comportamentais e fisiológicas induzida por estresse

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