Name: Avaliando cortical cerebral microinfartos em alta resolução MR Imagens (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 39 s
Description: Aprenda a avaliar microinfartos corticais cerebrais em imagens de ressonância magnética de alta resolução usando protocolos ex vivo de 7T e critérios de classificação para 7T e 3T. Este método valida a patologia microvascular em tecido cerebral humano pós-morte.

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A investigação que conduziu a estes resultados recebeu financiamento do Conselho Europeu de Investigação ao abrigo do Sétimo Programa-Quadro da União Europeia [FP7/2007-2013] / acordo de subvenção ERC [337333]. A pesquisa de SvV e GJB é apoiada por uma bolsa VIDI [91711384] da ZonMw, a Organização Holandesa para Pesquisa e Desenvolvimento em Saúde.

O uso de amostras de autópsia e in vivo imagens de RM para este protocolo foi em conformidade com os regulamentos locais e aprovado pelo comitê de ética local do University Medical Center Utrecht (UMCU). 1. MR-guided histopatológico Validação de Cortical microinfartos <ol><li> Ex vivo RM <ol><li> Ao manusear tecido cerebral, sempre usar luvas e vestuário de protecção adequado. </li><li> Com base na questão de pesquisa, selecione adequadas, de preferência de 10 mm de espessura, placas cerebrais fixados em formol. As placas cerebrais para este papel foram derivados do departamento de neuropatologia do UMCU e Centro Médico da Universidade VU (VUMC), com base em patologia conhecida Alzheimer. <ol><li> Formalina-fix cérebros inteiros de, pelo menos, 3-4 semanas de imersão em formalina a 10%, antes do corte. Corte os cérebros em lajes coronais, que contém ambos os hemisférios. </li><li> Para a digitalização post-mortem, selecione, por exemplo, sla três cérebroBS por cérebro, feita a partir de córtex frontal, temporo-parietal e occipital do cérebro. O protocolo atual é otimizado para o uso de três placas cerebrais coronais, que contém ambos os hemisférios, em uma sessão de digitalização. </li></ol></li><li> Tirar fotografias das placas cerebrais em ambos os lados (dorsal e caudal), e tomar notas cuidadosas (ou fazer esboços) da orientação das lajes no recipiente e no scanner, para mais tarde co-localização de histologia com ressonância magnética. </li><li> Encha um recipiente construído para o efeito (Figura 1) - neste caso, um que se encaixa dentro da bobina cabeça MR - com formalina a 10% fresco à temperatura ambiente. Se o sinal de ressonância magnética a partir do fluido é indesejada, o uso de um lubrificante de perfluoropoliéter (PFPE) com uma densidade conveniente, em vez de formalina (como Fomblin ou Galden PFPE). Certifique-se de usar uma câmara de fluxo ao manusear formalina. </li><li> Ao colocar as placas cerebrais no recipiente, certifique-se para evitar bolhas de ar. Remover a maior parte das bolhas de ar por suavemente shaking do tecido, quer à mão, ou utilizando um banho com agitação, ou ultra-som. </li><li> Certifique-se as placas não pode mover-se no interior do recipiente e limitar a quantidade de fluido necessária, por meio de um recipiente menor para manter as placas no lugar (Figura 1). </li><li> Cobrir o recipiente de plástico ou com parafilme, para evitar a evaporação e para proteger o MR (cabeça) da bobina de contaminação potencial (Figura 2). </li><li> Use um scanner de corpo inteiro 7T MRI com uma bobina adequada. Neste protocolo a transmissão de dupla e de 32 canais receber bobina de cabeça é usado. </li><li> Coloque o recipiente dentro da bobina de cabeça, enrolada em uma toalha ou cirúrgico underpad, para evitar a potencial derramamento de líquidos. Certifique-se o recipiente não pode mover-se, e que as placas permanecem na posição horizontal (figura 2). </li><li> Execute uma verificação de pesquisa que podem ser usados ​​para o planejamento dos scans de alta resolução, correto inhomogeneity B0 usando uma ferramenta de calços adequado, e calibrar o poder RFpara se obter os ângulos correctos aleta (as lajes de alguns requerem menos energia em comparação com in vivo de varrimento de uma cabeça inteira) de acordo com o protocolo do fabricante. </li><li> Planejar as aquisições de alta resolução na varredura levantamento, para garantir as placas cerebrais estão totalmente incluídos na vista campo de. Digitalize as placas cerebrais O / N com as aquisições de alta resolução apresentados na Tabela 1, que são otimizados para ex vivo de imagens. O protocolo de aquisição aqui apresentado inclui uma imagem ponderada DOM 3D, T2 e T1 com uma resolução isotrópica de 0,4 mm, e um T2 * ponderada imagem com uma resolução isotrópico de 0,18 mm. </li><li> Identificar os processos automáticas de software que possam interromper a digitalização, como automatizados up-datas que são executados O / N, ou avisos para a estimulação de nervos periféricos, e certifique-se os procedimentos do scanner não será interrompido por estes. </li><li> Monitorar o scanner O / N para possíveis confirmação de pop-ups que podem interromper a digitalização, usando, por exemplo, uma conexão VPN.</li><li> Voltar na manhã seguinte (depois de um tempo de varredura total de aproximadamente 12 hr no protocolo atual). Armazene as placas cerebrais em formalina, limpar. </li><li> Salve as imagens para um disco rígido externo. </li></ol></li></ol><img alt="figura 1" src="/files/ftp_upload/53125/53125fig1.jpg" /> Figura 1. Preparação de placas cerebrais fixados em formol para a digitalização post-mortem em T7 ressonância magnética. Um recipiente Perspex propositadamente construído é preenchido com 10% de formalina ou um lubrificante perfluoropoliéter (PFPE) se o sinal MRI do fluido é indesejada. Três de 10 mm de espessura, placas cerebrais coronais fixados em formalina são colocados no recipiente. Um recipiente mais pequeno é usada para manter as placas no lugar. Tape o segundo recipiente para o primeiro, para evitar o movimento. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/53125/53125fig2.jpg" /> Figura 2. Colocaçãode recipiente construído para o efeito na cabeça da bobina T7. Cobrir o recipiente de plástico com parafilme ou para evitar a evaporação da formalina. Coloque o recipiente, fechado em uma toalha ou underpad cirúrgica, na bobina cabeça de um scanner MR T7. Certifique-se o recipiente não pode mover-se, e que as placas de permanecer em posição horizontal. <ol start="2"><li> Histopatologia <ol><li> Identificar possíveis CMIS corticais - ou outras lesões de interesse - nas imagens adquiridas. Estas lesões são os alvos para análise histológica. Cuidado com os artefatos, tais como danos post-mortem de tecidos (que às vezes aparecem na superfície de placas cerebrais devido a cortes) ou artefatos de armazenamento formalina a longo prazo (por exemplo, hypointensities MRI grosseiros que representam mudanças neuropil 8). Nota: Diferentes subtipos histopatológicos da CMIS corticais têm diferentes características de RM. Para mais detalhes sobre os subtipos CMI, o leitor é remetido para um recente estudo ex vivo 7. </li><li> After a identificação de possíveis CMIS corticais nas imagens de RM, provar a região de interesse para validação histopatológico. Certifique-se de cortar uma região, contendo marcos anatômicos, por correspondência posterior da ressonância magnética com a histopatologia. Execute histopatologia padrão, como seguida (mas outras abordagens também podem ser aplicadas). </li><li> Cortar uma região de aproximadamente 30 x 20 x 5 mm3 contendo uma possível CMI cortical. </li><li> Para obter amostragem precisas, estimar a localização da lesão pela espessura de corte das imagens de RM, e arquitetura do tecido. Cortadas manualmente o tecido ligeiramente acima da localização da lesão estimativa para limitar a quantidade de cortes seriados (após imersão em parafina) que é necessária para o direccionamento da lesão. </li><li> Certifique-se o tecido da amostra se encaixa uma cassete de tecido. Coloque a superfície a ser cortada de face para baixo no cassete. </li><li> Mantenha todas as cassetes de tecido em formalina a 10%, até que o processamento do tecido. </li><li> Processar o tecido para inclusão em parafina. Isto envolve geralmente um procedimento automatizado da desidratação do tecido, por meio de uma série de álcool graduado (por exemplo, 70% a 95% a 100%) banhos, e compensação do tecido em xileno. </li><li> Incorporar o tecido em blocos de parafina. Assegurar a superfície a ser cortado fica voltada para cima, após a incorporação. </li><li> Corte 4-6 mm cortes seriados com um micrótomo, até que a lesão alvo é recuperado. </li><li> Flutuador as secções na superfície de um banho de água a 37 ° C. Monte as secções em lâminas de vidro. Colocar as lâminas em um bloco de aquecimento para ligar o tecido ao vidro. Loja desliza O / N à temperatura ambiente. </li><li> Executar uma coloração adequada (por exemplo, H &amp; E coloração) nas primeiras seções, manter seções em branco adjacentes para uso posterior (por exemplo, imuno-histoquímica). </li><li> Lamela as secções H &amp; E manchada, utilizando uma gota de meio de escolha de montagem. Abaixe o deslizamento, evitando bolhas de ar. </li><li> Estude as seções usando um microscópio de luz, em um mag apropriadonification. Compare seções para as imagens de RM previamente obtidos. </li></ol></li></ol> 2. Avaliar microinfartos corticais em In Vivo 7T MRI <ol><li> Execute 7T MRI na população de pacientes de seu interesse, utilizando o protocolo vivo em MRI (que inclui pelo menos um dom 3D), conforme descrito no ponto 6. </li><li> Avaliar CMIS corticais nas imagens in vivo 7T MR conforme detalhado nas etapas a seguir, utilizando os seguintes critérios de classificação 7T para CMIS: CMIS corticais são hipersinal em FLAIR (com ou sem um centro hipointenso), hiperintensa em T2, hipointenso em T1, detectável em pelo menos dois pontos de vista do cérebro (por exemplo, sagital e transversal), restrita ao córtex, distinto espaços perivasculares, com uma maior dimensão ≤4 mm 6,7. </li><li> Use uma interface com três visualizadores de imagem, para ver simultaneamente FLAIR, T1, T2 e imagens, por exemplo, MeVisLab (Figura 3). Esta plataforma allows para incorporar vários telespectadores e de colocar marcadores sobre possíveis locais de lesão. </li><li> Primeiro avaliar um hemisfério em FLAIR em vista sagital. Tela de todo o córtex para lesões hiperintensas. Qualquer hyperintens lesão ≤4 mm é um possível CMI. Coloque marcadores clicando em cada possível CMI. </li><li> Repita para o outro hemisfério. </li><li> Verifique todos os locais marcados em T1 e T2. Descarte um local que não seja hipointenso em T1 ou T2 hiperintensa em. </li><li> Avaliar vista transversal, em FLAIR, T1, e T2. Descarte um local que não seja visível. Confira a vista coronal em caso de dúvida. </li><li> Cuidado com os artefatos de ressonância magnética e variações anatômicas (especialmente bordas sulcamento). </li><li> Salvar marcadores. </li></ol><img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/53125/53125fig3.jpg" /> Figura 3. Exemplo plataforma de visualização de imagem para a avaliação da microinfartos corticais. Uma interface é usada, integrated em MeVisLab. Este programa permite incorporar vários visualizadores em simultâneo, para alternar facilmente entre sagital / transversal / orientação coronal, e de colocar marcadores e salvar sobre possíveis locais de lesão. (Diferentes marcadores podem ser escolhidos para diferentes tipos de lesões). 3. Avaliação microinfartos corticais em In Vivo 3T MRI <ol><li> Adquirir imagens de RM 3T da população paciente de seu interesse. Os dados existentes podem também ser usadas, desde que o protocolo de ressonância magnética continha pelo menos um T1 3D, e um toque e T2. </li><li> Avaliar CMIS corticais nas imagens in vivo 3T MR conforme detalhado nas etapas a seguir, utilizando os seguintes critérios de classificação 3T para CMIS: CMIS corticais são hipointenso em T1 (isointensa com CSF), detectável em pelo menos dois pontos de vista do cérebro (por exemplo sagital e transversal), restrito ao córtex, distinto de espaços perivasculares, com uma maior dimensão ≤4 mm. <ol><li> Explorar o local de um Hypointense lesão cortical encontrado no T1 e T2 em FLAIR imagens ponderadas. Classifique a lesão como um provável cortical CMI se a localização é hyperintense ou isointensa (com a matéria cinzenta) no DOM e T2. Descartar a lesão se no mesmo local um sinal hipointensa é encontrado em T2, que indica a lesão hipointensa T1 é, quer devido a uma lesão hemorrágica, um navio, ou um artefacto. Em caso de dúvida, verifique o local em um T2 * imagem ponderada 9. </li></ol></li><li> Usar a mesma interface, tal como descrito acima. </li><li> Primeiro avaliar um hemisfério em T1 em vista sagital. Tela de todo o córtex para lesões hypointense focais. Qualquer lesão hipointensa ≤4 mm é um possível CMI. Coloque marcadores clicando em cada possível CMI. </li><li> Repita para o outro hemisfério. </li><li> Avaliar transversal T1, e verifique simultaneamente todos os locais marcados no DOM transversal e T2. Regard a localização como um provável CMI se é hyperintense ou isointensa no DOM e T2. Descarte um i localizaçãof parece ser um artefato ou variação anatômica. Descarte de uma localização se é hipointenso em T2. </li><li> Cuidado com os artefatos que parecem CMIS em T1 imagens ponderadas, especialmente tocar artefatos nas &#39;bordas&#39; do cérebro que aparece em vários giros adjacente, atente para as bordas dos sulcos, atente para navios de grande porte nos lobos temporais (no os pólos). Finalmente, recomenda-se a descartar possíveis CMIS corticais em tecido nas proximidades de um enfarte cortical maior. </li><li> Salvar marcadores. </li></ol>

<ol><li>Vander Kolk, A. G., Hendrikse, J., Zwanenburg, J. J., Visser, F., Luijten, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+applications+of+7+T+MRI+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Radiol%22%5BJournal%5D)">Clinical applications of 7 T MRI in the brain.</a> Eur J Radiol. 82 (5), 708-718 (2013).</li>
<li>Pantoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+small+vessel+disease%3A+from+pathogenesis+and+clinical+characteristics+to+therapeutic+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Cerebral small vessel disease: from pathogenesis and clinical characteristics to therapeutic challenges.</a> Lancet Neurol. 9, 689-701 (2010).</li>
<li>Gouw, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+of+small+vessel+disease%3A+a+systematic+review+of+MRI+and+histopathology+correlations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity of small vessel disease: a systematic review of MRI and histopathology correlations.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 82 (2), 126-135 (2011).</li>
<li>Smith, E. E., Schneider, J. A., Wardlaw, J. M., Greenberg, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+microinfarcts%3A+the+invisible+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Neurol%22%5BJournal%5D)">Cerebral microinfarcts: the invisible lesions.</a> Lancet Neurol. 11, 272-282 (2012).</li>
<li>Brundel, M., de Bresser, J., van Dillen, J. J., Kappelle, L. J., Biessels, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+microinfarcts%3A+a+systematic+review+of+neuropathological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Cereb.+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Cerebral microinfarcts: a systematic review of neuropathological studies.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 32 (3), 425-436 (2012).</li>
<li>Van Veluw, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+detection+of+cerebral+cortical+microinfarcts+with+high-resolution+7T+MRI%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">In vivo detection of cerebral cortical microinfarcts with high-resolution 7T MRI.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 33 (3), 322-329 (2013).</li>
<li>Van Veluw, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+MR+detectable+cortical+microinfarcts%3B+a+classification+study+with+7+tesla+post-mortem+MRI+and+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Floow+Metab.+Jan%22%5BJournal%5D)">The spectrum of MR detectable cortical microinfarcts; a classification study with 7 tesla post-mortem MRI and histopathology.</a> J Cereb Blood Floow Metab. Jan. 21, 10-1038 (2015).</li>
<li>Van Duijn, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+artifacts+in+human+brain+tissue+after+prolonged+formalin+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">MRI artifacts in human brain tissue after prolonged formalin storage.</a> Magn Reson Med. 65 (6), 1750-1758 (2011).</li>
<li>Van Veluw, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+microinfarcts+on+3T+MRI%3A+clinical+correlates+in+memory-clinic+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimers+Dement%22%5BJournal%5D)">Cortical microinfarcts on 3T MRI: clinical correlates in memory-clinic patients.</a> Alzheimers Dement. 5, 10-1016 (2015).</li>
<li>Van Dalen, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+microinfarcts+detected+in+vivo+on+3+Tesla+MRI%3A+clinical+and+radiological+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Cortical microinfarcts detected in vivo on 3 Tesla MRI: clinical and radiological correlates.</a> Stroke. 46 (1), 255-257 (2015).</li>
<li>Vander Kolk, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+the+intracranial+atherosclerotic+vessel+wall+using+7T+MRI%3A+initial+comparison+with+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22AJNR+Am+J+Neuroradiol%22%5BJournal%5D)">Imaging the intracranial atherosclerotic vessel wall using 7T MRI: initial comparison with histopathology.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 36 (4), 694-701 (2015).</li>
<li>Visser, F., Zwanenburg, J. J., Hoogduin, J. M., Luijten, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+magnetization-prepared+3D-FLAIR+imaging+at+7.0+Tesla%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">High-resolution magnetization-prepared 3D-FLAIR imaging at 7.0 Tesla.</a> Magn Reson Med. 64 (1), 194-202 (2010).</li>
<li>Brundel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+prevalence+of+cerebral+microbleeds+at+7Tesla+MRI+in+patients+with+early+Alzheimer%E2%80%99s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Alzheimers+Dis%22%5BJournal%5D)">High prevalence of cerebral microbleeds at 7Tesla MRI in patients with early Alzheimer’s disease.</a> J Alzheimers Dis. 31 (2), 259-263 (2012).</li>
<li>Kuijf, H. J., et al. Detecting cortical cerebral microinfarcts in 7.0 T MR images. IEEE International Symposium on Biomedical Imaging. , 982-985 (2013).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

CMIS têm atraído cada vez mais atenção nos últimos anos. Um crescente corpo de evidências derivadas de estudos de autópsia identificou CMIS como contribuintes importantes para o declínio cognitivo e demência 4,5 relacionada com a idade. CMIS são agora detectável em T7 e também 3T MRI. Otimização e padronização de protocolos de avaliação para estas lesões irá apoiar a rápida implementação de detecção CMI robusto e válido em estudos de coorte em todo o mundo. Isto irá permitir uma avaliação generalizada da rele...

A aplicação de ultra-alto campo 7 Tesla (T) MRI em estudos paciente está evoluindo rapidamente 1. Este documento apresenta uma aplicação representativa de T7 MRI no contexto de doença vascular cerebral no cérebro humano envelhecimento. A doença cerebrovascular é a principal causa do declínio cognitivo e demência. Esta contribuição à demência vascular freqüentemente envolve os pequenos vasos do cérebro, tais como arteríolas, pequenas veias e capilares. Assim, é referido como doença cerebral de pequenos vasos (SVD) 2. Uma vez que os pequenos vasos cerebrais são demasiado pequenos para capturar com ressonância magnética convencional, apenas as consequências da SVD - ou seja, a lesão do tecido resultante - pode ser visualizado. Isso inclui hyperintensities branco assunto, micro hemorragias cerebrais, infartos lacunares e 3. Outras manifestações importantes da SVD são microinfartos cerebrais (CMIS) 4. Estudos de autópsias relatam alta prevalência de CMIS em vascular demência e doença de Alzheimer 5. No entanto, devido às suas pequenas dimensões (variando de 50 pM a poucos milímetros) que escapar à detecção de ressonância magnética convencional 4,5. 7T MRI fornece imagens de alta resolução com uma melhor relação de sinal-para-ruído-e o contraste, o que permite a detecção de determinadas estruturas de lesões e para além do limite de detecção de ressonância magnética convencional. Esta técnica foi aplicada para detectar, portanto, CMIS. Para identificar possíveis CMIS, muitas in vivo scans 7T RM foram previamente selecionados para lesões com tamanhos &lt;5 mm e de imagem características consistentes com propriedades isquêmicos. Tais lesões pode ser identificado de forma fiável no córtex. Estas lesões alongadas focais foram hiperintensa em T7 DOM (voxels 0,8 mm isotrópico), restrita ao córtex e parecia se estender desde a superfície cortical, hiperintensa em T2 (voxels 0,7 mm isotrópicos), e hipointensa em T1 (1,0 mm voxels isotrópicos). Foi confirmado que estas lesões eram CMIS corticais usando umMR-guided abordagem histopatologia em 6,7 post-mortem do tecido cerebral humano. Aqui, o protocolo ex vivo RM é apresentada que foi usada em estudos prévios para a validação histopatológico de CMIS corticais. Em segundo lugar, as orientações são fornecidas para a avaliação da CMIS corticais em in vivo 7T MRI. Finalmente, a avaliação do CMIS corticais em T7 foi traduzido para mais amplamente disponível 3T MRI, e as diretrizes são fornecidos como identificar CMIS corticais no 3T.

<table><tbody><tr><td>Fomblin / Galden PFPE</td><td>Solvay Solexis, Bollate, Itália</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de ressonância magnética 7T</td><td>Philips Healthcare, Cleveland, OH, EUA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bobina de cabeça de recepção de 32 canais</td><td>Nova Medical, Wilmington, MA, EUA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MeVisLab</td><td>MeVis Medical Solutions AG, Bremen, Alemanha</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

avaliando cortical cerebral microinfartos em alta resolução mr imagens

Assessing Cortical Cerebral Microinfarcts on High Resolution MR Images

Microinfartos cerebrais são achados freqüentes no cérebro humano post-mortem, e estão relacionados ao declínio cognitivo e demência. Devido a suas pequenas dimensões é um desafio para estudá-los em exames de ressonância magnética clínicos. Foi recentemente demonstrado que microinfartos corticais pode ser representado com ressonância magnética usando elevadas forças do campo magnético (7T). Com base nesta experiência, uma proporção dessas lesões é também visível em baixa resolução 3T MRI. Estes resultados foram corroborados com ex vivo de imagens de post-mortem do tecido cerebral humano, acompanhado pela verificação histopatológico de possíveis microinfartos corticais. Aqui um protocolo ex vivo de imagem é apresentado, com a finalidade de validar MR observada patologia microvascular cerebral com avaliação histológica. Além disso, as orientações são fornecidas para a avaliação da microinfartos corticais em ambos 7T e 3T MR imagens in vivo. Estas diretrizes fornecem pesquisadores wom uma ferramenta para avaliar microinfartos corticais em imagens in vivo das amostras dos doentes maiores, para desvendar ainda mais a sua relevância clínica em declínio cognitivo e demência, e estabelecer essas lesões como um novo biomarcador da doença cerebral pequena embarcação.

Uma impressão da alta resolução e alta qualidade de imagem de uma seqüência ex vivo adquirido em T7 é fornecida <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53125/53125fig4.mp4" target="_blank">aqui (Figura 4).</a> Este é um T2 3D * ponderada ex vivo de digitalização, com uma resolução de isotrópico de 0,18 mm. O tecido foi derivada a partir de uma de 84 anos de idade do sexo feminino demente com doença de Alzheimer patologicamente provado e grave angiopatia amilóide cerebral (CAA). O detalhe da imag...

A alta resolução ex vivo protocolo de imagiologia 7T MR é apresentado, para executar a validação histopatológico MR-guided de patologia microvascular no tecido cerebral humano post-mortem. Além disso, as orientações são fornecidas para a avaliação da microinfartos corticais sobre in vivo 7T, bem como imagens de RM 3T.

Avaliando cortical cerebral microinfartos em alta resolução MR Imagens

Cerebral microinfarcts are frequent findings in the post-mortem human brain, and are related to cognitive decline and dementia. Due to their small sizes ...

O objetivo geral é introduzir microinfartos corticais como um novo marcador de imagem da patologia cerebral microvascular na ressonância magnética. Primeiramente, identificamos microinfartos em exames de ressonância magnética in vivo de sete Tesla. Realizamos ressonância magnética pós-mortem para confirmar a patologia dessas lesões.Aqui demonstramos nosso protocolo de ressonância magnética post mortem e também propomos critérios de classificação para infartos microscópicos em exames de ressonância magnética de sete Tesla, além de indicar a melhor forma de identificá-los em exames post mortem de três Tesla. Se o tecido cerebral humano é uma ferramenta poderosa para preencher a lacuna entre a neuropatologia, de um lado, e a ressonância magnética em FIFO, do outro, isso é particularmente valioso na doença dos pequenos vasos, que envolve um grande número de diferentes tipos de lesões cerebrais.Antes da varredura post mortem, selecione fatias coronais do cérebro com espessura de 10 milímetros, fixadas em formalina. Neste exemplo, três fatias são retiradas das regiões frontal temporal, parietal e occipital do cérebro. Tire fotografias das fatias cerebrais em ambos os lados, ou anote cuidadosamente a orientação das fatias no recipiente e no scanner.Para fins de colocalização de histologia com ressonância magnética, preencha um recipiente que caiba dentro da bobina de cabeça do aparelho de RM com formalina a 10% fresca à temperatura ambiente. Utilize uma cabine de fluxo laminar ao manipular a formalina. Evite bolhas de ar ao colocar as fatias cerebrais no recipiente.Remova a maioria das bolhas de ar agitando suavemente o tecido manualmente. Coloque um recipiente menor dentro do recipiente maior para limitar a quantidade de fluido necessário, bem como para garantir que os fragmentos não se movimentem dentro do recipiente maior. Opcionalmente, remova bolhas de ar adicionais colocando o recipiente em um banho de ultrassom.Em seguida, cubra o recipiente com parafina para prevenir artefatos e proteger a bobina de cabeça do scanner de possíveis contaminações. Utilize um scanner de RM de corpo inteiro com sete TM e uma bobina de cabeça com 32 canais para escanear os blocos cerebrais. Envolva o recipiente em um absorvente cirúrgico ao posicioná-lo na bobina de cabeça para evitar possíveis vazamentos de fluido. Certifique-se de que o recipiente não se mova e de que os blocos permaneçam em posição horizontal.Execute uma varredura de levantamento e corrija o zero de B em homogeneidade utilizando uma ferramenta de shim adequada. Calibre a potência de RF para obter os ângulos de excitação corretos. Em seguida, planeje a aquisição de alta resolução com base na varredura de levantamento para garantir que os cortes cerebrais estejam completamente dentro do campo de visão.Realize a aquisição das fatias cerebrais durante a noite utilizando um protocolo de alta resolução que inclua imagens ponderadas em T2 com sequência 3D FLAIR e em T1 com resolução isotrópica de 0,4 milímetros, além de imagens ponderadas em T2* com resolução isotrópica de 0,18 milímetros. Utilize uma conexão VPN para monitorar o scanner durante a noite, verificando a ocorrência de janelas pop-up ou processos automáticos de software que possam interromper a aquisição. Retorne na manhã seguinte, após um tempo total de varredura de aproximadamente 12 horas, remova as fatias cerebrais da ressonância magnética e, por fim, armazene-as em formol.Avalie microinfartos corticais cerebrais em imagens de RM in vivo de 7,0 T de acordo com os seguintes sete critérios de classificação: microinfartos corticais são hiperintensos em FLAIR, hiperintensos em T2, hipointensos em T1, detectáveis em pelo menos duas vistas do cérebro, restritos ao córtex, distintos dos espaços perivasculares e com dimensão menor ou igual a quatro milímetros, simultaneamente. Visualize as imagens em FLAIR, T1 e T2 para posicionar marcadores nos locais possíveis de lesões. Avalie um hemisfério em FLAIR na vista sagital e examine todo o córtex em busca de lesões hiperintensas focais.Marque as lesões hipointensas com tamanho menor ou igual a quatro milímetros, pois podem ser possíveis microinfartos; repita o procedimento para o outro hemisfério. Em seguida, verifique todas as localizações marcadas em T1 e T2. Descarte uma localização se não for hipointensa em T1 ou não for hipointensa em T2.Por fim, avalie a visão transversal na sequência T1 e T2 com realce. Descarte uma localização se nenhuma lesão estiver visível. Salve todos os marcadores.Avalie os microinfartos corticais em imagens de ressonância magnética in vivo de três teslas de acordo com os seguintes critérios de classificação em três T. Os microinfartos corticais são hipointensos em T1, com dimensão máxima menor ou igual a quatro milímetros, restritos ao córtex e distintos dos espaços perivasculares. Explore a localização de uma lesão cortical hipointensa encontrada em T1 nas imagens ponderadas em FLAIR e T2.Avalie a lesão como um provável microinfarto cortical se a localização for hiperintensa ou iso-intensa na sequência flair e na ponderada em T2. Descarte a lesão se a mesma localização for hiperintensa na ponderada em T2. Primeiro, avalie um hemisfério na ponderada em T1 na vista sagital.Examine todo o córtex em busca de marcadores focais de áreas hipointensas em qualquer lesão hipointensa menor ou igual a quatro milímetros. Repita para o outro hemisfério. Avalie a visão transversal em T1 e simultaneamente verifique todas as localizações marcadas na sequência transversal flair e em T2.Considere a localização como um microinfarto se for hipointensa ou iso-intensa em FLAIR e T2. Descarte uma localização se for hipo-intensa em T2 ou se representar uma variação anatômica. Por fim, recomenda-se descartar possíveis microinfartos corticais em tecido com proximidade imediata a um infarto cortical maior.Salve os marcadores. Este é um exemplo de uma imagem ex vivo ponderada em T2, com resolução isotrópica de 0,4 milímetro em sete Tesla, de um caso com angiopatia amilóide cerebral grave. Aqui, em outro caso, um possível microinfarto foi identificado na sequência FLAIR ponderada em T2 e em T1.Após o exame microscópico das seções histológicas, esse microinfarto revelou-se um microinfarto crônico com gliose e cavitação. Este é um microinfarto cortical em imagens de ressonância magnética in vivo de sete Tesla, onde aparece hipercintenso em FLAIR e T2, e hipercintenso em T1. O microinfarto cortical em ressonância magnética de três Tesla pode ser melhor identificado em imagens ponderadas em T1 de três DT. Aqui, um microinfarto cortical é identificado como uma lesão hipointensa.No T um. O local correspondente é hipercintenso no FLAIR e no T dois. Após treinamento adequado, levará aproximadamente meia hora, em média, para alguém avaliar microinfartos em um exame de ressonância magnética de três Tesla.Gostaríamos também de enfatizar que os critérios de classificação propostos podem precisar ser ajustados dependendo do conjunto de dados disponível. Incentivamos fortemente outros pesquisadores a avaliar microinfartos em seus próprios conjuntos de dados, pois isso ajudará a aumentar rapidamente nossa compreensão da significância clínica dessas lesões. Estamos, portanto, criando um módulo para treinar outros investigadores na classificação de microinfartos.

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Medicine

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Indução cirúrgica de uma lesão cerebral isquêmico no rato é um modelo amplamente utilizado para a pesquisa acidente vascular cerebral. Aqui nós demonstram a indução de isquemia cerebral focal por oclusão da artéria cerebral média. Visualização do infarto resultantes de coloração histológica e ressonância magnética também é mostrada.

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Vários modelos murinos de oclusão da artéria cerebral média (MCAO) são amplamente utilizados em pesquisas sobre o cérebro experimental. Aqui, demonstramos o modelo de transcraniana permanente distal MCAO que produz enfarte cortical consistente de um tamanho correspondente ao dano imposto pela maioria dos acidentes vasculares cerebrais isquémicos humanos.

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Aqui apresentamos um protocolo para determinar o número mínimo de imagens que precisavam ser registradas e calculadas para resolver estruturas subcorticais e testar se as camadas individuais do LGN poderiam ser resolvidas na ausência de ruído fisiológico.

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A ressonância magnética de conectividade funcional em estado de repouso identificou anormalidades em pacientes com uma ampla gama de distúrbios neuropsiquiátricos, incluindo epilepsia devido a malformações do desenvolvimento cortical. A estimulação magnética transcraniana em combinação com EEG pode demonstrar que pacientes com epilepsia apresentam hiperexcitabilidade cortical em regiões com conectividade anormal.

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Este protocolo descreve a aplicação de tomografia combinada fluorescente no infravermelho próximo (NIRF) e imagiologia de micro-computadorizada (microCT) para visualizar tromboêmbolos cerebral. Esta técnica permite a quantificação da carga de trombo e evolução. A técnica de imagem NIRF visualiza fluorescente etiquetado trombo no cérebro extirpado, enquanto que a técnica microCT visualiza trombo no interior de animais vivos usando ouro-nanopartículas.

Combinada Near-infrared imagens fluorescentes e tomografia Micro-computado para Diretamente Visualizando Cerebral tromboêmbolos

É descrito um protocolo para a estimativa de tempo de início de curso em um modelo do rato do curso explorando parâmetros quantitativos a ressonância magnética (qMRI). O procedimento explora MRI de difusão para a delimitação da lesão vascular cerebral agudo e quantitativos T1 e T2 (qT1 e qT2) tempos de relaxamento para o sincronismo de AVC.

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Fornecido aqui é um tutorial prático para um pipeline de processamento de imagem de acesso aberto e padronizado para fins de mapeamento de lesão-sintoma. Uma explicação passo a passo é fornecida para cada etapa de processamento, desde a segmentação manual do infarto na TC/RM até o registro subseqüente ao espaço padrão, juntamente com recomendações práticas e ilustrações com casos exemplares.

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O objetivo geral deste procedimento é obter informações microestruturais quantitativas do hipocampo em um rato com lesão cerebral traumática leve. Isto é feito usando um protocolo avançado difusão-tornado mais pesado da imagem latente de ressonância magnética e a análise baseada região--interesse de mapas paramétricos da difusão.

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Aprenda a avaliar microinfartos corticais cerebrais em imagens de ressonância magnética de alta resolução usando protocolos ex vivo de 7T e critérios de classificação para 7T e 3T. Este método valida a patologia microvascular em tecido cerebral humano pós-morte.

Avaliando cortical cerebral microinfartos em alta resolução MR Imagens

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