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DOI: 10.3791/54969-v
Isabelle R. Miousse1, Igor Koturbash1, Marie-Cécile Chalbot2, Martin Hauer-Jensen3, Ilias Kavouras2, Rupak Pathak3
1Department of Occupational and Environmental Health,University of Arkansas for Medical Sciences, 2Department of Environmental Health Sciences,University of Alabama at Birmingham, 3Division of Radiation Health,University of Arkansas for Medical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol describes techniques for the quantification and characterization of chromosomal aberrations in vitro in RAW264.7 mouse macrophages after treatment with ambient air particulate matter. The method allows for direct visualization of chromosomal damage induced by particulate matter exposure.
Este protocolo descreve técnicas para a quantificação e caracterização de aberrações cromossómicas in vitro em macrófagos de camundongos RAW264.7 após o tratamento com partículas do ar ambiente.
O objetivo geral deste experimento é detectar danos cromossômicos induzidos pela exposição das células ao material particulado, extraído do ar ambiente. Este método pode ajudar a responder a uma questão-chave no campo do material particulado, que é a exposição ao material particulado induz danos cromossômicos? A principal vantagem desta técnica, é que permite a visualização direta dos danos induzidos no material genético.
Depois de coletar e analisar as partículas de acordo com o protocolo de texto, realize a exposição às partículas aquecendo o meio de crescimento completo, 0,25% de tripsina e PBS em banho-maria a 37 graus Celsius, por pelo menos 30 minutos antes do início da cultura. Depois de lavar as células 264,7 cruas, adicione um mililitro da solução quente de tripsina ao prato e desaloje as células do fundo do vaso de cultura de tecidos por raspagem. Em seguida, colete as células e faça uma suspensão unicelular por pipetagem repetida.
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